This study was performed to evaluate whether the loss or overexpression of Rb, and overexpression of p53 were prognostic indicators for bladder neoplasia, 52 tumor specimens from transitional cell carcinoma of the urinary bladder were from 42 male and 10 female patients whose age ranged from 30 to 83 years old(mean age; 63,5 years old), This group included 36 superficial and 16 invasive stage bladder tumors, and grades 16-25, p53 was significantly associated with tumor stage and grade(p<0,05 in each), but not with tumor recurrence. Loss of Rb gene expression or Rb overexpression was correlated with stage, but not grade. These results suggested that changes of Rb and p53 expression might play an important role in assessing the aggressiveness of human neoplasms.
Background: The separation of isomeric compounds from a mixture is a recurring problem in chemistry and phytochemistry research. The purification of pharmacologically active ginsenoside Rb3 from ginseng extracts is limited by the co-existence of its isomer Rb2. The aim of the present study was to develop an enzymatic elimination-combined purification method to obtain pure Rb3 from a mixture of isomers. Methods: To isolate Rb3 from the isomeric mixture, a simple enzymatic selective elimination method was used. A ginsenoside-transforming glycoside hydrolase (Bgp2) was employed to selectively hydrolyze Rb2 into ginsenoside Rd. Ginsenoside Rb3 was then efficiently separated from the mixture using a traditional chromatographic method. Results: Chromatographic purification of Rb3 was achieved using this novel enzymatic elimination-combined method, with 58.6-times higher yield and 13.1% less time than those of the traditional chromatographic method, with a lower minimum column length for purification. The novelty of this study was the use of a recombinant glycosidase for the selective elimination of the isomer. The isolated ginsenoside Rb3 can be used in further pharmaceutical studies. Conclusions: Herein, we demonstrated a novel enzymatic elimination-combined purification method for the chromatographic purification of ginsenoside Rb3. This method can also be applied to purify other isomeric glycoconjugates in mixtures.
본 연구는 Hydroxyapatite(HAP)/$TiO_{2}$ 여재에 의한 Reactive Black 5(RB5)의 흡착과 광촉매 반응을 조사하였다. RB5에 대한 $TiO_{2}$, HAP와 $TiO_{2}$/HAP의 흡착은 연속적인 회분식 실험을 통해 조사하였다. 흡착평형에 따른 결과를 나타내었으며 Langmuir와 Freundlich isotherm model을 사용하여 적용성을 조사하였다. $TiO_{2}$, HAP와 $TiO_{2}$/HAP 흡착제별 흡착평형 결과는 Langmuir isotherm model에 적합하였으며 최대흡착량(Qmax)의 값은 각각 단일 $TiO_{2}$는 5.28mg/g, 단일 HAP는 12.45mg/g, $TiO_{2}$/HAP는 9.03mg/g으로 나타났다. 흡착과 광촉매 반응에 대한 kinetic model들은 유사 1차 반응을 통해 분석하였으며, 이들 model에 따르면 $TiO_{2}$/HAP에 의한 RB5 제거는 광촉매 반응과 흡착반응의 상호작용의 영향을 받는 것으로 나타났다.
Background: Ginsenoside Rb1 (Rb1), one of the most abundant protopanaxadiol-type ginsenosides, exerts excellent neuroprotective effects even though it has low intracephalic exposure. Purpose: The present study aimed to elucidate the apparent contradiction between the pharmacokinetics and pharmacodynamics of Rb1 by studying the mechanisms underlying neuroprotective effects of Rb1 based on regulation of microflora. Methods: A pseudo germ-free (PGF) rat model was established, and neuroprotective effects of Rb1 were compared between conventional and PGF rats. The relative abundances of common probiotics were quantified to reveal the authentic probiotics that dominate in the neuroprotection of Rb1. The expressions of the gamma-aminobutyric acid (GABA) receptors, including GABAA receptors (α2, β2, and γ2) and GABAB receptors (1b and 2), in the normal, ischemia/reperfusion (I/R), and I/R+Rb1 rat hippocampus and striatum were assessed to reveal the neuroprotective mechanism of Rb1. Results: The results showed that microbiota plays a key role in neuroprotection of Rb1. The relative abundance of Lactobacillus helveticus (Lac.H) increased 15.26 fold after pretreatment with Rb1. I/R surgery induced effects on infarct size, neurological deficit score, and proinflammatory cytokines (IL-1β, IL-6, and TNF-α) were prevented by colonizing the rat gastrointestinal tract with Lac.H (1 × 109 CFU) by gavage 15 d before I/R surgery. Both Rb1 and Lac.H upregulated expression of GABA receptors in I/R rats. Coadministration of a GABAA receptor antagonist significantly attenuated neuroprotective effects of Rb1 and Lac.H. Conclusion: In sum, Rb1 exerts neuroprotective effects by regulating Lac.H and GABA receptors rather than through direct distribution to the target sites.
Ginsenosides, a group of Panax ginseng saponins, exert the lowering effects of plasma cholesterol levels in animals. We had reported earlier that ginsenoside Rb2 upregulate low-density lipoprotein receptor (LDLR) expression via a mechanism that is dependent of the activation of sterol response element binding protein 2 (SREBP-2) expression. This study was conducted to determine the effects of ginsenoside Rb2 on the expression of the hepatic LDLR expression at cellular levels using HepG2 cells, and to evaluate whether the sterol response element binding protein 1 (SREBP-l) was involved in the regulation of LDLR expression. Incubation of HepG2 cells in serum-free medium supplemented with cholesterol $(10{\mu}g/ml)$ for 8 hours decreased the mRNAs of LDLR mRNA by $12\%$ and SREBP-l mRNA by $35\%$. Ginsenoside Rb2 antagonized the repressive effects of cholesterol and increased both LDLR and SREBP-l mRNA expression to 1.5- and 2-fold, respectively. Furthermore, Western blot and confocal microscopic analyses with SREBP-l polyclonal antibody revealed that ginsenoside Rb2 enhanced the maturation of the SREBP-1 from the inactive precursor form in ER membrane to the active transcription factor form in nucleus. These results suggest that ginsenoside Rb2 upregulates LDLR expression via a mechanism that is dependent of the activation of not only SREBP-2 expression, but also SREBP-1 expression and maturation, and also indicate that the pharmacological value of ginsenoside Rb2 may be distinguished from that of lovastatin which is reported that it upregulate LDLR through SREBP-2 only, not through SREBP-1.
Phenolic acid concentrates of rice bran(RB-ex) and hydroxycinnamic acids were investigated for their anti-hyperglycemic activities through glucose uptake and glucokinase activity using HepG2 cells and stimulatory effects on insulin secretion using HIT-T15 cells. RB-ex was prepared as an ethylacetate extract after alkaline hydrolysis and hydroxycinnamic acids, found as major compositions of RB-ex, such as ferulic acid(FA), sinapic acid(SA) and p-coumaric acid(p-CA) were investigated to compare with the properties of RB-ex. The properties of glucose uptake in HepG2 cells were examined in the absence of insulin and two different glucose concentrations(5.5 mM and 25 mM). RB-ex and FA showed anti-hyperglycemic activities through the increase of glucose uptake and the stimulation of glucokinase activity in HepG2 cells. RB-ex exhibited higher glucose uptakes with higher glucose concentrations, whereas FA exhibited the same increasing effects on both concentrations of glucose. RB-ex and FA exhibited doubled glucokinase activities relative to control. In the presence of insulin in the 25 mM glucose-containing medium, the levels of glucose uptake were increased in all treatments compared with control. As stimulatory effects of samples on insulin secretion were estimated, RB-ex and FA stimulated insulin secretion at a concentration of 25 ${\mu}g/m{\ell}$ and in particular, FA showed the highest amount of insulin-release in HIT-T15 cells. Antioxidative effects on HIT-T15 cells, RB-ex and hydroxycinnamic acids, excluding p-CA, showed inhibitory activities of 78% to 80% at a concentration of 100 ${\mu}g/m{\ell}$. On the basis of these results, we conclude that RB-ex and FA could help decrease blood glucose levels and prevent the cell damages via antioxidant activity.
Three fully dehydrated fully Rb+-exchanged zeolite A single crystals have been prepared by the reduction of all Na+ ions in dehydrated Na12-A by rubidium vapor at various experimental conditions (220 $\leq$ T $\leq$ 33$0^{\circ}C$, 2 $\leq$ t $\leq$24 hours, and 0.1 $\leq$ PRb $\leq$ 1.1 Torr). Their structures were determined by single-crystal X-ray diffraction methods in the space group {{{{ RHO }}m3m (a=12.245(3) A) at 22(1)$^{\circ}C$. In these structures 12.6(2) to 13.5(2) Rb species are found per unit cell, more than the 12 Rb+ ions needed to balance the anionic charge of the zeolite framework, indication that the sorption of Rb0 has occurred. In each structure, three Rb+ ions per unit cell are located at the centers of 8-rings. Beyond that, the fractional occupancies observed are simply explained by two unit cell arrangments. In one, two Rb+ ions are in the sodalite unit near opposite 6-rings, six are in the large cavity near 6-ring, and one is in the large cavity near a 4-ring. In the other, three Rb species in the sodalite cavity (forming a triangle 3.7 A on an edge) each bond (3.4 A) through a 6-ring to an Rb species in the large cavity to give an (Rb6)4+ cluster of symmetry 3m (C3V). Five additional Rb+ ions fill the remaining large-cavity 6-ring sites.
인삼(Panax ginseng C. A. Meyer)의 사포닌 진세노사이드 Rb1이 처리된 인간 피부각질세포 HaCaT에서 microarray 분석 및 발현이 증가된 세포사멸 반응에 대한 작용기전을 연구하였다. HaCaT 세포에 진세노사이드 Rb1의 처리로 세포사멸, 유사분열 세포주기의 G2/M 전이, 세포분열, 핵분열, 그리고 단백질 수송 등의 작용기전에 관여하는 유전자들이 2 배 이상 발현이 증가된 것으로 나타났으며, DNA 수선, 감수 핵분열, 그리고 세포외기질 체계 등의 작용기전에 관여하는 유전자들은 2 배 이상 발현이 감소된 것으로 나타났다. 특히 세포사멸 신호전달은 FAS와 PLA2G4A를 경유하는 것으로 나타났으며, 이들 유전자의 상위 조절자로 STAT3가 예측되었다. 세포사멸 반응 경유 유전자 FAS와 PLA2G4A의 활성을 qPCR로 확인한 결과, FAS 유전자는 $10{\mu}g/ml$의 진세노사이드 Rb1를 24시간 동안 처리하였을 경우 약 2 배의 발현 증가와, PLA2G4A 유전자는 6시간 처리부터 약 2 배로 증가되어 24시간 동안 처리시 2 배 이상의 유전자 발현이 증가되었다. 한편 STAT3-siRNA를 이용한 knock-down 실험에서 FAS의 발현 감소와 PLA2G4A의 발현 증가로 상위 조절자 STAT3로부터 FAS 만을 경유하는 것을 알 수 있었다. 이상의 결과 진세노사이드 Rb1의 처리에 의해 상위 조절자인 STAT3는 FAS를 경유하여 세포사멸을 유도하는 것임을 알 수 있다.
The anticarcinogenic effects of epicatechin(EC) and ginsenoside Rb2(Rb2), which are major components of green tea and Korea ginsen, respectively, were investigated using a model system of gap junctional intercellular communication (GJIC) in WB-F344 rat liver epithelial cells. 12-O-Tetradecanoylphorbol-13-accetate (TPA) and hydrogen preoxide, known as cancer promoters, inhibited GJIC in the epithelial cells as determined by the scrape loading/dye transfer assay, fluorescence redistribution assay after photobleaching, and immunofluorescent staining of connexin 43 using a laser confocal microscope. The inhibition of GJIC by TPA and H2O2 was prevented with treatment of Rb2 or Ec. The effect of EC on GJIC was stronger in TPA-treated cells than in H2O2-treated cells, while the effect of Rb2 was opoosite to that of EC. EC, at the concentration of 27.8$\mu$g/ml, prevented the TPA-induced GJIC inhibition by about 60%. Rb2, at the concentration of 277$\mu$g/ml, recovered the H2O2-induced GJIC inhibition by about 60%. These results suggest that Rb2 and EC may prevent human cancers by preventing the down-regulation of GJIC during the cancer promotion phase and that the anticancer effect of green tea and Korea ginseng may come from the major respective conponents, EC and Rb2.
흰쥐 대뇌겉질로부터 별아교세포를 배양하여 흥분성아미노산인 L-glutamate에 의하여 유발되는 세포종창(astrocytic swelling)에 대한 ginsenosides의 억제효과를 검토하였다. Glutamate(0.5 mM)를 세포에 가하고 1시간동안 배양하면 swelling을 일으켜, 세포내의 물의 용적([$^3$H]OMG의 uptake량으로 측정)은 대조세포에 비하여 약 2배의 증가를 나타냈다. Glutamate와 함께 ginsenosides Rb$_2$와 Rc를 가하고 배양하면 glutamate에 의한 astrocytic swelling이 용량의존적으로 감소하였다. 세포는 Rb$_2$와 Rc(0.5 mg/ml)에 24시간까지 노출시켜도 MTT reduction이 감소하지 않는 것으로 보아 이 ginsenosides에 의한 swelling의 억제효과는 세포막의 손상에 의한 것이 아님을 알 수 있었다. Rb$_2$와 Rc는 glutamate에 의한 세포내 $Ca^{2+}$농도의 상승을 억제하였다. 따라서 Rb$_2$와 Rc는Ca$^{2+}$의 유입을 억제하므로서 glutamate에 의한 astrocytic swelling을 억제하는 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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