Lee, Ka Jeong;Kwon, Soon Jae;Jung, Yeoun Joong;Son, Kwang Tae;Ha, Kwang Soo;Mok, Jong Soo;Kim, Ji Hoe
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.50
no.6
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pp.669-674
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2017
Paralytic shellfish toxins (PSTs) are produced by marine dinoflagellate phytoplankton Alexandrium spp. and Gymnodinium spp. These toxins accumulate in filter feeding organisms such as bivalves and the ingestion of contaminated shellfish can cause illness in humans. The mouse bioassay (MBA) has been the preferred PST testing method worldwide for more than 50 years. However, this assay has several disadvantages, such as detection limits, non-toxic-profiles, and the ethical issues of using animals. The aim of this study was to establish an alternative to the MBA method for testing for PSTs. We optimized the analysis conditions of a post-column oxidation-high performance liquid chromatography (PCOX-HPLC) method and the Scotia Rapid Test Kit, and then compared the accuracy of these methods to the MBA method. The results demonstrated a strong correlation between the PCOX-HPLC method and the MBA, although the PCOX-HPLC method required expensive equipment and standard material, and was time consuming. The Scotia Rapid Test Kit promises to be a useful tool, as it provided rapid and qualitative results, although the method sometimes gave a false positive result that could not be explained by toxin profiles.
Cell-mediated immune response (CMI) is a major immune protective mechanism against tuberculosis (TB) infection. Among several components involved in CMI, recent studies suggest that CD8+ T cells are important in controlling TB infection. In our previous report, we defined four Mycobacterium tuberculosis (MTB) derived epiotpe peptides specific for HLA-A*0201-restricted CD8+ T cells. These four peptides are $PstAl_{75-83}$, $ThyA_{30-38}$, $RpoB_{127-135}$ and $85B_{15-23}$. In this study, these epitope peptides specific CD8+ T cell responses in tuberculous pleurisy were investigated using ex vivo $IFN-\gamma$ elispot assay and intracellular $IFN-\gamma$ staining method. As a result, we observed these epitope peptide specific CD8+ T cell responses are induced in all three patients with tuberculous pleurisy suggesting that CD8+ T cells are involved in protective immune mechanism against MTB infection in tuberculous pleurisy. However, the CMI to mitogens and MTB antigens from pleural fluids of patients with tuberculous pleurisy does not seem to correlate with that from peripheral blood, although the sample size is too small to make any conclusion. In sum, the MHC I restricted CD8+ T cell responses seem to be induced efficiently in the pleural fluids, at the site of TB infection, in which the CMI is actively induced. In addition, these experiments suggest that MHC I restricted CD8+ T cell mediated immune responses are also involved in protective mechanism against MTB infection in extra-pulmonary TB.
Wang, Wenjun;Ouyang, Kehui;Ouyang, Jianhua;Li, Haihua;Lin, Shumao;Sun, Han
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.17
no.3
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pp.301-304
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2004
The polymorphism of insulin-like growth factor I (IGF I) in 6 chicken breeds (total n=515) was detected by PCR-Pst IRFLP, and allele A (621 bp) or allele B (364 and 257 bp) were observed. In these chicken breeds, it was found that exotic chicken carried high frequencies of allele B, while Chinese native chicken breeds carried high frequencies of allele A. Meanwhile the role of IGF I was investigated in 133 Ningdu Yellow chicken and 162 Wanzhai Yellow chicken. Five growth traits were recorded for analyzing the association between IGFI gene polymorphism and performance. In both the Ningdu and Wanzhai Yellow breeds, body weight at 4 months was significantly higher with BB genotype than with AA genotype (p<0.05). Furthermore, body weight at 2 months in the Wanzhai Yellow breeds was also higher with BB genotype than with AA genotype (p<0.05). There were no differences among the genotypes for the other traits studied. Based on these results, it is necessary to do more studies on IGFI before making the IGFI locus into the application of maker-assisted selection programms.
Antibiotic resistant bacteria isolated from the river water in Cheongju City were studied on the transfer of their R-plasmids in water environment. The R-plasmids were transferred by conjugation between the isolates ai the frequencies of 1.1$\times$10$^{-6}$ to 1.2$\times$10$^{-7}$ under laboratory condition and 1.2$\times$10$^{-7}$ to 1.0$\times$10$^{-9}$ in natural environment. The R-plasmids isolated from those bacteria were also transferred into the recipient cells of E. coli HB101 at the frequencies of 1.7-6.7$\times$10$^{-6}$. The AP$^{r}$Cm$^{r}$Tc$^{r}$-plasmid of isolate T-44 which were transformation by conjugation and transformation was determined to be 9.01 kilobses in molecular size. When the AP$^{r}$Cm$^{r}$Tc$^{r}$-plasmid DNA was treated with restriction endonuclease, the plasmid appeared to have one restriction site for EroRI and BamHI, respectively, and three sites for Pst I endonuclease.
Objectives: The purpose of this study is to investigate the usefulness of psychological measurements in depression symptoms as compared with non-depressions and hwabyung. Methods: A total of 21 patients, who were diagnosed with depression and hwabyung, were evaluated by using the SCL-90-R, BDI, STAI, STAXI, ISI, HRSD, 20-Item Alexithymia Scale, BSDS and NEO-PI. Thereafter, they were statistically analyzed. Results: 1) In the results of SCL-90-R, the PST score group of hwa-byung group without depression was significantly higher when compared to the score from the depression group without hwa-byung. 2) In the results of NEO-PI, the NEO-PI-O score of hwa-byung group without depression was significantly higher when compared to the score from the depression group without hwa-byung. 3) In the results of 20-Item Alexithymia Scale, the total score and score of difficulty for identifying feelings scale from the depression group was significantly higher when compared to the score of non depression group. Conclusions: The results found are expected to serve as a useful resource for future studies when developing the instruments of oriental medical evaluations for hwa-byung.
Porcine Proliferative Enteropathy(PPE) is an infectious enteric disease and a major cause of economic loss in swine industry due to weight loss, poor growth and sudden death in growing and finishing pigs at 6 to 20 weeks of age. PPE has been diagnosed by clinical signs, syndrom and lesions in the intestine in Korea. However, the diagnostic method had several problems in the detection of infected or carrier pigs. Therefore, in this study, we established the polymerase chain reaction(PCR) which was a fast, specific and sensitive method for identification of Lawsonia intracellularis (L intracellularis). We designed and synthesized primer on the 16S rDNA and p78 gene encoding L intracellularis. Specificity of the method was confirmed by comparison of the PCR results using other enteric bacteria and the study has shown that PCR method was sensitive to detect 1ng of genomic DNA as a template. Identity of the PCR products was confirmed by comparison of pattern of restriction endonuclease analysis with restriction enzyme Hae III and Pst I. Also, the PCR method was applicable to the naturally affected pigs with PPE. Based on the results from this study, the PCR method could be used as a fast and specific diagnostic tool for PPE.
To make the genomic DNA probe of Theileria sergenti, the merozoites were purified from bovine erythrocytes. The infected erythrocytes were lysed by Aeromonas hydrophila(Ah-1) hemolysin, and the parasites were isolated by ultracentrifugation on a Percoll discontinuous density gradient. For construction of a T sergenti genomic DNA library, T sergenti DNA was digested with Pstl and the fragments were ligated into the PstI site of pUC19 before transformation of Escherichia coli JM83. Out of thousands of transformants obtained by transformation of E coli JM83 with the genomic library, three plasmids were chosen. The sizes of the inserted DNAs were 2.9kb(2.4kb and 0.5kb) in pKTS1, 4.3kb in pKTS2 and 1.5kb in pKTS3, respectively. The DNA fragments used as probe KTS1(2.4kb), KTS2(4.3kb) and KTS3(1.5kb) were labeled digoxigenin-11-dUTP for the Southern hybridization. In Southern hybridization, all of the probes(KTS1, KTS2 and KTS3) reacted specifically to T sergenti DNA, but not to bovine leucocyte DNA. In order to find out the sensitivities of the digoxigenin-11-dUTP-labeled KTS1 and KTS3 as the probes, purified merozoite DNA and bovine DNA (control) were checked by dot blot hybridization with the probes. Both of the probes, KTS1 and KTS3, detected as minimum amount of 975pg of the T sergenti DNA, but not bovine DNA even to 500ng.
Bacillus thuringiensis serovar. darmstadiensis produced bipyramidal endo-toxin. The toxin protein was purified by Renografin-76 step gradient centrifugation and investigated by electron microscope. Analysis of total plasmid DNA patterns showed that four different size of plasmids existed in wild type B. thuringiensis serovar. darmstadiensis. Total plasmids DNA was isolated and transformed into pst I site of pBR322 cloning vector. Ten clones containing crystal toxin gene were forst screened colony hybridization by using PUYBT 9044 probe ontained B. thuringiensis kurskaki HD 1 toxin gene. Cloned-DNA was digested with EcoR1 and HindIII and transformed to pIBI30 sequencing vector. Finally, 2.6kb and 3.6kb size fragments contatined toxin-gene were cloned with restriction analysis.
Porphyromonas endodontalis and Prevotella intermedia are black-pigmented anaerobic gram negative rods which have been isolated from infected root canals and submucous abscesses of endodontic origin. And they are associated with clinical symptoms such as pain, percussion, and foul odor. It has been reported that there are 3 serotypes according to capsule membrane in P. endodontalis and 2 DNA homology groups and 3 serotypes in P. intermedia, but there is no data available regarding genetic diversity for the species P. endodontalis and P. intermedia. The purpose of this study is to investigate genetic diversities between individual strains of P. endodontalis and P. intermedia which are indistinguishable by serotyping and biotyping using bacterial DNA restriction endonuclease analysis. 45 teeth with at least one clinical symptoms, with single canal, and with pulp necrosis were sampled. For sampling bacteria, access cavity was prepared after disinfecting tooth and its surroundings. Then the paper point was inserted to the apex of the canal, leave there for 15 seconds, and finally it was placed into PRAS Ringer's solution and PBS solution. P. endodontalis and P. intermedia were identified by biochemical test and IIF after subculturing black and brown colonies which were produced after 7 days of incubation on BAP in anaerobic chamber. P. endodontalis and P. intermedia strains were grown in BHI broth and whole genomic DNA was extracted by phenol-chloroform extraction technique and digested by restriction endonuclease, Eco RI and Pst I. The resulting DNA fragments were separated by agarose gel electrophoresis, stained with EtBr and photographed under UV light. The results were as follows : 1. In both P. endodontalis and P. intermedia, different serotypes could be found within a root canal of same patient. 2. There were obvious genetic heterogeneity within a patient and within a serotype in both P. endodontalis and P. intermedia. 3. P. endodontalis serotype c, isolated from different patients, exhibited limited genotypic diversity.
Journal of the Korean Institute of Illuminating and Electrical Installation Engineers
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v.16
no.2
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pp.45-53
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2002
This paper presents an algorithm for the appropriate parameter selection of a power system stabilizer and power converters in two-area power systems with a series HVDC links. The method for PSS is one of the classical techniques by allocating properly poly-zero positions to fit as closely as desired the ideal phase lead and by changing the gain to produce a necessary damping torque. Proper parameter of power converters are obtained in order to have sufficient speed and stability margin to cope with changing reference values and disturbances based on the Root-locus technique. The small signal and transient stability studies using the PSS and power converters parameters obtained from these methods show that a natural oscillation frequency of the study case system is adequately damped. The simulation used in the paper was performed by the Power System Toolbox software program based on MATLAB.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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