Microbial growth efficiency in the rumen was studied in sheep given hourly, 31.25 g oaten chaff with either 0.31 and 0.88 g urea or 1.88 and 5.63 g casein (exp. 1) and 33.33 g oaten chaff with 1.04 casein or 0.3, 0.6 and 0.9 g urea or the mixture of the casein and urea (exp. 2). Concentrations of ruminal fluid ammonia increased with increasing nitrogenous supplements. Organic matter digestibility in sacco in the rumen was not different irrespective of N sources. Isoacids and valeric acid increased with increasing ingested casein but decreased with increasing urea intake. Peptide and amino acid pools in ruminal fluid increased with increasing ammonia concentrations (exp. 2) suggesting that proteolytic activity and transportation of peptides and amino acids across microbial membrane of rumen microbes may be regulated by the metabolite mechanism (intracellular amino acids and $NH_4{^+}$, respectively). Densities of total viable and cellulolytic bacteria in ruminal fluid increased with increasing ammonia levels but that of small Entodinia decreased. The density of fungal sporangia growth on oat leaf blades decreased with increasing ammonia concentrations but appeared to remain constant in the presence of casein. Efficiency of net microbial cell synthesis was 15-28% higher when ammonia concentrations increased from 100 to above 200 mg N/l regardless of N sources. In conclusion, supplementation of preformed protein had no effect on rumen digestion and microbial growth efficiency. This could not be accounted for its effect on ruminal fluid ammonia. Increased microbial growth efficiency with increasing ammonia levels may be due to a reduction in the turnover of microbial cells within the rumen.
A series of in vitro incubation studies with washed rumen bacteria were conducted to determine the influence of incubation time and concentrations of peptides, alanine, ammonia nitrogen and carbohydrate on the rate of peptide disappearance and on bacterial growth. Disappearance rate of tri-alanine (ala3) under various conditions was between 30.6 and $58.2mg\;hr^-$ per gram bacterial dry matter. Ala3 was removed from the incubation medium in an almost linear fashion as incubation time and ala3 concentration was increased. Washed rumen bacteria utilized ala3 faster than di-l-alanine (ala2) at all concentrations. Adding 9mM carbohydrate significantly increased ala3 disappearance, but level of ammonia nitrogen had no influence on ala3 disappearance. The presence of alanine in the medium significantly lowered ala3 utilization by rumen bacteria. Bacterial dry matter and nitrogen growth yield were not influenced by alanine and peptides when incubation medium already contained a sufficient level of ammonia nitrogen. Increased ammonia nitrogen in the presence of ala3 did not stimulate bacterial growth. Carbohydrate significantly increased bacterial dry matter and nitrogen growth as expected. Results indicate that the rate of peptide utilization by rumen bacteria may be altered by type and concentration of peptides, and energy supply, and this may be mediated through changes in numbers and type of bacteria.
Rumen bacterial amino acids in sheep on urea diet were monitored to assess a possible change in amino acid synthesis as a long term response to high rumen ammonia environment. A sheep was fed a semipurified diet with soybean meal, followed by a diet with urea as a main nitrogen source. Mixed rumen bacteria were harvested from ruminal fluid taken 3 h after feeding (twice in soybean meal feeding and 6 times in urea feeding) and fractionated as cell wall, proteins and protein-free cell supernatant of monitor amino acids in each fraction. Ruminal ammonia concentration at the sampling ranged from 5.7 to 39.5 mgN/dl. Cell wall and protein fractions of mixed rumen bacteria were stable in their amino acid composition regardless of nitrogen sources of diet and the feeding duration. However, protein-free cell supernatant fraction showed a higher alanine proportion with urea feeding (18.6 and 28.2 molar % of alanine for samples from sheep fed soybean meal and urea, respectively) and its duration (20.6 and 32.9 molar % for samples from sheep on urea diet for 1 and 65 days, respectively). Total free amino acid level of bacteria was depressed in the initial period of urea feeding but restored on 65th day of the feeding. These results suggest that an alanine synthesizing system may develop in rumen bacteria as urea feeding becomes longer.
Objective: An experiment was conducted to investigate the effects of a specific mixture of essential oils (MEO), containing thyme, clove and cinnamon EO, on rumen microbial fermentation, nutrient apparent digestibility and blood metabolites in fistulated sheep. Methods: Six sheep fitted with ruminal fistulas were used in a repeated measurement design with two 24-d periods to investigate the effect of adding MEO at 0 (control), 0.8, and 1.6 mL/d on apparent nutrient digestibility, rumen fermentation characteristics, rumen microbial population and blood chemical metabolites. Animals were fed with a 50:50 alfalfa hay:concentrate diet. Results: Ruminal pH, total volatile fatty acids (VFA) concentration, molar proportion of individual VFA, acetate: propionate ratio and methane production were not affected with MEO. Relative to the control, Small peptides plus amino acid nitrogen and large peptides nitrogen concentration in rumen fluid were not affected with MEO supplementation; while, rumen fluid ammonia nitrogen concentration at 0 and 6 h after morning feeding in sheep fed with 1.6 mL/d of MEO was lower (p<0.05) compared to the control and 0.8 mL/d of MEO. At 0 h after morning feeding, ammonia nitrogen concentration was higher (p<0.05) in sheep fed 0.8 mL/d of MEO relative to 1.6 mL/d and control diet. Ruminal protozoa and hyper ammonia producing (HAP) bacteria counts were not affected by addition of MEO in the diet. Relative to the control, no changes were observed in the red and white blood cells, hemoglobin, hematocrit, glucose, beta-hydroxybutyric acid, cholesterol, total protein, albumin, blood urea nitrogen and aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase concentration. Apparent total tract digestibility of dry matter, crude proten, organic matter, and neutral detergent fiber were not influenced by MEO supplementation. Conclusion:The results of the present study suggested that supplementation of MEO may have limited effects on apparent nutrient digestibility, ruminal fermentation and protozoa and HAP bacteria count, blood cells and metabolites.
Ammonia and/or sulphur dioxide treated and untreated wheat leaf sheaths were compared for cell wall digestion by incubation with rumen liquor for 24 and 48 hours. Scanning electron microscope (SEM) was used to study the relative rate and extent of cell wall digestion. Treated wheat straw leaf sheaths were distorted, with more distortion observed in ammonia and sulphur dioxide combined treatment than any other treatment. Rumen liquor digestion for 24 hours of untreated leaf sheath showed disrupted phloem, partially ruptured parenchyma and vascular tissues and further partially distorted inner bundle sheaths and vascular bundle after 48 hours incubation. Sulphurated leaf sheaths showed extensive degraded parenchyma and sclerenchyma material in 24 hours incubation, however, all tissues were irregulary shaped in 48 hours incubation. In ammoniation, epidermal cell walls and small vascular bundles began to disintegrate by 24 hours incubation, extensively changed structure and degraded epidermal tissue by 48 hours incubation. Combination treatment of leaf sheaths degraded all cell walls of parenchyma, phloem and vascular bundle by 24 hours incubation, however, structures only of inner bundles sheath with extended land, sclerenchyma and cutinized epidermal cell walls remained.
This review summarizes some recent research into ways of improving the productivity of ruminal fermentation by increasing protein flow from the rumen and decreasing the breakdown of protein that results from the action of ruminal microorganisms. Proteinases derived from the plant seem to be of importance to the overall process of proteolysis in grazing animals. Thus, altering the expression of proteinases in grasses may be a way of improving their nutritive value for ruminants. Inhibiting rumen microbial activity in ammonia formation remains an important objective: new ways of inhibiting peptide and amino acid breakdown are described. Rumen protozoa cause much of the bacterial protein turnover which occurs in the rumen. The major impact of defaunation on N recycling in the sheep rumen is described. Alternatively, if the efficiency of microbial protein synthesis can be increased by judicious addition of certain individual amino acids, protein flow from ruminal fermentation may be increased. Proline may be a key amino acid for non-cellulolytic bacteria, while phenylalanine is important for cellulolytic species. Inhibiting rumen wall tissue breakdown appears to be an important mechanism by which the antibiotic, flavomycin, improves N retention in ruminants. A role for Fusobacterium necrophorum seems likely, and alternative methods for its regulation are required, since growth-promoting antibiotics will soon be banned in many countries.
An experiment was conducted on 3 male rumen fistulated adult buffaloes fed on wheaten straw and concentrate mixture in a Latin square design to study the impact of niacin supplementation on rumen metabolites. Three animals were fed wheaten straw+concentrate mixture (group I, control), wheaten straw+concentrate mixture+100 ppm niacin (group II), and wheaten straw +concentrate mixture+200 ppm niacin (group III). After 21 days feeding, rumen liquor was drawn for 3 consecutive days at different time intervals (0, 2, 4, 6 and 8 h) to study the various rumen metabolites i.e., rumen pH, ammonia-N, total-N, trichloroacetic acid precipitable-N, non-protein nitrogen, total volatile fatty acids, their fractions and number of protozoa. Mean pH values in strained rumen liquor (SRL) of animals in 3 groups were 6.64, 6.71 and 6.67, indicating no statistically significant difference. Results revealed a significant (p<0.01) increase in TVFA concentration among the supplemented groups (group II and III) in comparison to control group. Mean TVFA concentration (meq/dl) was 9.75, 10.97 and 11.44 in 3 groups respectively. The highest concentration of TVFA was observed at 4 h and minimum at 0 h in all the 3 groups. The percentage of acetic, propionic, butyric and isobutyric acid was statistically similar among the three groups. The mean ammonia-N concentration (mg/dl SRL) was significantly (p<0.01) lower in group II (16.38) and group III (15.42) than group I (18.14). Ammonia-N concentration was higher (p<0.01) at 4 h as compared to all the time intervals. The mean total-N concentration (mg/dl SRL) was higher (p<0.01) in group II (74.16) and group III (75.47) as compared to group I (62.04). Total-N concentration was higher (p<0.01) at 4 h as compared to other time intervals and lowest value was recorded at 0 h.Concentration of TCA-ppt-N (mg/dl SRL) was significantly (p<0.01) lower in control group as compared to niacin supplemented groups. Mean value of NPN (mg/dl SRL) was significantly (p<0.01) lower in group III (23.21) as compared to group I (25.71), whereas groups I and II, and groups II and III were similar to each other. Total protozoa number (${\times}10^4$/ml SRL) ranged from 18.06 to 27.41 in group I, 20.89 to 38.44 in group II and 27.61 to 39.45 in group III. The mean protozoa number was significantly (p<0.01) higher in SRL of group II (27.60) and III (30.59) as compared to group I (22.48). It can be concluded from the study that supplementation of niacin in the diet of buffaloes had improved the rumen fermentation by decreasing the concentration of ammonia-N and increasing protein synthesis.
Increasing levels of ammonia-N in the rumen fluid used for in vitro incubation were achieved by supplementation of the ration of the donor cows with urea and by addition of urea either with or without glucose to the rumen fluid after collection. The ration of the donor animals consisted of wheat straw (80%) and maize silage (20%). During the second half of the experiment the basal ration was supplemented with a mineral mixture. Wheat straw, Guinea grass and two rice straw varieties were incubated with the various kinds of rumen fluid. Parameters studied were: solubility, apparent organic matter disappearance after 48 hours of incubation ($OMD_{48}$), rate of organic matter degradation from 0 to 24 hours of incubation ($k_1$) and from 24 to 95 hours ($k_2$). The concentration of ammonia-N in the rumen fluid at which 95% of the maximal $OMD_{48}$ and k1 were reached (88.2 and 100.0 mg/l) were independent of the feed. With regard to the $k_2$ the required ammonia-N concentration to reach 95% of the maximal $k_2$ differed per feed. Mineral supplementation increased the OMD48 and $k_1$, but not the solubility and $k_2$. Glucose addition in combination with urea had no beneficial effect compared to urea supplementation alone.
The rumen degradability of rice straw (untreated, urea-sprayed, urea-treated), grasses (Panicum maximum, Pennisetum clandestinum) and rice bran was compared. The mean in vivo organic matter digestibility of the untreated (US), urea-supplemented (SS) and urea-ammonia treated (TS) rice straw were 50.9, 53.9 and 57.4%, respectively. Rice bran contained extremely high levels of acid-insoluble ash (25.2% DM), and its OMD was 36.1%. Grasses had OMD values around 66%. Degradability measurements were performed with buffaloes using the nylon bag technique. The organic matter (OM) disappearance data were fitted to an model which was used to describe degradation pattern. The mean potentially degradable fraction for US, SS and TS was 61.5, 61.9 and 69.4%, respectively. Urea-ammonia treatment increased both the amount of OM degraded and the rate at which it was degraded in the rumen. Both grasses had similar values for degradable fraction (around 65%) and for rate constant for degradation (0.04). Rice bran contained high proportions of readily soluble material (23.9%), but the degradable OM fraction was only 13.2%. The low quality of rice bran is attributed to the contamination of rice hulls during processing.
Four rumen-fistulated swamp buffaloes steers were used in a change-over experiment. This experiment was designed to provide a comparison of the effect of urea-ammonia treatment of rice straw with untreated rice straw. Nitrogen, mineral and trace elements were supplied at adequate levels to both diets in order to overcome deficiencies which may have otherwise confounded a direct comparison. There was a 46% increase in the intake of digestible organic matter (OM) with the urea-ammonia treated diet. This was contributed by a 17% increase in the digestibility of OM and a 25% increase in the voluntary intake of OM. Of the cell wall fraction, the digestibility of hemicellulose increased by the greatest amount (26%). There was an increased rate of passage of particulate matter out of the rumen for the treated straw, along with the increased rate of OM fermentation resulted in a 9% decrease in the amount of digesta dry matter (DM) contained in the rumen. The volatile fatty acid (VFA) pool in the rumen was 24% higher for the treated diet.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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