• 제목/요약/키워드: R Plasmid

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약수에서 分離한 大腸菌群의 일부 중금속 및 抗生劑耐性에 관한 연구 (Antibiotic and Heavy Metal Resistance of Coliform Bacteria Isolated from Mineral Water)

  • Jeong, Jee-Yeon;Zong, Moon-Shik
    • 한국환경보건학회지
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    • 제15권1호
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    • pp.63-73
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    • 1989
  • The purposes of this study were to find out the heavy metal and antibiotic resistant coliform bacteria from mineral water and the resistant factors. For the experiment, mineral water samples were taken from A area and B area during the period from march to July, 1988. The results of the experiment were as follows 1. From mineral water, eleven resistant coliforms and one susceptible coliform were isolated. 2. All resistant isolates harbored diverse plasmids of ranged ca. 14-54kb. 3. Susceptible coliform harbored a only plasmid of ca. 2.8 kb. 4. All resistant isolates harbored common size of plasmid of ca. 14kb. 5. As a result of the transformation and agarose gel electrophoresis experiments, resistant factor was R-plasmid. In conclusion, It is suggested that heavy metal contamination of mineral water is the selective pressure for the plasmid encoding the tolerance. Heavy metal resistance, in some case, is present with antibiotic resistance. Therefore, heavy metal contamination of mineral water induces antibiotic resistant bacteria.

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Hygromycin내성 Tetrahymena thermophila의 17S-Ribosomal RNA유전자의 Cloning (Cloning of 17S-Ribosomal RNA Gene from the Hygromycin Resistant Tetrahymena thermophila)

  • 홍용기
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제14권2호
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    • pp.133-137
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    • 1986
  • 원생동물인 Tetrahymena thermophila의 17S-rDNA구조 및 hygromycin 내성 기구에 대한 연구의 일부로서 hygromycin 내성변이주 hmr3의 17S-rDNA를 대장균의 vector pBR 322에 cloning하였다. 우선 rDNA는 hot phenol-cresol 용액으로 추출하여 제한효소 Hind III 처리로서 약 2.2kbp의 17S-rDNA를 agarose 전기영동상에서 분리하였다. 이를 pBR 322에 cloning하여 wild type의 17S-rDNA probe와 colony hybridization시켜 선별하였다. 그중 5-19 균주의 recombinant plasmid로부터 17S-rDNA 의 전사 orientation위치가 pBR322의 tetracyline내성 유전자 쪽으로 삽입되어 있는 것을 확인하였다.

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Salmonella 균속의 항균제 내성 및 R-plasmid (Antimicrobial Drug Resistance and R-plasmid of Salmonella species)

  • 이명원;정태화;이연태;강정복
    • 환경위생공학
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    • 제3권2호
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    • pp.23-41
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    • 1988
  • 1986년 1월부터 12월 사이에 전국 시$\cdot$도 보건연구소 및 주요종합 병원으로부터 일차분리 수집된 Salmonelle균속 286주를 실험균주로 하여 확인동정 실험, 항균제 감수성검사, plasmid DNA분리 및 접합에 의한 내성전달 실험을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 분리된 균주를 sero-group별로 보면 B group이 158주 $(55.2\%)$로 가장 많이 분리되었고, A group이 45주 $(15.7\%)$, D1 group이 43주 $(15\%)$, Cl, C2 group이 22주 $(7.7\%)$등의 순으로 분리되었다. serovar별 분리수는 Salmonella typhimurium이 92주$(32.2\%)$로 가장 많이 분리되었고, S. paratyphi-A 45주 $(15.7\%)$, S. enteritidis 41주$(14.3\%)$, S. paratyphi-B 27주 $(9.4\%)$ 등의 순으로 분리되었다. 분리균주의 월별 분포를 보면 9월 $(17.5\%)$, 5월$(16\%)$, 6월 $(14.7\%)$, 7월 $(10.5\%)$, 8월과 10월$(7.3\%)$등의 순으로 분리되었으며 5월에서 10월 사이에 $73.4\%$인 210주가 분리되었다. 분리균주의 지역별 분포는 강원$(29.7\%)$, 서울 $(27.6\%)$, 충남 $(14.3\%)$등으로 분리되었고, 성별 분포에서는 남성이 $41.6\%$로 여성$(28.6\%)$에서 보다 많이 분리되었으며, 연령별 분리분포는 1세에서 60세까지 고르게 나타났다. 2. 항균제 감수성 검사에서는 제1 이상의 항균제에 내성을 나타내는 균주가 85주$(29.7\%)$로 나타났다. 각 항균제별 내성균주는 tetracycline에서 80주 $(28\%)$가 내성을 보여 가장 많은 내성을 나타냈으며, streptomycin 65주 $(22.7\%)$, ampilcillin, carbenicillin 54주 $(18.8\%)$, chloramphenicol 51주$(17.8\%)$ kanamycin 7주 $(2.4\%)$, co-trimoxazole 2주$(0.7\%)$, tobramycin 1주$(0.3\%)$로 나타났다. 또한 1제내성균이 $8\%$, 2제 내성균이 $2.4\%$, 4제 내성균이 $1.8\%$, 5제 내성균이 $15.4\%$, 6제 내성균이 $1.8\%$, 7제 내성균이 $0.3\%$로 나타났으며, 그 중에서도 AmCbCmSmTc에 동시 내성인 균주가 $15\%$로 가장 많이 나타났다. Sero-group별 내성 양상은 B group에서 $26.2\%$로 가장 많았고, C2 group $(2.4\%)$, D1, E4 group$(0.3\%)$로 나타났다. 3. 접합에 의한 내성전달 결과 1제에서 7제까지 다양한 내성패턴에서 내성전달이 일어났으며, 내성전달은 전달성 R-plasmid에 의한 것이었다. 4. plasmid DNA분리 결과 내성균주 전체에서 한 개에서 네 개의 plasmid를 가지고 있었으며, 그 분자량은 1.6에서 70 megadalton 사이에 있었다. 같은 도에서 분리된 균주들중 내성패턴이 같은 균주들의 plasmid 패턴은 유사하였다. 접합에 의해 전달된 plasmid의 분자량은 42-57 megadalton이었다.

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Gentamicin 고도내성 Enterococcus faecalis균주의 항균제감수성, R-플라스미드 및 항원의 특성연구 (Studies on Antimicrobial Susceptibility and Characteristics of R-plasmids and Antigens of High-level Gentamicin Resistant Enterococcus faecalis)

  • 강현
    • 대한의생명과학회지
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    • 제1권1호
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    • pp.55-72
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    • 1995
  • 임상 검체에서 분리 동정한 E.faecalis 균주에 대하여 gentamicin및 타 항균제에 대한 감수성을 조사했고, R-플라스미드 DNA패턴 및 제한효소에 의한 DNA단편분석,filter-mating에 의한 gentamicin 플라스미드 DNA 전이, R-플라스미드 DNA 제거, tetracycline 내성 유전자확인, 항원분석을 실시하였다. 분리된 40주 E. faecalis 모두가 gentamicin에는 내성이었고, 25주는 요 검체에서 분리되었으며, 이 40균주들 중 95%가 입원환자에서 분리되어 중요한 원내감염균임을 알 수 있었다. Gentamicin 고도내성 E. faecalis는 24주(60%)이었고, 최소억제농도의 범위는 ampicillin이 1~64$\mu$g/ml, Chroramphenicol 이 8~128$\mu$g/ml 과 erythromycin 128 $\mu$g/ml, vancomycinol 1~2 $\mu$g이었다. 분리한 Gentamicin 고도내성 E. faecalis HL-1은 4가지 항균제에 모두 내성이었고, 7종류의 플라스미드가 있었다. HL-2와 HL-3은 모두 6종류, HL-4는 7종류, HL-5는 4종류 그리고 HL-6은 5종류의 플라스미드가 있었다. E. faecalis HL-1 과 HL-6의 내성전달 빈도는 6.3$\times10^{-4}$ 과 3.7$\times10^{-5}$이 었으며, E faecalis HL-1의 내성전달 빈도가 높았다 접합에 의해 E.faecalir HL-1과 HL-6의 플라스미드 중 51.7 Kb크기의 전이된 DNA가 확인되어 gentamicin 내성이 플라스미드 전이에 의한 것임을 알 수 있었다. Tetracycline 유전자는 E.faecalis transconjugants R-1의 2.15 Kb 플라스미드에 있었다. 공여균주 및 transconjugants균주의 항원성을 Immunoblotting으로 분석한 결과 E. faecalis HL-1과 E. faecalis transconjugants R-1균주는 97.8, 46.8 Kd의 분자량을 갖는 단백질과 공통적으로 반응하였고, E. faecalis HL-6와 E. faecalis transconjugants R-6균주는 46.8 Kd의 분자량을 갖는 단백질과 공통적으로 반응하였다. 그 반응의 강도는 85.8, 97.8, 46.8, 33.7, 63.5 와 74.8 Kd 순이었다. 공여균주 E. faecalis HL-6에서는 반응하지 않았던 97.8, 95.8, 74.8와 63.5 Kd의 단백질이 E. faecalis transconjugants R-6균 주에서 반응하였다. 이들 종 특이성 단백질을 Invitro에서는 배양되지 않는 E. faecalis에 대한 혈청학적 진단의 항원으로 이용한다면 유용할 것이다.

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Bacillus licheniformis 포도당 이성화 효소 유전자의 Excherichia coli에 발현 (Expression of Glucose Isomerase Gene from Bacillus licheniformis in Escherichia coli.)

  • 신명교;고영희
    • 미생물학회지
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    • 제23권2호
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    • pp.138-146
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    • 1985
  • 포도당 이성화효소를 coding는 Bacillus licheniformis ATCC31667의 유전자를 Escherichia coli LE 392-6에 클로닝하였다. Bacillus lieheniformis 염색체 DNA를 분리하고 제한효소인 Pst I.HindIII, Sal 1, EcoR 1, BamH1으로 절단한 후 운반제 plasmid인 pBR332에 연결하고 포도당 이성화효소 negative인 E. coli LE 3926-6에 형질전환하였다. 이중 E채꺄 제한효소를 사용한 것만이 glucose isomerase positive로 전환되어 xylose를 유일 탄소원으로 하여 성장하였다. 이 제조합 plasmid를 제한효소로 처리하여 본 결과 4.1Kb의 Bacillus licheniformisdb전자가 옮겨 졌음을 확인했고 여기에 제한효소 HindII와 Puv II의 절단위치가 확인되어 제한요소 지도를 작정하였다. 이 재조합 plasmid pBGI6는 연속계대 10일 후에도 매우안정하게 유지되었다. 한편 포도당 이정화 효소의 안정을 측정하여 본 바 야생숙주에 비해 약 20배의 증가를 나타냈다.

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Instability of the IncFII-Type Plasmid Carrying blaNDM-5 in a Klebsiella pneumoniae Isolate

  • Shin, Juyoun;Baek, Jin Yang;Chung, Doo Ryeon;Ko, Kwan Soo
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제27권9호
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    • pp.1711-1715
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    • 2017
  • In this study, we characterized the $bla_{NDM-5}$-bearing plasmid in a Klebsiella pneumoniae isolate that had lost the plasmid during serial passage. We determined the complete sequences of the plasmid pCC1410-2, which was extracted from a K. pneumoniae ST709 isolate collected at a Korean hospital from which two NDM-5-producing K. pneumoniae isolates were subsequently isolated. As a result, the pCC1410-2 plasmid had a backbone structure that was similar to those of two plasmids previously reported from the same hospital, but lacked some antibiotic resistance genes ($bla_{TEM-1}$, rmtB, mphR(A), mrx(A), and mph(A)). A 9-bp repeating unit encoding three amino acids (Gln-Gln-Pro) was inserted in TraD in pCC1410-2. Thus, the pCC1410-2 plasmid might be transferred from the previously identified carbapenem-resistant K. pneumoniae, but some delections and inversions might have occurred during the process. We compared the transfer frequency and stability of the plasmids. The relative frequency of conjugative transfer and stability in the host were significantly lower in pCC1410-2 than in previously reported $bla_{NDM-5}$-bearing plasmids in Korea. A low transfer frequency and instability in the host may cause underestimation of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae in the clinical setting and in surveillance studies.

1977년(年) 대구(大邱)에서 분리(分離)한 Salmonella 및 Shigella의 항균제(抗菌劑) 감수성(感受性) (Antimicrobial Susceptibility of Salmonella and Shigella Isolated in Taegu Area in 1977)

  • 박문재;전도기
    • 대한미생물학회지
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    • 제13권1호
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    • pp.31-36
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    • 1978
  • 1977년(年) 대구지방(大邱地方)에서 분리(分離)한 20주(株)의 Salmonella paratyphi A, 55주(株)의 S. typhi, 7주(株)의 Shigella flexneri, 14주(株)의 Sh. sonnei에 대(對)하여 항균제감수성(抗菌劑感受性)을 실험(實驗)하였다. S. paratyphi A는 전부(全部)가 salfisomidine(Sa)에 내성(耐性)이었으나 기타공시약제(其他供試藥劑)에는 전부(全部)가 감수성(感受性)이었고 특(特)히 gentamicin, amikacin, kanamycin에 감수성(感受性)이 강(强)하였다. S. typhi는 1주(株)가 chloramphenical(Cm), tetracycline(Tc), streptomycin(Sm) 및 Sa에 내성(耐性)이었고 R(Cm Tc Sm Sa)를 보유(保有)하고 있었으나 기타(其他) 균주(菌株)는 모든 약제(藥劑)에 감수성(感受性)이었고 특(特)히 ampiallin에 감수성(感受性)이 강(强)하였다. Shigella는 1주(株)를 제외(除外)한 20주(株)가 Cm, Tc, Sm 및 Sa에 고도내성(高度耐性)이었으며 기중(其中) 19주(株)가 plasmid R(Cm Tc Sm Sa)를 보유(保有)하고 있었다.

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Enterobacter균종의 항균제 감수성의 본태 (Characteristics of Antimicrobial Susceptibility of Enterobacter Species)

  • 김상운;이상화;김정완;설성용;조동택
    • 대한미생물학회지
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    • 제22권3호
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    • pp.251-258
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    • 1987
  • A total of 58 strains of Enterobacter species isolated from clinical specimens at Kyungpook National University Hospital in Taegu and Yonsei University Hospital in Seoul were tested for the molecular characterization to investigate the nosocomial infection through the study of R plasmids which might spread among Gram negative organisms regardless of their originated strains. All strains resistant to ampicillin, cefoxitin and cephalothin but susceptible to moxalactam were subjected to the further test for the determination of in detail MIC value against 23 drugs of common use including beta-lactam antibiotics and R plasmid profile analysis. The reistance frequency of strains against carbenicillin (53.4%) was similar to those against chloramphenicol, tobramycin, and sulfisomidine. Though the MIC values of resistance criteria against ceftazidime, aztreonam, imipenem, and norfloxacine in NCCLS manual were not available but MIC ranges of strains tested were very low. There were differences in patterns and frequencies of resistance between the strains isolated in Seoul and Taegu isolates. Seoul isolates showed a tendency of higher multiplicity of resistance than those of Taegu isolates. The resistances against cefoxitin, cephalothin, cefoperazone, cefotaxime, nalidixic acid, and rifampin were not conferred to the conjugally transferable R plasmid. The approximate molecular size of conjugally transferable R plasmids ranged 30 to 151 megadalton, and one or 2 to 3 R plasmids were identified in each transconjugants.

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Construction of Conjugative Gene Transfer System Between E. coli and Moderately Thermophilic, Extremely Acidophilic Acidithiobacillus caldus MTH-04

  • Liu, Xianggmei;Lin, Jianqun;Zhang, Zheng;Bian, Jiang;Zhao, Qing;Liu, Ying;Lin, Jianqiang;Yan, Wangming
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제17권1호
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    • pp.162-167
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    • 2007
  • A genetic transfer system for introducing foreign genes to biomining microorganisms is urgently needed. Thus, a conjugative gene transfer system was investigated for a moderately thermophilic, extremely acidophilic biomining bacterium, Acidithiobacillus caldus MTH-04. The broad-hostrange IncP plasmids RP4 and R68.45 were transferred directly into A. caldus MTH-04 from Escherichia coli by conjugation at relatively high frequencies. Additionally the broad-hostrange IncQ plasmids pJRD215, pVLT33, and pVLT35 were also transferred into A. caldus MTH-04 with the help of plasmid RP4 or strains with plasmid RP4 integrated into their chromosome, such as E. coli SM10. The $Km^r\;and\;Sm^r$ selectable markers from these plasmids were successfully expressed in A. caldus MTH-04. Futhermore, the IncP and IncQ plasmids were transferred back into E. coli cells from A. caldus MTH-04, thereby confirming the initial transfer of these plasmids from E. coli to A. caldus MTH-04. All the IncP and IncQ plasmids studied were stable in A. caldus MTH-04. Consequently, this development of a conjugational system for A. caldus MTH-04 will greatly facilitate its genetic study.

Shigella균속의 항균제내성, 전달성 R-plasmid 및 제거에 관한 연구 (The R-Plasmid Transfer and Elimination of Shigella Cultures)

  • 홍성노;이연태
    • 대한미생물학회지
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    • 제21권1호
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    • pp.33-45
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    • 1986
  • On hundred and forty stains of shigella cultures isolated from the twelve hygiene laboratories of cities and provincial general hospital laboratories in 1983 were tested for their resistance to thirteen antimicrobial drugs and their R-plasmid transfer. Antimicrobial drugs were used amikacin, ampicillin, cephalothin, chloramphenicol, gentamicin, kanamycin, nalidixic acid, rifampicin, streptamycin, tetracycline, tobramycin, cefoperazone and piperacillin. All strains were resistant to one or more of thirteen antimicrobial drugs but 94.3% were susceptible to amikacin, gentamicin and tobramycin of total isolated. The most strains commonly found resistance was to chloramphenicol (94%) followed by streptamycin (93%), tetracyline (92%) piperacillin (90%) ampicillin (83%), cefoperazone (42%), nalidixic acid (14%), cephalothin (17%), rifampicin (22%) and kanamycin (6%), sixty percent of strains among 140 were resistance to ampicillin, chloramphenicol, streptomycin, tetracycline at the same time. The transfer of drug resistance by conjugation was tested and ninety four strains (94.3%) were resistant to one or more drugs were found to transfer their drug resistance of E. coli. percentage of transfer frequency by conjugation was one strains (54%), the transfer frequency of drug resistance varied by donor strains and recipients, but not by selecting drugs. Resistance to nalidixic acid was not transferred by conjugation to recipients. Percentage of plasmid curing after the treatment of acriflavine, acridine orange was about 8%. Among strains cured two strains were tested compare original strains with them in biochemical properties in arginine dihydrolase and arabinose fermentation reaction. It was found to growth curves of No.2 shigella flexneri, serotype 1b, and its derivatives cured with acriflavine in $M{\ddot{u}}ller$ Hinton broth medium (pH 7.4, $38^{\circ}C$) by temperature Gradient Biophoto Recorder TN-1120 (Tokyo, Japan).

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