This study was conducted to identify lily species native to Korea from formosan lily (Lilium formosanum) belonging to Longiflorum section. Due to flowering time, flower color and orientation, long shelf life and resistant to diseases, the native lily species can be valuable genetic resources for interspecific hybrids. One of the chloroplast genes, matK, was used to clone and sequence to explore any base changes. The matK was successfully amplified into 1,539 bp (94% of the gene) and phylogenetic tree demonstrated 6 clades for those 11 lily species used in this study. There were one or two base substitutions among 10 lilies native to Korea, while formosan lily native to Taiwan exhibited 6 base substitutions in matK gene, rendering it genetically distant. A restriction enzyme NruI recognized one of the six base changes, and digested the matK gene of 10 native lily species only, but not in formosan lily. The confirmed cleavage characteristic of the target region in matK gene was designed into a CAPS (cleaved amplified polymorphic sequences) marker which will be available to estimate compatibility of interspecific hybridization and to trace the pedigree when those native lilies are crossed with the formosan lily.
Park, Sang Rye;Kwak, Hyun-Ho;Park, Bong-Soo;Kim, Gyoo Cheon
International Journal of Oral Biology
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제37권4호
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pp.189-195
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2012
Resistance to the induction of apoptosis is a possible mechanism by which tumor cells can survive anti-neoplastic treatments. Melanoma is notoriously resistant to anti-neoplastic therapy. Previous studies have demonstrated focal adhesion kinase (FAK) overexpression in melanoma cell lines. Given its probable role in mediating resistance to apoptosis, many researchers have sought to determine whether the downregulation of FAK in melanoma cells would confer a greater sensitivity to anti-neoplastic agents. Genistein is a known inhibitor of protein-tyrosine kinase (PTK), which may attenuate the growth of cancer cells by inhibiting the PTK-mediated signaling pathway. This present study was undertaken to investigate the effect of genistein on the expression of FAK and cell cycle related proteins in the G361 melanoma cell line. Genistein was found to have a preferential cytotoxic effect on G361 melanoma cells over HaCaT normal keratinocytes. Genistein decreased the expression of 125 kDa phosphotyrosine kinase and the FAK protein in particular. Genistein treatment did not affect the expression of p53 in G361 cells in which p21 is upregulated. The expression of cyclin B and cdc2 was downregulated by genistein treatment. Taken together, our data indicate that genistein induces the decreased proliferation of G361 melanoma cells via the inhibition of FAK expression and regulation of cell cycle genes. This suggests that the use of genistein may be a viable approach to future melanoma treatments.
Recurrence is a serious problem in patients with bladder cancer. The hypothesis for recurrence was that the proliferation of drug-resistant cells was reported, and this study focused on drug resistance due to drug efflux. Previous studies have identified FOXM1 as the key gene for recurrence. We found that FOXM1 inhibition decreased drug efflux activity and increased sensitivity to Doxorubicin. Therefore, we examined whether the expression of ABC transporter gene related to drug efflux is regulated by FOXM1. As a result, ABCG2, one of the genes involved in drug efflux, has been identified as a new target for FOXM1. We also demonstrated direct transcriptional regulation of ABCG2 by FOXM1 using ChIP assay. Consequently, in the presence of the drug, FOXM1 is proposed to directly activate ABCG2 to increase the drug efflux activation and drug resistance, thereby involving chemoresistance of bladder cancer cells. Therefore, we suggest that FOXM1 and ABCG2 may be useful targets and important parameters in the treatment of bladder cancer.
Worldwide, rice blast, caused by Magnaporthe grisea (Hebert) Barr. (anamorph, Pyricularia grisea Sacc.), is one of the most economically devastating crop diseases. Management of rice blast through the breeding of blast-resistant varieties has had only limited xuccess due to the frequent breakdown of resistance under field conditions (Bonman etal., 1992; Correa-Victoria and Zeigler, 1991; Kiyosawa, 1982). The frequent variation of race in pathogen populations has been proposed as the principal mechanism involved in the loss of resistance (Ou, 1980). Although it is generally accepted that race change in M. grisea occurs in nature, the degree of its variability has been a controversial subject. A number of studies have reported the appearance of new races at extremely high rates (Giatgong and Frederiksen, 1968; Ou and Ayad, 1968; Ou et al., 1970; Ou et al., 1971). Various potential mechanisms, including heterokaryosis (Suzuki, 1965), parasexual recombination (Genovesi and Magill, 1976), and aneuploidy (Kameswar Row et al., 1985; Ou, 1980), have been proposed to explain frequent race changes. In contrast, other studies have shown that although race change could occur, its frequency was much lower than that predicted by earlier studies (Bonman et al., 1987; Latterell and Rossi, 1986; Marchetti et al., 1976). Although questions about the frequency of race changes in M. grisea remain unanswered, the application of molecular genetic tools to study the fungus, ranging from its genes controlling host specificity to its population sturctures and dynamics, have begun to provide new insights into the potential mechanisms underlying race variation. In this review we aim to provide an overview on (a) the molecular basis of host specificity of M. grisea, (b) the population structure and dynamics of rice pathogens, and (c) the nature and mechanisms of genetic changes underpinning virulence variation in M. grisea.
Host-pathogen interaction in rice bacterial blight pathosystem was analyzed for a better understanding of their relationship and recognition of stable pathogenicity among the populations of Xanthomonas oryzae pv. oryzae. A total number of 52 bacterial strains isolated from diseased leaf samples collected from 12 rice growing states and one Union Territory of India, were inoculated on 16 rice varieties, each possessing known genes for resistance. Analysis of variance revealed that the host genotypes(G) accounted for largest(78.4%) proportion of the total sum of squares(SS), followed by 16.5% due to the pathogen isolates(I) and 5.1% due to the $I{\times}G$ interactions. Application of the Additive Main effects and Multiplicative Interaction(AMMI) model revealed that the first two interaction principal component axes(IPCA) accounted for 66.8% and 21.5% of the interaction SS, respectively. The biplot generated using the isolate and genotypic scores of the first two IPCAs revealed groups of host genotypes and pathogen isolates falling into four sectors. A group of five isolates with high virulence, high absolute IPCA-1 scores, moderate IPCA-2 scores, low AMMI stability index '$D_i$' values and minimal deviations from additive main effects displayed in AMMI biplot as well as response plot, were identified as possessing stable pathogenicity across 16 host genotypes. The largest group of 27 isolates with low virulence, small IPCA-1 as well as IPCA-2 scores, low $D_i$ values and minimal deviations from additive main effect predictions, possessed stable pathogenicity for low virulence. The AMMI analysis and biplot display facilitated in a better understanding of the host-pathogen interaction, adaptability of pathogen isolates to specific host genotypes, identification of isolates showing stable pathogenicity and most discriminating host genotypes, which could be useful in location specific breeding programs aiming at deployment of resistant host genotypes in bacterial blight disease control strategies.
We have developed a reliable and high-frequency genetic transformation and regeneration system via somatic embryogensis of Eleutherococcus sessiliflorus. Embryogenic callus obtained from seed were co- cultivated with Agrobacterium tumefaciens strain EHA101/pIG121Hm harboring genes for intron-$\beta$-glucoronidase(GUS), kanamycin and hygromycin resistance. Following co-cultivation, two types of samples(fine embrogenic calli and early globular embryo clusters) were cultivated on Murashige and Skoog(MS) medium containing 1 mg/L2.4-D for 3day in dark. Transient expression of GUS gene was found to be higher in the early globular embryo clusters than in the embryogenic calli. Also, co-cultivated period affected expression of GUS gene; the best result was obtained when globular embryo clusters were co-cultivated with Agrobacterium for 3 days. Subsequently, this callus transferred to selective MS medium containing 1mg/L2.4-D, 50mg/L kanamycin or/and 30mg/L hygromycin and 300mg/L cefortaxime. These embryogenic calls were subcultured to the same selection medium at every 2 weeks intervals. Approximately 24.5% of the early globular embryos co-cultivated with Agrobacterium for 3days produced kanamycin or/and hygromycin-resistant calli. Transgenic somatic embryos were converted into plantlets in half strength MS medium supplemented with 3mg/L GA$_3$ kanamycin and were confirmed by GUS histochemical assay and polymerase chain reaction analysis. Genomic Southem blot hybridization confirmed the incorporation of NPT II gene into the host genome.
풍미가 강력하고 신속발효가 되는 청국장의 우점종인 젖산균 Enterococcus spp.를 발효종균으로 활용하여 재래식 간장모양의 풍미를 가지는 대두발효물을 제조하고자 하였다. 119종의 Enterococcus spp. 중에서 protease 활성이 높은 8종을 선발하여 E. faecium 4종, E. faecalis 3종, E. gallinarium 1종으로 동정하였다. 8종의 항생제에 내성이 낮았고, vancomycin 유전자도 없으며, 5% NaCl 함유 배지에서도 protease 분비가 우수한 E. faecium O24를 발효 종균으로 선정하였다. 증자한 대두 백태에서 생육이 우수하였으며, 발효생성 조미 아미노산 중 80 mg% glutamic acid, aspartic acid를 생성시켰으며, lactic acid와 여러 유기산을 생성하였다. Z. rouxii와 C. versatilis와의 혼합배양으로 간장 고유취인 maltol, guaiacol 등의 향기성분도 합성됨을 확인하였다. 그러므로 청국장 젖산균인 Enterococcus spp.는 신속하게 다양한 향미성분을 생산하여 간장태의 대두 발효의 종균으로 사용이 가능할 것으로 보인다.
Yun, Ki Wook;Lee, Mi-Kyung;Kim, Wonyong;Lim, In Seok
Clinical and Experimental Pediatrics
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제60권7호
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pp.221-226
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2017
Purpose: Escherichia coli sequence type (ST) 131, a multidrug-resistant clone causing extraintestinal infections, has rapidly become prevalent worldwide. However, the epidemiological and clinical features of pediatric infections are poorly understood. We aimed to explore the characteristics of ST131 Escherichia coli isolated from Korean children with urinary tract infections. Methods: We examined 114 uropathogenic E. coli (UPEC) isolates from children hospitalized at Chung-Ang University Hospital between 2011 and 2014. Bacterial strains were classified into STs by partial sequencing of seven housekeeping genes (adk, fumC, gyrB, icd, mdh, purA, and recA). Clinical characteristics and antimicrobial susceptibility were compared between ST131 and non-ST131 UPEC isolates. Results: Sixteen UPEC isolates (14.0%) were extended-spectrum ${\beta}-lactamase$ (ESBL)-producers; 50.0% of ESBL-producers were ST131 isolates. Of all the isolates tested, 13.2% (15 of 114) were classified as ST131. There were no statistically significant associations between ST131 and age, sex, or clinical characteristics, including fever, white blood cell counts in urine and serum, C-reactive protein, radiologic abnormalities, and clinical outcome. However, ST131 isolates showed significantly lower rates of susceptibility to cefazolin (26.7%), cefotaxime (40.0%), cefepime (40.0%), and ciprofloxacin (53.3%) than non-ST131 isolates (65.7%, 91.9%, 92.9%, and 87.9%, respectively; P<0.001 for all). ESBL was more frequently produced in ST131 (53.3%) than in non-ST131 (8.1%) isolates (P<0.01). Conclusion: ST131 E. coli isolates were prevalent uropathogens in children at a single medical center in Korea between 2011 and 2014. Although ST131 isolates showed higher rates of antimicrobial resistance, clinical presentation and outcomes of patients were similar to those of patients infected with non-ST131 isolates.
We compared three EDTA-based phenotypic screening methods for detecting IMP-1 and VIM-2 type metallo-${\beta}$- lactamase (MBL)-producing isolates of Acinetobacter and Pseudomonas spp., EDTA-double disk synergy test (EDTADDST), Etest MBL, and imipenem (IPM)-EDTA disk test. A total of 183 isolates (65 Acinetobacter spp. and 118 Pseudomonas spp. showing IPM resistance), confirmed to MBL genes by PCR, were used. The criteria for MBL production were (i) presence of a synergistic zone between IPM and EDTA disks in EDTA-DDST, (ii) reduction of IPM minimal inhibitory concentration by ${\geq}$ 3 twofold dilutions in the presence of EDTA in the Etest MBL, and (iii) ${\geq}$ 7 mm increase in the inhibition zone around the IPM plus EDTA disks compared with a sole IPM disk in the IPM-EDTA disk test. In this study using 87 MBL-producing and 96 MBL-nonproducing isolates, the sensitivities/specificities of EDTA-DDST, Etest MBL and IPM-EDTA disk tests were 94.3/78.1%, 89.7/91.7%, and 97.7/95.8%, respectively. When the threshold for the increase of the inhibition zone around the IPM plus EDTA disk over a sole IPM disk was altered to ${\geq}$ 5 mm and ${\geq}$ 8 mm for Acinetobacter spp. and Pseudomonas spp., respectively, the sensitivity and specificity of the test were 98.9% and 96.9%, respectively. Of the three EDTA-based phenotypic tests, the IMP-EDTA disk test was superior for detection of MBL-producing isolates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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