세가지 다른 광전조건하에서 (3,000Lux, 2,000Lux, 500Lux) Rc. gelatino년와 Rc. tenuis의 intracytoplasmic memrane 형성을 전자현민경으로 관찰한 결과 3,000Lux하에서의 배양에서는 Rc. gelatino년에서 가장 잘 membrane invagination을 관찰 할 수 있었고, Rc.tenuis에 대해서는 막의 invagination을 관찰할 수 있었다는 것과 관찰 할 수 없었다는 두 가지 연구보가 있는데, 본 연구에서는 후자와 일치하였고 auxin(10M)은 생장에 지장이 없었으나 intracytoplasmic membrane 형성에는 별 영향이 없는 것으로 관찰되었다.
광합성세균인 Rhodocyclus gelatinosus KUP-74의 휴지균체에 의한 균체외 ${\delta}-aminolevulinate$(ALA) 생산 효율성에 관하여 검토하였다. 균체외 ALA의 최대 생산치를 위하여 1 ml ALA 생산계는 1.05 mg의 휴지균체로 6시간의 배양을 필요로 하였다. 또한, 이 조건에서 ALA 생산의 유도물질인 levulinate나 L-glutamate 등은 균체외 ALA 생산에 있어서 비교적 낮은 효과를 나타내었다. 반면에, ALA 생산계의 부피와 이에 적합한 균체밀도가 효과적인 ALA 생산을 위하여 중요한 요인으로 나타났다. 휴지균체의 안정한 ALA 생산유지를 위한 수명은 휴지균체를 고정화 시키므로써 크게 연장되었다.
Aminolevulinic acid(ALA) was shown to be synthesized via active pathways of either C4 or C5 ALA biosynthesis in cells of a photosynthetic bacterium, Rhodocyclus gelatinosus KUP-74, where the C5 pathway was appeared to be preferntially expressed in the cells. It was strongly suggested that L-glutamine might be utilized more effectively than L-glutamate to synthesize ALA via C5 pathway in this bacterium from the fact of relationship between the cellular uptake rates of glutamate and its Gamma-derivaties and corresponded ALA productivities in vitro and in vivo.
A novel system has been developed to produce ${\delta}-aminolevulinic$ acid (ALA) using the intact cells of late logarithmic phase of Rhodocyclus gelatinosus KUP-74. The system was shown optimum yield of extracellular ALA under a condition of anaerobic light irradiation (4 Klux) at $30^{\circ}C$ with no variation in cell mass. The rate of extracellular ALA formation was stimulated by low doses of either $C_4\;or\;C_5$ ALA biosynthetic precursors, where 5 mM ($C_4) and 3 mM ($C_5) of each precursors were appeared to generate the maximum rates of 3.3 and 4.0 nmoles of ALA per 0.35 mg cells per hr, respectively. Half-life of the system was 10 hr in a sense of an ability of portage transport of L-glutamate, and sequential dose of this compound was resulted in promising recovery of the ALA.
Various analytical methods such as electron microscopy, quinone analysis, and 16S rDNA sequencing studies were used to investigate the microbial communities and to identify the microorganisms responsible for enhanced biological phosphorus removal (EBPR) in an anaerobic/aerobic sequencing batch reactor (SBR) fed with acetate. Electron photomicrographs showed that oval-shaped microorganisms of about $0.7\;{\sim}\;1\;{\mu}m$ in diameter dominated the microbial sludge. These microorganisms contained polyphosphate granules and glycogen inclusions, which suggests that they are a kind of phosphorus accumulating organism. Quinone and 16S rRNA sequence analyses showed that the members of Proteobacteria beta subclass were the most abundant species, which were affiliated with the Rhodocyclus-likes group. Phylogenetic analysis revealed that the two dominating clones of the beta subclass were most distantly related to Propionivibrio dicarboxylicus DSM 5885 and Rhodocyclus tenuis DSM 109 with about 95% and 96% sequence similarity, respectively. Therefore, it was concluded that the oval-shaped organisms related to the Rhodocyclus-likes group are likely to be responsible for biological phosphorus removal in SBR operation supplied with acetate.
한국의 경기도 일대의 하천으로부터 광합성 박테리아 29균주를 분리하였다. 분리균주들은 Rhodopseudomonas blastica, Rhodocyclus gelationsus, Rhodocyclus tenuis, Rhodopseudomonas rutila로 동정되었다. 분리 동정된 광합성 박테리아들을 이용한 하수내 영양 염류 제거효율을 높이기 위한 고도처리 시스템을 연구하였다. 광합성 세균을 이용한 고도처리 시스템을 이용하여 합성폐수의 유기물 제거율 97∼99%, T-N 제거율 85∼97%, T-P 제거율 68∼99%을 얻을 수 있었다. 또한, 실폐수의 경우 유기물 제거율 96∼99%, T-N제거율 65∼95%, 및 T-P 제거율 63∼99%의 높은 폐수처리율을 얻을 수 있었다.
토양으로부터 ${\delta}-aminolevulinic$ acid(ALA)의 생산성이 우수한 광합성세균 KUP-74f주를 분리하여 균학적 성질을 검토한 결과 이 균주는 Rhodocyclus gelatinosus로 동정되었다. 균의 배양은 $30^{\circ}C$, pH 6.8, 4Klux 텅스텐 광조도하에서 혐기적 정치배양하였으며, 배양 10일 후의 균체외 ALA 생산량은 5mg/l이었다. L-Glutamic acid를 제외한 Lascelles의 기본배지에 glycerol 0.5%(v/v)를 첨가 배양함으로써 ALA는 8 mg/l까지 증가하였으며, glycine과 succinic acid를 각 10 mM 첨가 배양함으로써 12 mg/l의 ALA가 생산되었다. 30 mM glutathione(redo-cod)의 첨가배양에 의하여 ALA 생산은 저하 되었으며, D,L-glutamic acid 및 D,L-glutamine에 의하여 ALA 생산이 late induction 되어 최고 21 mg/1에 이르렀다. ALA의 최대 생산량에 소요되는 배양시간은 ALA 생합성에 관한 $C_4$, $C_5$ pathways의 precursors 첨가시 각각 107 시간과 262시간이었다. 기본배지에 10 mM levulinic acid(LA)와 10 mM glycine을 동시에 첨가 배양함으로써 ALA 생산량은 40mg/l로 증가하였다.
Rhodocyclus gelatinosus KUP-74의 고농도 휴지균체로부터 ${\delta}-aminolevulinate$(ALA)를 연속적으로 생산하기 위한 최적조건을 검토하였다. 균체외 ALA양은 20 mg cells/ml의 균체농도까지는 농도 증가에 따른 rectangular hyperbola의 증가양식을 보였으나, 그 이상의 균체농도는 ALA 생산에 전혀 증가효과를 보이지 않았다. 20 mg cells/ml의 반응계에서, 균체외 ALA의 효과적 생산을 위한 첨가물질의 최저농도는 levulinate 4 mM과 L-glutamate 5 mM로 나타났으며, 배양 3시간후 ALA 양의 최대치를 보였다. 한편, Ca-alginate를 이용한 포괄법으로 고정화시킨 균체로부터 효과적으로 ALA를 생산하기 위한 첨가물질의 최적농도는 levulinate 6 mM과 L-glutamate 10 mM로 나타났으며, 배양 6시간째에 균체외 ALA 양의 최대치를 보였다. 또한, 이 조건 하에서 고정화균체와 고농도의 휴지균체에 의한 ALA의 연속생산성을 검토한 결과, 이들 균체에 의한 50% ALA 생산성은 각각 185시간과 100시간에서 나타났으며, 생산된 균체외 ALA의 회수를 위해서는 균체를 고정화시키는 방법이 효과적이었다.
태국의 토양으로부터 분리한 젤라틴 분해능을 갖는 광합성세균 T-20주(株)는 직경이 $0.6{\sim}0.7{\mu}m$의 적색 간균으로써, Bacteriochlorophyll a의 흡수극대는 870nm이었고 또한, 퀴논종(種)은 UQ-8을 나타내었다. 유기 화합물로써 citrate, aspirate, glutamate, fractose 등을 이용하였다. 이상의 결과로부터 T-20주는 Bergey's Manual of Systematic Bacteriology(1989)에 기재된 Rhodocyclus gelatinosus와 일치한다.
홍색 비유황 고아합성세균들중에 몇종을 선택하여 bacteriocin 생산실험을 실시하였다. 그 결과, Rhodobacter capsulatus, Rhodobacter sphaeroides 그리고 Phodocylus gelatinosus의 세균들이 bacteriocin을 분비하는 것으로 나타났으며 특히 Rhodobacter capsulatus ATCC 17016은 cell-bound bacteriocin도 생산하는 것으로 나타났다. 대부분의 경우, 근연종들간에 bacteriocin이 분비되는 것으로 나타났으나, 비교적 우연관계가 먼 Phodocylus gelatinosus와 Rhodopseudomonas sulfoviridis간에도 bacteriocin이 분비되는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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