To identify genes involved in rice Pi5-mediated disease resistance to Magnaporthe oryzae, we compared the proteomes of the RIL260 rice strain carrying the Pi5 resistance gene with its susceptible mutants M5465 and M7023. Proteins were extracted from the leaf tissues of both RIL260 and the mutant lines at 0, 24, and 48 h after M. oryzae inoculation and separated by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2-DE). Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) analysis identified eight proteins that were differently expressed between the resistant and susceptible plants (three down- and five up-regulated proteins in the mutants). The down-regulated proteins included a triosephosphate isomerase (spot no. 2210), a 2,3-bisphosphoglycerate-independent phosphoglycerate mutase (no. 3611), and an unknown protein (no. 4505). In addition, the five up-regulated proteins in the mutants were predicted to be a fructokinase I (no. 313), a glutathione S-transferase (no. 2310), an atpB of chloroplast ATP synthase (no. 3616), an aminopeptidase N (no. 3724), and an unknown protein (no. 308). These results suggest that proteomic analysis of rice susceptible mutants is a useful method for identifying novel proteins involved in resistance to the M. oryzae pathogen.
Leaf structure is one of the important agronomic traits. A rolled leaf mutant was induced from an ethyl methane sulfonate (EMS)-treated japonica rice, 'Koshihikari'. The rolled leaf mutant showed phenotypes of reduced leaf width and leaf rolling. In addition, several abnormal morphological characteristics were observed, including dwarfism, defected panicle, delayed germination, and lower seed-setting. Microscopic analysis revealed that the number of small veins was decreased and the sizes of adaxial bulliform cells were reduced in the mutant leaves. The genetic study with two $F_2$ populations from the crosses of the rolled leaf mutant with 'Koshihikari' and Milyang23 suggested that the mutant phenotype might be controlled by a single dominant gene.
본 논문은 가뭄저항성 유전자를 도입한 GM벼(CaMsrB2-8)를 모품종 일미와 비교하여 잡초화 가능성의 여부를 판단하고자 실시하였다. GM벼(CaMsrB2-8)의 생육특성과 발아율 실험 결과 모품종 일미와 큰 차이를 보이지 않았고, 모든 종자는 6일 후 발아하였다. GM벼(CaMsrB2-8)와 일미의 수발아성 실험을 $23{\pm}2^{\circ}C$ 온실에서 충분한 물을 분무하여 40일간 진행한 결과 수발아는 발생하지 않았다. 라튜닝 후 GM벼(CaMsrB2-8)와 일미의 지상부 생장을 비교한 결과 7-14일 동안 일미보다 GM벼(CaMsrB2-8)의 성장이 빠른 것처럼 보였으나 그 이후 14-21일 동안에는 두 개체가 비슷한 성장세를 보였다. GM벼(CaMsrB2-8)와 일미의 탈립율은 두 개체가 비슷하였으며 등숙율 또한 90%이상으로 비슷한 수준을 보였다. 종자의 월동성을 조사한 결과 발아율 0%로 자연상태에서 월동 후 발아 가능성은 없을 것으로 보인다. 따라서 본 연구를 토대로 GM벼(CaMsrB2-8)에 도입된 내건성유전자는 벼의 농업적 특성을 변화시키지 않는 것으로 판단되며 따라서 GM벼(CaMsrB2-8) 재배 시 잡초화 되지는 않을 것으로 생각된다.
Chung, Eu Jin;Hossain, Mohammad Tofajjal;Khan, Ajmal;Kim, Kyung Hyun;Jeon, Che Ok;Chung, Young Ryun
The Plant Pathology Journal
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제31권2호
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pp.152-164
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2015
Biological control of major rice diseases has been attempted in several rice-growing countries in Asia during the last few decades and its application using antagonistic bacteria has proved to be somewhat successful for controlling various fungal diseases in field trials. Two novel endophytic Bacillus species, designated strains YC7007 and $YC7010^T$, with antimicrobial, plant growth-promoting, and systemic resistance-inducing activities were isolated from the roots of rice in paddy fields at Jinju, Korea, and their multifunctional activities were analyzed. Strain YC7007 inhibited mycelial growth of major rice fungal pathogens strongly in vitro. Bacterial blight and panicle blight caused by Xanthomonas oryzae pv. oryzae (KACC 10208) and Burkholderia glumae (KACC 44022), respectively, were also suppressed effectively by drenching a bacterial suspension ($10^7cfu/ml$) of strain YC7007 on the rhizosphere of rice. Additionally, strain YC7007 promoted the growth of rice seedlings with higher germination rates and more tillers than the untreated control. The taxonomic position of the strains was also investigated. Phylogenetic analyses based on 16S rRNA gene sequences indicated that both strains belong to the genus Bacillus, with high similarity to the closely related strains, Bacillus siamensis KACC $15859^T$ (99.67%), Bacillus methylotrophicus KACC $13105^T$ (99.65%), Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum KACC $17177^T$ (99.60%), and Bacillus tequilensis KACC $15944^T$ (99.45%). The DNA-DNA relatedness value between strain $YC7010^T$ and the most closely related strain, B. siamensis KACC $15859^T$ was $50.4{\pm}3.5%$, but it was $91.5{\pm}11.0%$ between two strains YC7007 and $YC7010^T$, indicating the same species. The major fatty acids of two strains were anteiso-$C_{15:0}$ and iso $C_{15:0}$. Both strains contained MK-7 as a major respiratory quinone system. The G+C contents of the genomic DNA of two strains were 50.5 mol% and 51.2 mol%, respectively. Based on these polyphasic studies, the two strains YC7007 and $YC7010^T$ represent novel species of the genus Bacillus, for which the name Bacillus oryzicola sp. nov. is proposed. The type strain is $YC7010^T$ (= KACC $18228^T$). Taken together, our findings suggest that novel endophytic Bacillus strains can be used for the biological control of rice diseases.
Reduction in stratospheric ozone layer increases the amount of ultraviolet-B radiation (UVB: 280-320 nm) that reaches the earth ’ s surface. UVB radiationcan damage plants, resulting in decrease in growth and productivity. UVB-augmentation studies have indicated that the sensitivity to UVB radiation in plants varies among the species and cultivars. However. there are no definitive answers for the mechanisms of UVB-resistance in higher plants and for bioengineering design and development of UVB-tolerant plants. We have been studying physiological and biochemical aspects of the effects of UVB radiation on growth and yield of rice COryza sativa LJ. aiming to clarify the mechanism of resistance to UVB radiationin rice. At this meeting. weintroduce our research as followed: (1) supplementary UVB radiation has inhibitory effects on the growth. yield and grain development of rice; (2) UVB sensitivity of rice varies widely among cultivars; (3) among Japanese rice cultivars. Sasanishiki. a leading variety in northeast Japan. is more resistant to UVB. while Norin 1. a progenitor of Sasanishiki. is less resistant; (4)UV-sensitive Norin 1 cultivar is deficient in photorepair of UVB-induced cyclobutane pyrimidine dimer (CPD). and this deficiency results from one amino acid residue alteration of CPD photolyase. These results suggest that spontaneously occurring mutation in CPD photolyase gene could lead to difference in UVB sensitivity in rice. and that CPD photolyase might be a useful target for improving UVB-sensitivity in rice by selective breeding or bioengineering of UVB-tolerant rice.
게르마늄의 약리효능이 알려짐에 따라 게르마늄이 강화된 기능성 농산물의 요구도가 높아지는 추세이다. 본 연구는 게르마늄의 농업적 이용에 대한 기초 자료를 제공하고자 실시하였으며, 벼의 생육 및 게르마늄 흡수에 미치는 게르마늄처리 효과는 다음과 같다. 게르마늄을 0, 2.5, 5.0, 7.5 및 10.0 mg/kg으로 처리한 토양을 와그너포트에 넣어 벼를 재배한 결과, 게르마늄 처리농도가 증가할수록 게르마늄 독성의 증가로 초장, 수장, 수수 및 수량이 급격히 감소하였으며 게르마늄 2.5 mg/kg 이상에서는 게르마늄 독성이 발생하였다. 게르마늄 처리농도가 증가 할수록 벼의 게르마늄 흡수량은 증가하였으나 벼의 게르마늄 이용률은 게르마늄 2.5, 5.0, 7.5 mg/kg 처리에서 각각 20.7, 12.5 및 7.5%로서 게르마늄 처리농도가 증가할수록 감소하였다. 벼의 부위별 게르마늄 함량은 볏짚>왕겨>현미 순으로 높았다. 게르마늄 2.5 mg/kg 처리시 볏짚 왕겨 및 현미의 게르마늄 함량은 각각 103.4, 30.2 및 3.02 mg/kg 이었고, 볏짚과 왕겨에서는 게르마늄 무처리에서도 각각 2.9 및 3.9 mg/kg을 함유하고 있었다. 쌀의 아미노산 함량을 분석한 결과 게르마늄 처리농도가 증가할수록 Asx., Thr., Ser. 등 대부분 종류의 아미노산 함량이 증가하였으며, 그 결과 현미중 질소흡수량도 증가하였다.
Thanks to spectacular advances in the techniques for identifying proteins separated by two-dimensional electrophoresis and in methods for large-scale analysis of proteome variations, proteomics is becoming an essential methodology in various fields of plant sciences. Plant proteomics would be most useful when combined with other functional genomics tools and approaches. A combination of microarray and proteomics analysis will indicate whether gene regulation is controlled at the level of transcription or translation and protein accumulation. In this review, we described the catalogues of the rice proteome which were constructed in our program, and functional characterization of some of these proteins was discussed. Mass-spectrometry is a most prevalent technique to identify rapidly a large of proteins in proteome analysis. However, the conventional Western blotting/sequencing technique us still used in many laboratories. As a first step to efficiently construct protein data-file in proteome analysis of major cereals, we have analyzed the N-terminal sequences of 100 rice embryo proteins and 70 wheat spike proteins separated by two-dimensional electrophoresis. Edman degradation revealed the N-terminal peptide sequences of only 31 rice proteins and 47 wheat proteins, suggesting that the rest of separated protein spots are N-terminally blocked. To efficiently determine the internal sequence of blocked proteins, we have developed a modified Cleveland peptide mapping method. Using this above method, the internal sequences of all blocked rice proteins (i. e., 69 proteins) were determined. Among these 100 rice proteins, thirty were proteins for which homologous sequence in the rice genome database could be identified. However, the rest of the proteins lacked homologous proteins. This appears to be consistent with the fact that about 30% of total rice cDNA have been deposited in the database. Also, the major proteins involved in the growth and development of rice can be identified using the proteome approach. Some of these proteins, including a calcium-binding protein that fumed out to be calreticulin, gibberellin-binding protein, which is ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase activate in rice, and leginsulin-binding protein in soybean have functions in the signal transduction pathway. Proteomics is well suited not only to determine interaction between pairs of proteins, but also to identify multisubunit complexes. Currently, a protein-protein interaction database for plant proteins (http://genome .c .kanazawa-u.ac.jp/Y2H)could be a very useful tool for the plant research community. Recently, we are separated proteins from grain filling and seed maturation in rice to perform ESI-Q-TOF/MS and MALDI-TOF/MS. This experiment shows a possibility to easily and rapidly identify a number of 2-DE separated proteins of rice by ESI-Q-TOF/MS and MALDI-TOF/MS. Therefore, the Information thus obtained from the plant proteome would be helpful in predicting the function of the unknown proteins and would be useful in the plant molecular breeding. Also, information from our study could provide a venue to plant breeder and molecular biologist to design their research strategies precisely.
Byun, Chae-Ho;Kwon, Gi-Jin;Lee, Do-Won;Wojdak, Jeremy M.;Kim, Jae-Geun
Journal of Ecology and Environment
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제31권3호
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pp.213-223
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2008
The increasing area of abandoned rice fields could provide new opportunities for wetland restoration in Asia. However, it is unknown how quickly or completely abandoned rice fields will recover from agricultural disturbances. We assessed water quality and plant community succession in abandoned rice fields with different hydrology in a mountain valley to understand the effects of hydrological regime on recovery. Water level, soil redox potential, water quality, plant composition, and primary production were measured. The sites, coded as D6, N13, and N16, had been recovering for 6, 13, and 16 years by 2006. N13 and N16 have been recovering naturally whereas D6 has been drained with a nearby dike and was tilled in 2001. The typical hydroperiods of D6, N13, and N16 were no surface water, permanently flooded, and seasonally flooded, respectively. The major change in vegetation structure of both D6 and N13 was the replacement of herbaceous species by woody species. Drawdown accelerated this change because Salix koreensis grew better in damp conditions than in flooded conditions. Phragmites japonica reduced plot-level plant species richness. The removal efficiency of $NH_4-N$, $NO_3-N$, and $PO_4-P$ from water varied seasonally, ranging between -78.8 to 44.3%, 0 to 97.5%, and -26.0 to 44.4%, respectively. In summary, abandoned rice fields quickly became suitable habitat for native wetland plant species and improved regional water quality. Variation among our sites indicates that it is likely possible to manage abandoned rice fields, mostly through controlling hydrology, to achieve site-specific restoration goals.
In soil-to-plant transfer of heavy metals, the amount absorbed and accumulated varies depending on the environment conditions. The absorption rate of cadmium (Cd) in plants differs considerably depending on the bioavailability of Cd in the soil, while usage by various organic matters is also reported to affect absorption patterns. Therefore, this study aimed to identify the difference in the transfer of essential metal ions and Cd to various plant parts when rice straw compost was used to cultivate soybean (Glycine max L. cv. Daepung). In the two-leaf stage of soybean cultivated in a greenhouse, Cd was mixed in the soil, after which the Cd and essential metal ions contents, and physiological changes of soybean seedlings were studied on the 15th and 25th day. The Cd toxicity in the plant was reduced with the use of rice straw compost. Further, the Cd content varied with the plant part, and was higher in young leaves (3rd and 4th leaf) than in the stem. When analyzed by leaf age, the Cd transfer was highest in young leaves (3rd and 4th leaf), followed by mature leaves (1st and 2nd leaf). While there was no significant difference between plant tissues in the absorption rate of copper (Cu) and zinc (Zn) when rice straw compost was used against Cd toxicity, the absorption rate of manganese (Mn) and iron (Fe) showed a significant decline in both the control and rice straw compost treatment conditions, as well as a significant difference between leaf ages. Therefore, these results confirm that the use of rice straw compost against Cd toxicity is effective, and implies that the rate of Cd transfer in the soybean plant varies significantly with leaf age.
Jung, Ga Young;Park, Ju Yeon;Choi, Hyo Ju;Yoo, Sung-Je;Park, Jung-Kwon;Jung, Ho Won
The Plant Pathology Journal
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제32권4호
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pp.357-362
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2016
ALD1 (ABERRANT GROWTH AND DEATH2 [AGD2]-LIKE DEFENSE1) is one of the key defense regulators in Arabidopsis thaliana and Nicotiana benthamiana. In these model plants, ALD1 is responsible for triggering basal defense response and systemic resistance against bacterial infection. As well ALD1 is involved in the production of pipecolic acid and an unidentified compound(s) for systemic resistance and priming syndrome, respectively. These previous studies proposed that ALD1 is a potential candidate for developing genetically modified (GM) plants that may be resistant to pathogen infection. Here we introduce a role of ALD1-LIKE gene of Oryza sativa, named as OsALD1, during plant immunity. OsALD1 mRNA was strongly transcribed in the infected leaves of rice plants by Magnaporthe oryzae, the rice blast fungus. OsALD1 proteins predominantly localized at the chloroplast in the plant cells. GM rice plants over-expressing OsALD1 were resistant to the fungal infection. The stable expression of OsALD1 also triggered strong mRNA expression of PATHOGENESIS-RELATED PROTEIN1 genes in the leaves of rice plants during infection. Taken together, we conclude that OsALD1 plays a role in disease resistance response of rice against the infection with rice blast fungus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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