• Childhood Kidney Diseases
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• 제15권2호
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• pp.138-145
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• 2011

목적 : 단백뇨 질환의 실험모델인 puromycin aminonucleoside (PAN)에서 관찰할 수 있는 족세포의 병리학적 이상에 있어서 ${\beta}$-catenin의 변화를 생체 외 족세포 배양실험을 통하여 알아보고자 하였다. 방법: PAN에 의한 족세포의 ${\beta}$-catenin의 변화를 생체 외 배양실험을 통해 알아보고자 백서 사구체 상피세포를 배양하여 다양한 농도의 PAN을 투여하여 confocal 현미경을 통하여 ${\beta}$-catenin의 분포를 관찰하였고, Western blotting과 RT-PCR을 사용하여 ${\beta}$-catenin 발현의 변화를 관찰하였다. 결과:외곽세포질에 분포하는 ${\beta}$-catenin이 단일세포 혹은 응집환경에서 PAN의 농도가 올라갈수록 흐려지면서 세포간에 간극이 생기는 것을 볼 수 있었다. Western 분석에서, ${\beta}$-catenin 단백양은 PAN의 농도가 증가할수록, 특히, 고농도인 $50{\mu}g/mL$에서 24시간과 48시간이 노출 조건에서 각각 34.9%와 34.3%의 의미 있는 감소소견을 보였다(P<0.05). 이러한 소견은 RT-PCR에서도 유사하게 보였으며, 24시간에서는 고농도인$50{\mu}g/mL$ PAN을 첨가한 조건에서 25.4%의 의미 있는 감소를 보였으며, 48시간에서는 $25{\mu}g/mL$와 $50{\mu}g/mL$ PAN을 첨가한 조건에서 각각 46.6%와 51.8%의 의미 있는 감소를 보였다. 결론: PAN은 족세포에서 ${\beta}$-catenin을 세포막으로부터 내부로의 분포변화를 유발하고, ${\beta}$-cate-nin mRNA의 발현 감소와 단백수준에서 양의 감소를 초래함으로서, PAN에 의한 족세포 내 분포변화에 유전자 억제에 의한 ${\beta}$-catenin 단백의 감소로 단백뇨의 발생에 기여할 것이라 사료된다.

• 대한예방한의학회지
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• 제4권2호
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• pp.294-312
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• 2000

The effects of Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu on rats with nephrosis induced by a single tail-intravenous injection of PAN(puromycin amjnonucleoside), 2.5mg/100g of body weight was evaluated in the present study. The effects of Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu on PAN nephrosis was evaluated by measuring the concentrations of albumin, total protein, total lipid, cholesterol, triglyceride in the serum and the amount of protein in the urin. The results are summarized as follows; 1 In The Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu group as compared to The Control group, The concentrations of albumin and total protein in the serum were significantly increased. 2. In The Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu group as compared to The Control group, The concentrations of total lipid, cholesterol and triglyceride in the serum were significantly decreased 3. In The Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu group as compared to The Control group, The amount of urine protein during 24 hours were significantly decreased . 4. In The Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu group as compared to The Gamisoohwabunchungum group, The concentrations of total protein in the serum were significantly increased. 5. In The Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu group as compared to The Gamisoohwabunchungum group, The concentrations of cholesterol and triglyceride in the serum were significantly decreased To conclude, it can be inferred that Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu have the effects of improving proteinuria, hypoproteinemia, hyperlipidemia in nephrotic syndrome.

• 대한한의학회지
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• 제18권2호
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• pp.283-315
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• 1997

The effects of Geumguesingitang and Dohongsamultang on rats with nephrosis induced by a single tail-intravenous injection of puromycin aminonucleoside(PAN), 2.5mg/l00g of body weight were evaluated in the present study. The effects of Geumguesingitang and Dohongsamultang on PAN nephrosis were evaluated by measuring (1)the concentrations of albumin, total protein, total lipid, cholesterol, triglyceride, creatinine, blood urea nitrogen(BUN) and uric acid in the serum, (2)the concentrations of protein, creatinine, glucose, occult blood and volume of the 24 hours urine and (3)the volume of intake water. The results are summerized as follows; 1. In the Control group as compared to the Normal. the amount of protein of 24 hours urine was significantly increased, the concentrations of albumin and total protein were significantly decreased. Total lipid, cholesterol and triglyceride in the serum were significantly increased. The concentrations of creatinine, BUN, uric acid in the serum, the amount of glucose and occult blood of 24 hours urine were also increased significantly. 2. In the Geumguesingitang group as compared to the Control, the increase in the amount of urinary protein during 24 hours induced by PAN was significantly suppressed, and the concentrations of total protein and albumin in the serum were significantly increased. The concentrations of total lipid, cholesterol and triglyceride in the serum were significantly inhibited. The decrease of the concentrations of creatinine and uric acid in the serum were also observed significantly. 3. In the Dohongsamultang group as compared to the Control, the increase of the amount of protein and glucose of the 24 hours urine induced by PAN were significantly inhibited, and the concentrations of total protein and albumin in the serum were increased significantly. The concentrations of total lipid, cholesterol and triglyceride in the serum were decreased significantly. The decrease of the concentrations of creatinine and uric acid in the serum were observed significantly. It can be inferred that Geumguesingitang has effects on improving proteinuria, hypoproteinemia effectively. It has an effect on hyperlipidemia significantly relieved. And relieving azotemia when nephrotic syndrome is accompanied by the acute renal failure. It can be inferred that Dohongsamultang improves hyperlipidemia effectively. It has effects on proteinuria, hypoproteinemia in nephrotic syndrome significantly relieved. And relieving azotemia when nephrotic syndrome is accompanied by the acute renal failure.

• Childhood Kidney Diseases
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• 제3권1호
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• pp.35-41
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• 1999

목 적 : 사람의 미세변화 신증후군과 유사한 신증을 일으키는 것으로 알려진 puromycin aminonucleoside (PAN)의 1회 투여로 발생하는 신세포의 변화는 여러 기전이 작용하는 것으로 알려져 있으며, 최근에는 oxygen free radical이 사구체 손상의 중요한 한 가지 원인이라고 한다. 백서에 PAN을 투여하여 신증을 발생시킨 후, $\alpha$-tocopherol을 투여하였을 때 PAN신증에 미치는 영향에 대해 연구하고자 한다. 방 법 : 건강한 수컷 Sprague-Dawley 흰 쥐를 3군으로 나누어, 1군은 생리 식염수를 1회 투여한 대조군(N=6), II군은 PAN 1회 단독 투여군 (N=8), III군은 PAN투여 후 $\alpha$-tocopherol을 투여한 군 (N=7)으로 하였다. PAN 투여 직전과 투여 후 5일, 11일, 18일에 24시간 뇨의 protein, creatinine을 측정하였고, 18일째에는 혈청 protein, albumin, cholesterol도 함께 측정하였다. 또한 Oxygen free radical에 의한 신장 조직 손상을 평가하기 위해 신장 피질 미세균질액의 lipid peroxide와 reduced glutathione을 측정하였다. 결 과 : PAN투여 5일 후 24시간 뇨 protein/creatinine비는 II군과 III군에서 대조군에 비해 유의하게 증가하였다(P<0.01), 그러나 18일째에는 $\alpha$-tocopherol를 투여한 III군이 PAN을 단독 투여한 II군에 비해 유의하게 단백뇨가 적었다 (P<0.05). 신장 피질의 lipid peroxide과 reduced glutathione은 III군에 비해 II군에서 유의하게 증가하였다(P<0.05). 18일째의 신조직의 형태학적 변화는 PAN단독으로 투여한 II군에서는 사구체 상피세포의 족돌기가 심하게 융합되어 있으나, $\alpha$-tocopherol을 투여한 III군에서는 족돌기가 잘 보존되고 있었다. 결 론 : PAN투여로 초래된 백서 신증에서 $\alpha$-tocopherol의 투여는 lipid peroxidation의 진행을 차단하여 족돌기의 손상을 회복시키며 단백뇨의 배설도 감소시키는 것으로 사료된다.

• Childhood Kidney Diseases
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• 제7권1호
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• pp.9-15
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• 2003

목적 : PAN-induced nephrosis 쥐 모델에서 HMG-CoA reductase inhibitor로 작용하여 콜레스테롤을 낮추는 약제로 알려진 atorvastatin을 투여함으로써, 지질대사에 대한 효과와 지질대사의 변화가 쥐 모델의 신장 변화에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : 수컷 Sprague-Dawley 흰쥐를 사용하여 대조군(I군), PAN 단독 투여군(II군), PAN과 atrovastatin 동시 투여군(III군) 3군으로 나누었으며, PAN은 체중 100 gm 당 2 mg을 첫 피하 주사한 후 1, 3, 5, 7, 9주에 반복하여 피하 주사하였으며, atorvastatin은 체중 100 gm당 5 mg을 물에 녹여 매일 경구 투여하였다. 실험 개시 후 11주에 24시간 소변과 혈액을 채취한 다음 신장을 적출 하였으며, 소변의 protein과 creatinine 그리고 혈청의 albumin, BUN, creatinine, lipid profiles를 측정하고, 신장의 형태학적 변화를 관찰하였다. 결과 : 혈청 총 콜레스테롤은 II군이 $291{\pm}173\;mg/dL$, III군이 $167{\pm}72\;mg/dL$, LDL은 II군이 $57{\pm}53\;mg/dL$, III군이 $27{\pm}12\;mg/dL$로 II군 보다 III군에서 감소하였으나 통계학적으로 유의하지는 않았다. 광학 현미경 검사상 사구체 경화의 빈도는 II군이 26.2%, III군이 13.3%로 II군보다 III군에서 적게 나타났다. 결론 : Atorvastatin을 puromycin과 같이 투여한 경우 총 콜레스테롤과 LDL을 낮추었으며 사구체 경화의 빈도도 감소시킨 것으로 보아 고지혈증이 사구체 경화성 변화에 중요한 원인 중의 하나로 생각된다.

• BMB Reports
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• 제46권4호
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• pp.230-235
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• 2013

Nephrin, a structural molecule, is also a signaling molecule after phosphorylation. Inhibition of nephrin phosphorylation is correlated with podocyte injury. The PINCH-1-ILK-${\alpha}$-parvin (PIP) complex plays a crucial role in cell adhesion and cytoskeleton formation. We hypothesized that nephrin phosphorylation influenced cytoskeleton and cell adhesion in podocytes by regulating the PIP complex. The nephrin phosphorylation, PIP complex formation, and F-actin in Wistar rats intraperitoneally injected with puromycin aminonucleoside were gradually decreased but increased with time, coinciding with the recovery from glomerular/podocyte injury and proteinuria. In cultured podocytes, PIP complex knockdown resulted in cytoskeleton reorganization and decreased cell adhesion and spreading. Nephrin and its phosphorylation were unaffected after PIP complex knockdown. Furthermore, inhibition of nephrin phosphorylation suppressed PIP complex expression, disorganized podocyte cytoskeleton, and decreased cell adhesion and spreading. These findings indicate that alterations in nephrin phosphorylation disorganize podocyte cytoskeleton and decrease cell adhesion through a PIP complex-dependent mechanism.