Ubiquinone-10생성 광합성 세균을 선정하기 위하여 경상북도 대구 근교의 강, 논, 호수 등의 수계혐기층에서 토양시료를 채취하거나 유기 폐수 중에서 시료를 채취하였으며. 총 50점의 시료에서 130주의 광합성 세균을 분리하였으며 이 중에서 ubiquinone-10의 생성이 가장 많은 균주번호 N-2를 최종 선정하였다. 선정된 균주의 미생물학적 특성을 규명한 결과 Rhodobacter sp.와 거의 일치하였으며 이 균주는 이와 동일한 균주이거나 유사한 근연의 균으로 판단하여 본 분리균주 N-2를 Rhodobacter sp. N-2로 명명하였다. 본 균주는 anaerobic light로 배양할 때가 aerobic dark일 때보다 훨신 생육이 양호하였다. 분리균 N-2의 growth factor는 biotin, thiamin, niacin중 하나이며, 3가지를 동시에 첨가하였을 때 완전한 생육을 나타낸다. 유황화합물 H$_2$S를 첨가하였을 때 매우 적은 농도에서 본 균주의 성장이 저해되었다.
한국 서해안과 남해안 47개소의 해수와 mud 시료로부터 광합성세균으로 유추되는 13개의 균주를 분리하였고, agar-shake tube method와 RAPD-PCR을 이용하여 4개 서로 다른 균주를 순수분리 하였다. 4개의 균주 중 폐수분해능이 가장 뛰어난 균을 선정하여, 형태학적, 배양적, 생화학적 특성 및 16S rRNA sequencing에 의한 동정결과 purple, sulfur bacteria 쪽에 가까웠으나 형태학적, 배양학적, 생화학적 특성이 purple, non-sulfur bacteria의 Rhodobacter 속에 가장 근접하여, Rhodobacter sp. EGH-24로 명명하였다.
A species of facultative photo-organotrophic, purple, non-sulfur bacterium was isolated from the 47 point at west and south coast of Korea in September 2001. Separated 13 samples of changes with red color under 28-32$^{\circ}C$, 3000 lux, anaerobe conditions for 7 days cultivated in basal medium. For pure isolation from 13 samples, we used agar-shake tube method (0.4 % agar) and separated 5 strains through 13-repetition test. EGH-24 and EGH-30 was identified as the same strain through the RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)-PCR of strain EGH-9, EGH-13, EGH-23, EGH-24, EGH-30. Four isolates cultivated in synthesis wastewater for wastewater biodegradation test. EGH-24 was selected with efficient wastwater treating strain. Based on the results obtained from morphology, nutrient requirements, major bacteriochlorophyll content, 16S-rDNA phylogenetic analysis, EGH-24 strain may be identified as a new strain of the genus Rhodobacter and named Rhodobacter sp. EGH-24.
유기물이 많고 작물생육이 양호한 시설 및 논토양에서 우점하는 광합성 세균을 분리하여 대두박 등의 유기물질과 혼합하여 혼합유기질 비료를 개발하였고 상추에 대한 시용효과를 검토하였다. 광합성 세균은 시설 및 논토양에서 형태적으로 가장 분포도가 많은 균주를 선정하고 이를 SA16 균주로 명명하였다. 선발된 균주는 폭 $0.5{\sim}1.2{\mu}m$, 길이 $2{\sim}2.5{\mu}m$의 간균 혹은 구균에 가까운 형태로 관찰되었으며 16S rDNA 분석으로 1.3 kb DNA 단편을 얻어 염기서열을 분석한 결과 Rhodobacter sp.와 가장 유사한 것으로 나타났다. 질소기준으로 토양 검정시비 처리구와 동량인 혼합유기질비료 0.90 Mg $ha^{-1}$ 처리구는 대조구 보다 주당 엽수는 2장 정도 많았고 뿌리길이도 2 cm 정도 길었다. 혼합유기질 비료 시용량별 수확량은 $0.90{\geqq}0.45>1.35Mg\;ha^{-1}$ 순으로 많았으며 5% 수준에서 처리간에 유의성이 인정되었고 최대 수확량을 얻을 수 있는 적정 시용량을 2차 회귀곡선($y=-0.0008x^2+0.1174x+21.332,\;R^2=0.9951$)으로 구한 결과 0.72 Mg $ha^{-1}$로 나타났다. 수확 후 토양 공극율은 혼합유기질 비료1.35 Mg $ha^{-1}$ 처리구가 58.8%로 가장 좋은 것으로 나타났으며 혼합유기질 비료 처리에 따른 토양중 호기성세균의 분포는 혼합유기질 비료 0.90 및 1.35 Mg $ha^{-1}$ 처리구가 12.4, 및 $12.8{\times}10^6CFU\;g^{-1}$로 가장 높았다.
한국의 서해안과 남해안 47개소의 해수와 mud 시료로부터 광합성세균으로 유추되는 13개의 균주를 분리하였고, agar-shake tube method와 RAPD-PCR을 이용하여 4종의 서로 다른 균주를 순수분리 하였다. 이들 4종의 균주 중 폐수분해능이 우수한 균주를 선정하여, 형태학적, 배양적, 생화학적 특성 및 16S rRNA sequencing에 의한 동정을 실시하였고, 그 결과 purple, non-sulfur bacteria의 Rhodobacter 속에 가장 근접하여, Rhodobacter sp. EGH-24로 명명하였다. Rhodobacter sp. EGH-24가 생산하는 carotenoid 색소는 spheroidene(group 2)이였고, bacteriochlorophyll a를 가지고 있었으며, PHB를 생산하는 것으로 확인되었다.
역삼투 해수담수화(SWRO)공정의 큰 문제점 중 하나인 biofouling 현상을 초기에 감지하기 위한 센서 개발의 선행 연구로써, 본 연구는 역삼투막에 바이오필름을 형성하는 문제성 있는 박테리아를 센서의 타겟 박테리아로 제시하는 것에 중점을 두었다. 문헌조사와 실제 해수담수화 공정에서 사용된 해수 원수와 오염된 역삼투막에 존재하는 박테리아를 계통발생학적으로 분석한 결과를 토대로 Bacillus sp., Flavobacterium sp., Mycobacterium sp., P. aeruginosa, P. fluorescens, 그리고 Rhodobacter sp.의 여섯종의 모델 박테리아를 선정하였고, 선정된 모델 박테리아 중, 막 오염 잠재력을 가진 종을 찾아내기 위해 각각 박테리아의 역삼투막 부착 능력, 고압내성, 그리고 소수성을 비교 분석하였다. 그 결과, 역삼투막 부착능력은 Rhodobacter sp.와 Mycobacterium sp.가 뛰어났으며 소수성이거나 역삼투막(접촉각 약 $63^{\circ}$)과 비슷한 접촉각을 가진 박테리아가 역삼투막에 잘 부착하였다. 800 psi의 고압을 적용 한 후, Rhodobacter sp.는 여섯 종류의 모델 박테리아 중 59-73%의 가장 큰 개체수의 감소를 보였고, P. fluorescens는 1-29%로 가장 높은 고압내성을 보였다. 부착, 소수성, 고압내성 특성을 통한 역삼투막에 biofouling을 유발하는 영향력 있는 박테리아 선정 실험 결과, 여섯 종류의 모델 박테리아 중 Mycobacterium sp.가 부착 능력이 뛰어나고 높은 소수성 특성을 가지며, 800 psi의 고압에서도 50% 이상의 cell의 생물학적 활성능력을 가지고 있어, 막 오염을 유발시키는 가장 잠재력 있는 박테리아로 분석되었다.
Light Emitting Diode (LED) of 880 nm was used as a function of luminosity in culture of the photosynthetic bacteria including Rhodobacter sp.. An array of 880 run LED was driven with an energy density of $6.0mW/cm^2$. In processing time, we were able to show that the cell growth were gained of significant changes in the pigment and in the dry weight. And we also showed that photosynthetic bacteria had the resonable relativity of optical density to dry weight. LED-880nm is of great significance for the potential use of photo-bioreactor construction.
Chlorophyll synthase (ChlG) and bacteriochlorophyll synthase (BchG) have a high degree of substrate specificity. The BchG mutant of Rhodobacter sphaeroides, BG1 strain, is photosynthetically incompetent. When BG1 harboring chlG of Synechocystis sp. PCC 6803 was cultured photoheterotrophically, colonies arose at a frequency of approximately 10-8. All the suppressor mutants were determined to have the same mutational change, ChlGI44F. The mutated enzyme ChlGI44F showed BchG activity. Remarkably, BchGF28I, which has the substitution of F at the corresponding 28th residue to I, showed ChlG activity. The Km values of ChlGI44F and BchGF28I for their original substrates, chlorophyllide (Chlide) a and bacteriochlorophyllide (Bchlide) a, respectively, were not affected by the mutations, but the Km values of ChlGI44F and BchGF28I for the new substrates Bchlide a and Chlide a, respectively, were more than 10-fold larger than those for their original substrates, suggesting the lower affinities for new substrates. Taken together, I44 and F28 are important for the substrate specificities of ChlG and BchG, respectively. The BchG activity of ChlGI44F and the ChlG activity of BchGF28I further suggest that ChlG and BchG are evolutionarily related enzymes.
본 연구는 느타리버섯 수확후배지를 배지자원으로 재사용하기 위하여 미생물처리에 의한 수확후 배지의 총질소함량 증진효과를 조사하였다. Bacillus sp. GM20-4 와 Rhodobacter sphaeroides(RS) 배양액 30%를 함께 접종하여 5일간 상온에서 배양 시 총질소 함량이 가장 크게 증가하였다. 농가의 수확후배지 조성에 따른 GM20-4와 RS처리에 의한 T-N함량 변화를 조사하기 위하여 경기 지역 버섯재배농가 세 곳의 수확후배지(spent mushroom substrates, SMS A, B, C)를 수집하여 GM20-4 와 RS 배양액 30%를 처리한 결과, 무처리구에 비해 건조 SMS B에서 T-N함량이 20%p로 가장 크게 증가하였고, 건조 SMS A는 17%, C는 12% 증가하였다. 반면에 생수확후 배지에서는 미생물 처리에 의한 T-N 함량 증가 효과가 크지 않았다. 또한 아미노산 조성별 함량 변화는 건조된 SMS A, B, C 모두 GM20-4와 RS 처리로 aspatic acid와 glutamic acid가 상대적으로 높게 증가한 결과를 보였고, 특히 건조 SMS B의 처리구에서 두 아미노산의 함량이 무처리구보다 2.9배 증가를 보임으로서 미생물처리가 수확후배지의 총질소 및 아미노산 함량의 증진효과를 확인하였다.
High substrate costs decrease the profitability of polyhydroxyalkanoates (PHAs) production, and thus low-cost carbon substrates coming from agricultural and industrial residuals are tested for the production of these biopolymers. Among them, crude glycerol, formed as a by-product during biodiesel production, seems to be the most promising source of carbon. The object of this study was to characterize the mixed population responsible for the conversion of crude glycerol into PHAs by cultivation-dependent and -independent methods. Enrichment of the microbial community was monitored by applying the Ribosomal Intergenic Spacer Analysis (RISA), and the identification of community members was based on 16S rRNA gene sequencing of cultivable species. Molecular analysis revealed that mixed populations consisted of microorganisms affiliated with four bacterial lineages: ${\alpha}$, ${\gamma}$-Proteobacteria, Actinobacteria, and Bacteroides. Among these, three Pseudomonas strains and Rhodobacter sp. possessed genes coding for polyhydroxyalkanoates synthase. Comparative analysis revealed that most of the microorganisms detected by direct molecular analysis were obtained by the traditional culturing method.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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