울릉도에만 한정 분포하는 회솔나무(Taxus cuspidata var. latifolia)의 분류학적 위치를 파악하기 위해 근연종인 주목(T. cuspidata var. cuspidata), 설악눈주목(T. caespitosa), 일본에 분포하는 T. cuspidata var. nana 4분류군을 대상으로 외부형태학적 연구와 DNA 바코딩 연구를 수행하였다. 회솔나무는 여러 학자들에 의해 주목의 이명으로 처리되거나 주목의 변종으로 처리되었던 분류군으로 분류학적 위치에 대한 이견이 많은 분류군이다. 이번 연구를 통해 회솔나무는 외부형태학적으로 근연종에 비해 원줄기는 곧고, 잎의 길이와 폭은 1.4배 이상 길고 종자는 가종피 바깥으로 돌출되는 특징으로 뚜렷이 구별되었다. DNA 바코딩 연구를 통해 matK, rbcL, trnL-trnF(trnL intron 포함) 구간의 염기서열을 비교한 결과 회솔나무는 유럽주목인 Taxus baccata와는 별개의 분계조를 형성하고 주목과 하나의 분계조를 형성하며 100% 동일한 염기서열을 갖는 것으로 나타났다. 한국 특산종인 설악눈주목은 외부형태학적으로 원줄기가 여러 개 나오며 옆으로 기고 잎의 길이와 폭은 주목에 비해 0.8-0.9배 작은 특징으로 뚜렷이 구별되지만, DNA 바코딩 연구 결과 주목과 100% 동일한 염기서열 서열을 가지며 하나의 분계조를 형성했다. 따라서 본 연구결과를 바탕으로 울릉도에 한정 분포하며 근연종에 비해 뚜렷한 형태학적 차이를 보이는 회솔나무는 T. cuspidata의 변종인 T. cuspidata var. latifolia로 인정하는 것이 타당한 것으로 판단된다.
한국산 금털고사리속(Hypodematium)은 오랫동안 금털고사리(H. glanduloso-pilosum) 1종으로 알려져 왔으나 최근 미기록종 흰금털고사리(H. squamuloso-pilosum)가 영월에서 그리고 신종 가는잎금털고사리(H. angustifolium)가 옥천에서 보고되었다. 금털고사리속 내 종을 구분하는 형질은 흔히 잎몸의 세열 정도, 털과 샘털의 유무, 잎자루 기부에 비늘조각의 모양 등으로 보고되어 있다. 제주도를 제외한 전국에서 석회암지대나 바위틈에 자생하는 금털고사리는 잎의 세열 정도, 포자낭군과 포막의 위치, 털의 분포와 크기 등에 큰 변이를 나타낸다. 이러한 변이는 금털고사리를 속 내 다른 분류군과 구분하는 데 어려움을 초래하고 있다. 따라서 국내 전국적으로 분포하는 금털고사리와 근연종의 형태학적 형질 및 분자적 분석(rbcL and psbA-trnH)을 통하여 금털고사리속 식물의 분류학적 및 계통분류학적 관계를 검토하고자 하였다. 그 결과 형태 형질 변이의 폭이 커서 전국적으로 조사했던 금털고사리는 잎자루와 포막의 다세포성 털과 막대모양의 선모를 밀집하는 형질과 땅속줄기와 잎자루 기부 비늘조각의 형태가 피침형 또는 긴타원상 피침형인 특성으로 가는잎금털고사리 또는 흰금털고사리와 뚜렷이 구별되었다. 두 구간의 cpDNA 염기서열 데이터 분석결과에서는 한국 자생 3종을 Glanduloso-pilosum clade로 묶였다. 아울러 중국과 한국에 분포하는 흰금털고사리, 한국에 분포하는 가는잎금털고사리, 그 외 중국과 일본에 분포하는 H. fordii 는 중국, 한국, 일본에 분포하는 그룹에 묶였다.
Background: Species in the heterokont genus Synura are colonial and have silica scales whose ultrastructural characteristics are used for classification. We examined the ultrastructure of silica scales and molecular data (nuclear SSU rDNA and LSU rDNA, and plastid rbcL sequences) to better understand the taxonomy and phylogeny within the section Petersenianae of genus Synura. In addition, we report the first finding of newly recorded Synura species from Korea. Results: We identified all species by examination of scale ultrastructure using scanning and transmission electron microscopy (SEM and TEM). Three newly recorded species from Korea, Synura americana, Synura conopea, and Synura truttae were described based on morphological characters, such as cell size, scale shape, scale size, keel shape, number of struts, distance between struts, degree of interconnections between struts, size of base plate pores, keel pores, base plate hole, and posterior rim. The scales of the newly recorded species, which belong to the section Petersenianae, have a well-developed keel and a characteristic number of struts on the base plate. We performed molecular phylogenetic analyses based on sequence data from three genes in 32 strains (including three outgroup species). The results provided strong statistical support that the section Petersenianae was monophyletic, and that all taxa within this section had well-developed keels and a defined number of struts on the base plate. Conclusions: The phylogenetic tree based on sequence data of three genes was congruent with the data on scale ultrastructure. The resulting phylogenetic tree strongly supported the existence of the section Petersenianae. In addition, we propose newly recorded Synura species from Korea based on phylogenetic analyses and morphological characters: S. americana, S. conopea, and S. truttae.
TALP-32 is highly basic protein with a molecular weight of 32 kDa purified from human term placenta. Some basic proteins such as defensins and cecropins are known to induce cell death by increasing membrane permeability and some of them are under development as an anticancer drug especially targeting multi-drug resistant cancers. Therefore, we investigated cytotoxic effect and mechanism of TALP-32 When HeLa cell was incubated with TALP-32, cytotoxicity was increased in time and dose dependent manner. As time goes by, HeLa cells became round and plasma membrane was ruptured. Increase of plasma membrane permeability was determined with LDH release assay. Also in transmission electron microscopy, typical morphology of necrotic cell death, such as cell swelling and intracellular organelle disruption was observed, but DNA fragmentation and caspase activation was not. And necrotic cell death was determined with Annexin V/Pl staining. The cytotoxicity of TALP-32 was minimal and decreased or RBC and Hep3B respectively. These data suggests that TALP-32 induces necrosis on rapidly growing cells but not on slowly growing cells implicating the possibility of its development of anticancer peptide drug.
관절염(또는 건초담), 발육부전증을 보이는 12주령 이하의 브로일러 종계와 브로일러에서 8주의 바이러스를 분리하여 avian reovirus로 동정하였다. 부리된 reovirus는 전자현미경에서 이중막을 갖는 구형으로 virion의 직경은 81nm였으며 한천겔침강반응에서 기지의 reovirus(S-1133 주) 및 항혈청(항 S-1133주 및 R-1주)과 반응하였다. 분리된 revirus는 혈구응집능력이 없었으며 chloroform, IUdR 및 열처리(56$^{\circ}C$, 30분)에 강한 저항성을 나타내었다. Reovirus의 감염성 측정시 계 태아섬유아세포 및 가세포배양과 Vero cell 배양에서 세포분주와 동시에 바이러스를 접종하거나 단층세포가 형성된 후접종하거나 간에 별다른 차이없이 감염 4-5일후에 end point에 도달되었다. 분리된 reovirus를 계태아간세포배양에 5-10대 계대배양한 후 $10^{5.0}$ TCI $D_{50}$의 바이러스를 10일령 발육계란의 장요막상에 접종하였을 때 평균치사시간이 국내분리주는 54-59시간인데 반하여 S-1133주는 73시간으로 약간 길었다.
This study was performed to evaluate the hemopoietic effects of 6 species of deer antlers from origins and parts in vitro. CD34 positive cells were isolated and confirmed the its population by FACS analysis. In a week liquid culture, there was any statistical significance between extracts of three parts of six species of deer antlers in the experiments as colony forming assay, proliferation assay, differentiation assay and observation of morphology. However, after 2 weeks- culture with extracts of three parts of six species of deer antlers, colonies were counted. six species of deer antlers, such as middle part of Korean nippon deer, upper part of Chinese nippon deer, upper part of Newzealand horse deer, middle part of Korea horse deer and middle part of Newzealand red deer, significantly increased the CFU-GM (colony forming unit garnulocyte-macrophage) of CD34 positive cells re1atεd to production of leucocytes such as eosinophil, basophil and neutrophil, while only middle part of Korea horse deer significantly increased the BFU-E (burst forming unit-erythroid) at 1 mg/ml seggesting progenting red blood cells (RBC). In the molecular study with CD34+ cells pretreated with cyclophosphamide, antagonist of hemopoietic activity, upper Part of Korean nippon deer and upper part of Chinese nippon deer effectively increased TPO involved in a late pathway of hematopoiesis just like in ELISA assay of IL-3, TPO and GM-CSF. Taken together, these results indicate exσacts of deer antler had some hemopoietic activity still proposing more clinical study and more basic mechanism research.
뗏목말과 녹조류는 담수생태계 주요 우점생물군으로, 형태적 가변성과 종 구분 기준의 복잡성이 증가하고 있어 전 세계 40속 약 380종의 계통분류체계는 명확하지 않다(Comas and Komárek 1984; Kim 2015a). 우리나라의 뗏목말과는 17속 119종이 알려져 있으나, Desmodesmus 속 38종의 계통관계에 대한 연구는 전무하다. 본 연구 결과는 우리나라 뗏목말과 Desmodesmus속 종간 계통관계를 다유전자 분석을 기반으로 제시한다. 본 연구는 국립낙동강생물자원관 담수생물자원은행 (FBCC)이 보유하고 있는 Desmodesmus속 19종(unidentifies spp 제외) 70개 배양주의 총 299개 유전자(핵 18S rRNA, 색소체 atpB, petA, rbcL, 및 tufA) 서열을 분석하였다. 본 연구에서 사용한 Desmodesmus속 종의 생태 및 형태적 특징으로 유연관계를 추정하기는 매우 어려웠다. 그러나 색소체 유전자(atpB, petA, rbcL 및 tufA)는 핵 18S rRNA보다 높은 변이율(P-distance)을 보여주며 종간 계통관계 구축의 유용성을 보여주고 있다. 다유전자 유합계통수는 Desmodesmus속 내 6개 이상의 clades 구분을 제안하고 있다. Clade-1에는 D. serratus, unidentified Desmodesmus sp. 1 FBCC-A515, 및 unidentified Desmodesmus sp. 2 FBCC-A1236를 포함하며, Clade-2는 D. communis, D. dispar, D. maximus, D. pannonicus 및 unidentified Desmodesmus sp. 3 (FBCC-A724 와 FBCC-A725)를 포함한다. Clade-3는 D. bicaudatus와 D. intermedius의 2종을, Clade-4는 D. microspina, D. pleiomorphus, D. subspicatus, 및 unidentified Desmodesmus sp. 10 (FBCC-A1279 및 FBCC-A1332)의 4종을, Clade-5는 D. abundans, D. spinosus, unidentified Desmodesmus sp. 4 FBCC-A1293, 및 unidentified Desmodesmus sp. 5 (FBCC-A1277 등)의 4종을, Clade-6는 D. armatus, D. armatus var. longispina, D. opoliensis, unidentified Desmodesmus spp 6~9를 포함한다. 담수생물자원은행(FBCC) 배양주의 새로운 유전자 정보는 뗏목말과 녹조류의 종동정 및 분자생태학적 연구에 활용할 수 있다. 또한 분자계통 결과는 우리나라 Desmodesmus속 녹조류의 종다양성 정보 확대에 기여할 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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