• 미생물학회지
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• 제26권3호
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• pp.173-180
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• 1988

염색체 유전자를 전달시키기 위한 기초작업으로 RP4 :: Mu cts와 RP4 :: mini-Mu 잡종 플라스미드를 접합에 의하여 E.. coli로 부터 Pseudomonas로 전달시켰다. RP4::Mu cts와 RP4:: mini-Mu의 수용세포는 플라스미드를 가지지 아니하는 Pseudomonas 균주들의 항생세 내성, 탄화수소 자화능 등의 유전적 지표를 조사하여 사용하였다. RP4::mini-Mu는 1$10^{-2}$ - $10^{-4}$의 빈도로 전달되었으며 RP4:: Mu cts는 Pseµdomonas aeruginosa KU557로는 $10^{-2}$의 빈도로, 그 이외의 수용세포로는 10?7의 빈도로 천달되었다. 접합체에 전달된 플라스미드의 존재는 암피실린, 카나마이신, 테트라싸이클린에 대한 내성과 전기영돔에 의해 확인하였으며 특히 RP4::Mu cts는 $43^{\circ}C$에서의 플라크 행성으로도 확인하였다. 접합체들로 부터 생성된 Mu 파아지는 약 $10^{5}$의 P.F.U.를 나타냈으며 전달된 RP4:: Mu cts와 RP4:: mini-Mu는 접합체들에서 비교적 안장한 것으로 밝혀졌다.

• 미생물학회지
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• 제23권2호
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• pp.107-114
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• 1985

우리나라 자연환경으로부터 분리한 Rhizob ium 32권주로부터 카나마이신, 세트라싸이클린 등에는 예민하고, 클로람페니콜, 젠타마이신 등에는 강한 내성을 나타내는 5 균주를 선별하고, 이를 수용세포로하여 RP4::Mu cts를 접함에 의해 E. coli로부터 Rhizobium leguminosarum으로 전달 시켰다. 그 전달빈도는 $5.8{\times}10^{-7}$의 빈도를 나타내었다. 접합체에서의 RP4::Mu cts플라스미드의 존재는 암피실린과 카나마이신, 테트라싸이클린에 대한 내정과 $42^{\circ}C$에서의 플라크 형성으로 확인하였다. 접합체들은 $10^2~10^3$단위로 플라크를 형성하였고, 안정성를 조사한 신파 4주 후에도 대부분이 RP4: :Mu cts의 성질을 유지하고 있는 것으로 나타났다.

• 미생물학회지
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• 제24권3호
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• pp.211-220
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• 1986

Nitrogen fixation (nif) genes of Rhizobium leguminosarum were transferred to nif Klebsiella pneumoniae and E. coli by conjugation after partial heat induction of $RP_4$ :: Mu cts in Rhizobium $R^+$ transconjugant, and the hybrid plasmids in the transconjugant strains were isolated and characterized. In order to transfer the nif genes from Rhizobium, the hybrid plasmid $RP_4$ :: Mu cts was transferred by conjugation from E. coil to the symbiotic nitrogen fixer, R. leguminosarum. After stabillity test, the $RP_4$ :: Mu cts in Rhixobium $R^+$ transconjugant was subjected to partial heat induction by culturing it statically at $38^{\circ}C$ for 16 hours, and then conjugated with the nif defective mutant strains of K. pneumoniae or nif mutant strains of E. coli having whole nif gene plasmid. Recombinant strains of K. pneumoniae, which could grow in a N-free medium and exhibit the nitrogenase activity were selected. However, in the case of E. coli, they could grow well in a NA medium containing antibiotices, but hardly frow in a N-free medium. The hybrid plasmids in these transconjugal strains were isolated by gel electrophoresis and compared their molecular sizes.