Seventy-two strains of Pseudomonas aeruginosa isolated from the patients were tested for pigment production, exoenzyme production and antimicrobial susceptibility. In the pigment production test, 23.6% of total 72 strains produced both pyocyanine and pyoverdin. Pyoverdin and pyomelanin producing strains were in 9.7%, and 5.5% produced pyoverdin and pyorubin. Strains producing of all of exoenzyme, protease, elastase and lecithinase were in 5.6%. The most common type of exoenzyme production was both protease and elastase producing. Protease producing strain were 23.6%, Among the 72 strains, 50% produced protease. As the result of antimicrobial susceptibility in the isolated 20 strain, most strain were resistant to sulfamethoxazole(90%), but sensitive to other tested antibiotics more than 60%. The MIC50 and MIC90 level of tested antibiotics to 70 strains were 128 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$, 512 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for KM, 8,256 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for GM, 8, 128 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for CPZ, and 8, 64 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for PIPC respectively.
Kim, Sang-Dal;Lee, Eun-Tag;Lim, Si-Kyu;Nam, Doo-Hyun;Khang, Yong-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제13권3호
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pp.415-421
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2003
A bacterium, Pseudomonas fluorescens 2112, that is antagonistic against a red-pepper blight-causing fungus, Phytophthora capsici, was isolated from the local soil of Gyongju, Korea. This strain formed an orange-colored clear halo zone on chrome azurol S (CAS) blue agar, suggesting the production of a siderophore in addition to an antifungal antibiotic. The optimal culture conditions for siderophore production by P. fluorescens 2112 were 30-h cultivation at $25^{\circ}C$ and pH 6.5 in King's B medium. The presence of $20{\mu}g/ml\;of\;Fe^3+$ ion or EDDHA promoted the production of siderophore in King's B medium. The siderophore was purified from culture broth by CM-Sephadex C-25 and Sephadex G-25 column chromatographies. The UV spectra of the purified siderophore was the same as that of pyoverdins or pseudobactins. The molecular mass was 1,958 Da determined by FAB-rlass spectrometer, and the amino acid composition analysis showed that the purified siderophore consisted of glycine/threonine/serine/glutamic acid/alanine/lysine with the molar ratio of 3:2:1:1:1:1, DL-Threo-${\beta}$-hydroxyaspartic acid and $N^{\delta}$-hydroxyornithine, two of the essential constituents of pyoverdin, were also found. The purified siderophore pyoverdin showed strong in vitro and in vivo antagonistic activities against phytophthora blight-causing P. capsici. Especially in an in vivo pot test, the siderophore protected red-pepper Capsicum annum L. very well from the attack of P. capsici. These results indicated that the purified siderophore of P. fluorescens 2112 played a critical role in the biocontrol of the red-pepper blight disease, equivalent to treatment by P.fluorescens 2112 cells.
Plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) have been shown to suppress phytopthora blight. This suppression has been related to both microbial antagonism and induced resistance. The PGPR isolates were screened by dual culture plate method and most of the isolates were showed varying levels of antagonism. Among the PGPR isolates pyoverdin, pyochelin and salicylic acid producing strains showed the maximum inhibition of mycelial growth of Phytopkhora capsici and increased plant growth promotion in red pepper. PGPR isolates further analysed for its ability to induce production of defence related enzymes and chemicals. The activities such as Phenyle alanin ammonia Iyase (PAL), Peroxidase (PO), Polyphenol oxidase (PPO) and accumulation of phenolics were observed in PGPR pretreated red pepper plants challenged with Phytopkhora capsici. The present study shows that an addition of direct antagonism and plant growth promotion, induction of defense related enzymes involved to enhance resistance against invasion of P. capsici in red pepper.
M. Rajkumar;Lee, Kui-Jae;Park, Min-Kyung;Jo, Rae-Yun;Lee, Wang-Hui
한국자원식물학회:학술대회논문집
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한국자원식물학회 2003년도 제10차 국제학술회의 및 추계정기 학술발표회
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pp.47-47
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2003
Plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) have been shown to suppress phytopthora blight. This suppression has been related to both microbial antagonism and induced resistance. The PGPR isolates were screened by dual culture plate method and most of the isolates were showed varyinglevels of antagonism. Among the PGPR isolates pyoverdin, pyochelin and salicylic acid producing strains showed the maximum inhibition of mycelial growth of Phytophthora capsici and increased plant growth promotion in red pepper. PGPR isolatesfurther analysed for its ability to induce production of defence related enzymes and chemicals. The activities such as Phenyle alanin ammonia lyase (PAL), Peroxidase (PO), Polyphenol oxidase (PPO) and accumulation of phenolics were observed in PGPR pretreated red pepper plants challenged with Phytophthora capsici. The present study shows that an addition of direct antagonism and plant growth promotion, induction of defense related enzymes involved to enhance resistance against invasion of P. capsici in red pepper.
본 논문에서는 철 이외에 사이데로포 생성에 관여하는 요인을 연구하였다. 약산성(pH6)에서 세포의 양은 감소하는 반면에 세포당 사이데로포의 생성은 증가하였다. 사이데로포 생성의 적정온도는 7NSK2 균주가 $12^{\circ}C$이고 ANP15은 $19^{\circ}C$였다. 배지의 C : N 비율에 따른 사이데로포 생성력을 보면 C : N율이 낮은 배지에서는 사이데로포 생성과 세포생장은 감소됐다. 서로 다른 배지에서 사이데로포 생성을 조사한 바에 의하면 citrate를 탄소원으로 했을 경우 세포의 철 흡수능력이 증가했으며 사이데로포 생성도 감소되었다. 그러나 Glucose나 Succiuate에 비해서 citrate 배치의 세포량에는 별 차이가 나타나지 않았다. 이상의 결과로 보아 환경요인으로 작용할 수 있는 pH나 온도, 탄소원 등은 철분 외에도 사이데로포의 생성에 영향을 미칠 수 있음을 확인하게 되었다.
토양(土壤) 병원성(病原性) 미생물(微生物)에 대한 길항력(拮抗力)이 강한 PGPR인 P. fluorescens SSL3과 B. subtilis B5를 배양(培養)하여 다양한 담체에 혼합접종(混合接種)하여 제제화(製劑化)한 다음 각 제제에 대한 보관온도에 따른 공시균주(供試菌株)의 생존율(生存率)과 siderophore 생성조건, 전자현미경 사진을 통한 제제내의 균체생육 환경을 조사하고 감자의 수량(收量) 및 원예작물(園藝作物)의 초기생육(初期生育)에 미치는 영향을 조사(調査)한 결과는 다음과 같다. 1. 제제의 저장온도(貯藏溫度)에 따른 공시균주의 생존율(生存率)은 $4^{\circ}C$의 경우 분말형(粉末形) 토탄/석회, 질석, 밀기울 제제에서 경시적으로 서서히 감소하였으며, $4^{\circ}C$ 보다는 $25^{\circ}C$에서 공시균의 감소 경향이 두드러졌으며, 분말형(powder)제제의 경우 5% skim milk를 영양원으로 처리한 경우 보존기간중의 균체 감소정도가 둔화되었다. 2. 병원성(病原性) 사상균(絲狀菌)인 F. oxysporum에 대한 공시균(供試菌) B. subtilis(B5)와 P. fluorescens(SSL3)의 혼합처리효과(混合處理效果)는 F. oxysporum에 대한 생육억제(生育抑制) 효과(效果)를 보이지 않았지만, R. solani에 대해서는 대조구에 비해 78.4%의 생육억제 효과를 보였다. 3. 전자현미경(SEM) 사진을 통한 제제내에서 공시균(供試菌)의 생육환경을 살펴본 결과 분말형 제제가 더 낳은 것으로 보이지만, 제제 자체가 다양한 미생물(微生物)들의 영양원으로 이용될 수 있는 경우 밀기울에서는 장기간(長期間)의 보존기간중(保存期間中) 타균(他菌)에 의한 오염(汚染)의 가능성이 있다. 4. 공시균(供試菌) P. fluorescens SSL3을 MKB 액체배지에서 48시간 생육시켜 원심분리(遠心分離)한 후 상징액을 취해 파장 220~600nm에서 scanning한 결과 Pseudomonas속 균(菌)들중 PGPR적 특징(特徵)을 갖는다고 알려진 pyoverdin과 pyochelin을 400nm와 300nm에서 peak를 확인할 수 있었다. 5. 공시균(供試菌) 혼합제제(混合製劑)의 오이, 토마토, 고추의 초기생육(初期生育)에 미치는 영향을 조사(調査)한 결과 공시작물 모두에서 토양, 밀기울과 구슬형 밀기울 제제가 뛰어난 생육촉진(生育促進) 효과(效果)를 보였다. 특히, 고추의 경우 토양, 질석, perlite에서 지상부(地上部), 지하부(地下部)의 신선중(新鮮重)과 건물중(乾物重) 증가 효과를 보였으며, 오이의 경우에는 CMC 처리구에서 지하부(地下部)를 87%의 생육촉진 효과를 보였다. 6. 감자의 생육(生育)과 수량(收量)에 미치는 영향중 일반종서(一般種薯)에 처리한 제제중에서 구슬형 제제 처리구가 분말형제제 처리구 보다 많은 22~29%의 증수효과(增收效果)를 보였으며, 조직배양(組織培養) 종서의 경우에 분말형(粉末形) 제제(製劑) 처리구가 가장 높은 30%의 증수효과를 보였다. 그리고 CMC제제 처리구에서는 B5 단독처리구가 대조구에 비해 22.9%의 증수효과를 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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