A novel gene Jpk, originally isolated as a trans-acting factor associating with the position-specific regulatory element of murine Hox gene has been reported to be expressed differentially in the liver of diabetic animals. Therefore, in an attempt to develop a possible diagnostic marker and/or new therapeutic agent for the Diabetes Mellitus, we analysed the expression pattern of Jpk among organs of normal and diabetic Sprague-Dawley (SD) rats. Total RNAs were isolated from each organs (brain, lung, heart, liver, spleen, kidney, muscle, blood, and testis) of diabetic and normal rats in both normal feeding and after fasting condition. And then RT (reverse transcription) PCR has been performed using Jpkspecific primers. The Jpk gene turned out to be expressed in all organs tested, with some different expression profiles among normal and diabetes, though. Upon fasting, Jpk expressions were reduced in all organs tested except kidney, muscle and brain of normal rat. Whereas in diabetes, Jpk expressions were increased in all organs except heart, muscle and testis when fasted. Compared to the normal rat, the Jpk expression level in blood was remarkably upregulated (about 15-30times) in diabetic rat whether in normal feeding or fasting conditon, suggesting that the Jpk could be a candidate gene for the possible blood diagnostic marker for the Diabetes Mellitus.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1996.11a
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pp.99-113
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1996
Taurine, a ${\beta}$-amino acid, plays an important role as a neuromodulator and is necessary for the normal development of the brain. Since de novo synthesis of taurine in the brain is minimal and in vivo studies suggest that taurine does not cross the blood-brain barrier, the blood-cerebrospinal fluid (CSF) barrier is likely to play a role in taurine transport between the central nervous system and the systemic circulation. Therefore, we examined in vivo elimination of taurine from the CSF in the rat to characterize in vivo kinetics of elimination for taurine from the CSF is consistent with the in vitro study. Using a stereotaxic device, cannulaes were placed into the lateral ventricle and the cisterna magna of the rat. Radio-labelled taurine and inulin (a marker of CSF flow) were injected into the lateral ventricle, and the concentrations of the labelled compounds in the CSF were monitored for up to 3 hrs in the cisterna magna. The apparent clearance of taurine from CSF was greater than the estimated CSF flow (p<0.005), indicating that there is a clearance process in addition to the CSF flow. Taurine distribution into the choroid plexus was at least 10 fold higher than that found in other brain areas (e.g., cerebellum, olfactory bulb and cortex). When unlabelled taurine was co-administered with radio-labelled taurine, the apparent clearance of the labeled taurine was reduced (p<0.01), suggesting a saturable disposition of taurine from CSF. Distribution of taurine into the choroid plexus, cerebellum, olfactory bulb and cortex was similarly diminished, indicating that the saturable uptake of taurine into these tissues is responsible for the non-linear disposition. A pharmacokinetic model involving first order elimination and saturable distribution described these data adequately. The Michaelis-Menten rate constant estimated from in vivo elimination study is similar to that obtained in the in vitro uptake experiment Collectively, our results demonstrate that taurine is transported in the choroid plexus via a taurine is cleared from the CSF via a saturable process. This process may be functionally relevant to taurine homeostasis in the brain.
The effect of heat treatment (autoclaving at $100^{\circ}C$ for 30 minutes) of soybean on the cholesterol contents in the brain and aorta of the albino rat was studied. The subjects were 72 young male rats and divided into 12 groups by diet and periods. Experimented periods were 5, 15 and 30 days, diet standard are raw soybean, soybean diets heated at $100^{\circ}C$ and $120^{\circ}C$ respectively, and each diet was prepared to contain 14g protein and 400 Kcal per diet 100g. After corresponding treatment, the cholesterols in the brain and aorta were determined. The results are summarized as follows: In the brain, total, free and ester cholesterol contents of each group are not remarkedly different from those of control group, in the experimental periods. In the aorta total and free cholesterol at $100^{\circ}C$ and $120^{\circ}C$ than those of control group, but there is no significant difference among groups fed for 15 or 30 days, and the ester cholesterol has no regular tendency. It seems that the heat treatment at $100^{\circ}C$ and $120^{\circ}C$ of solybean has no effect on the cholesterol contents of the brain and aorta.
In order to study the effects of bee venom herbal acupuncture on the neurotransmitters of the rat brain cortex, herbal acupuncture with the bee venom group and normal saline group was performed bilaterally on the point corresponding to LI 4 of the rat. The average optical density of the neurotransmitters from the cerebral cortex was analyzed 30 minutes after the herbal acupuncture with immunohistochemical methods. The results were as follows: 1. The density of NADPH-diaphorase in the bee venom group was increased significantly at the motor cortex, visual cortex, auditory cortex, cingulate cortex, retrosplenial cortex, and perirhinal cortex, compared to the normal saline group. 2. The average optical density of vasoactive intestinal peptide in the bee venom group had significant changes at the insular cortex, retrosplenial cortex, and perirhinal cortex, compared to the normal saline group. 3. The average optical density of neuropeptide-Y in the bee venom group increased significantly at the visual cortex and cingulate cortex, compared to the normal saline group.
Primary neuronal culture was studied for observing effect of ginsenoside Rgl (Rgl) on serum-free medium induced apoptosis. Results showed that Rgl at concentration of 1 umol$.$ L-1 and 10 umol$.$L-1 could inhibit apoptosis, decrease intracellular calcium concentration in cultured cortical neurons, enhance SOD activity in both aged rat cortex and cultured cortical neurons, scavenge cytotoxic oxygen free radicals, decrease NO content and NOS activity in aged rat cortex and cultured cortical neurons, increase bel-2 gene expression in rat brain. These results provided new data for elucidating the anti-aging effect of Rgi. Rgl is considered to be a useful drug for treatment of Alzheimer's disease and brain aging.
0.1%-Merthiolate solutions were applied to rats with or without sodium selenite. Rat organs were excised under ether anesthesia. Mercury contents in rat tissues were determined by quartz tube combustion gold amalgamation method. Mercury contents were accumulated at about 3-fold in the brain, 143-fold in the kidney, 62-fold in the blood cell, 22-fold in the liver than those of untreated rats respectively, on the 1st day after application of mert iolate for 7 days. On the other hand, the addition of sodium selenite caused a shift in the tissue mercury distribution. Our study showed that simultaneous administration of sodium selenite increased the accumulation of mercury in the brain, but became to decrease it after 9 days, while decreased it in the kidney, but grew to increase it, respectively.
Kv 4.2 ion channel protein has an ability to open at subthreshold membrane potentials and to recover quickly from inactivation. That is very important for neuronal signal transmission in vertebrate brain. In order to purify Kv 4.2 protein, the novel purification methods were experimented. The purification procedure utilized chromatography on DE-52 ion exchange column and affinity chromatography on a WGA-Sepharose 4B, and Kv 4.2 affinity column chromatography. It was found that 0.5% (wt./vol.) Triton X-100 detergent in lysis buffer worked well for Kv 4.2 protein solubilization from rat brain membrane. Protein quantitative determination was conducted by BCA method at 562 nm for each purification step to avoid determination interference of protein at 280 nm by detergent. The confirmation of Kv 4.2 existence and amount is performed using by SDS-PAGE/immunoblotting or 96-well dot blotting. The Kv 4.2 without interacting protein that contains carbohydrate, was purified from novel biochemical 3-steps purification method for further research.
Histological changes was investigated in the 4 weeks old rat brain using NMDA (N-methyl-D-asparate) which is capable of mediating excitotoxic events. The changes were occured when the injected NMDA solved in PBS was over $1.0{\mu}g/g$(about 90nM). The necrosis of Purkinje cells in cerebellum and the increasement of coloidal plexus cell number were prevalent. The Purkinje cell number of necrosis were increased according to increasement of amount of injected NMDA. In spite of increasement of degenerated Purkinje cell number, differentiation of new Purkinje cell was not identified because total number of Purkinje cell was not changed. The change of cell number was observed in coloidal plexus cell rather than degeneration of cell. About 5 time increasement was occured. This change may cause increasement of cerebrospinal fluid and the makes mophorogy of brain more round than nomal.
A simple and sensitive method was studied for the simultaneous determination of catecholamine, indoleamine and their related metabolites by high performance liquid chromatography with electrochemical detector. Norepinephrine, dopamine, serotonin and their metabolites of 3,4-dihydroxyphenylacetic acid, homovanillic acid, 5-indoleacetic acid were resolved from rat brain tissue homogenates by separation on reversed phase $C_{18}$ column with mobile phase consisting of monochloroacetate buffer (pH2.47), 1.42mM sodium octyl sulfonate and 7% acetonitrile. Both catechols and indoles can be eluted in 15min. The sensitivities of this method are sufficient for determination of at least 100 pg of neurochemical amines in brain samples, for example, frontal cortex, olfactory bulb, striatum, septum, hippocampus, thalamus, hypothalamus, medulla & pons and cerebellum. The highest level of dopamine was observed in striatum whereas norepinephrine and serotonin were in hypothalamus.
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