Lee, Min Suk;Chung, You Chul;Moon, Seung-Hyun;Hyun, Chang-Gu
Journal of Applied Biological Chemistry
/
제64권4호
/
pp.323-331
/
2021
Lincomycin is a lincosamide antibiotic isolated from the actinomycete Streptomyces lincolnensis. Moreover, it has been found to be effective against infections caused by Staphylococcus, Streptococcus, and Bacteroides fragillis. To identify the melanin-inducing properties of lincomycin, we used B16F10 melanoma cells in this study. The melanin content and intracellular tyrosinase activity in the cells were increased by lincomycin, without any cytotoxicity. Western blot analysis indicated that the protein expressions of tyrosinase, tyrosinase related protein 1 (TRP1) and TRP2 increased after lincomycin treatment. In addition, lincomycin enhanced the expression of master transcription regulator of melanogenesis, a microphthalmia-associated transcription factor (MITF). Lincomycin also increased the phosphorylation of p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) and decreased the AKT phosphorylation. Moreover, the activation of tyrosinase activity by lincomycin was inhibited by the treatment with SB203580, which is p38 inhibitor. Furthermore, we also found that lincomycin-induced tyrosinase expression was reduced by H-89, a specific protein kinase A (PKA) inhibitor. These results indicate that lincomycin stimulate melanogenesis via MITF activation via p38 MAPK, AKT, and PKA signal pathways. Thus, lincomycin can potentially be used for treatment of hypopigmentation disorders.
${\beta}-catenin$과 결합하는 ErbB2의 부위를 조사하기 위하여 proteasome에 의하여 분해되지 않는 ${\beta}-catenin$과 다양한 ErbB2 construct를 COS7 세포에 transfection한 후 ErbB2 단백질을 그것의 항체로 가라앉혔다. 이 때 공침한 ${\beta}-catenin$을 Western blot으로 분석하였다. C 말단에서부터 잘려진 ErbB2 단백질 중에 kinase 영역을 가지고 있는 것들만 ${\beta}-catenin$과 공침하였다. kinase 영역의 필요성을 확인하기 위하여 kinase 영역이 내부에서 제거된 ErbB2 construct를 ${\beta}-catenin$과 transfection 한 후 동일한 실험을 실시하였다. 이 실험에서 ${\beta}-catenin$는 kinase 영역이 내부적으로 제거된 ErbB2 단백질과 공침하지 않았다. 이 결과는 ${\beta}-catenin$과 결합하는 ErbB2의 위치는 kinase 영역내에 있음을 제시한다.
Kim, Hyun-Il;So, Eui-Young;Yoon, Suk-Ran;Han, Mi-Young;Lee, Choong-Eun
BMB Reports
/
제31권1호
/
pp.83-88
/
1998
Recently a B cell surface molecule, CD40, has emerged as a receptor mediating a co-stimulatory signal for B cell proliferation and differentiation. To investigate the mechanism of synergy between interleukin-4 (IL-4) and CD40 ligation in B cell activation, we have examined the effect of CE40 cross-linking on the IL-4 receptor expression in human B cells using anti-CE40 antibody. We observed that IL-4 and anti-CD40 both induce IL-4 receptor gene expression with a rapid kinetics resulting in a noticeable accumulation of IL-4 receptor mRNA within 4 h. While IL-4 caused a dose-dependent induction of surface IL-4 receptor expression, the inclusion of anti-CD40 in the IL-4-treated culture, further up-regulated the IL-4-induced IL-4 receptor expression as analyzed by flow cytometry. Pretreatment of B cells with inhibitors of protein tyrosine kinase (PTK) resulted in a significant inhibition of both the IL-4- and anti-CD40-induced IL-4 receptor mRNA levels, while protein kinase C (PKC) inhibitors had no effects. These results suggest that IL-4 and CD40 ligation generate B cell signals, which via PTK-dependent pathways, lead to the synergistic induction of IL-4 receptor gene expression. The rapid induction of IL-4 receptor gene expression through the tyrosine kinase-mediated signal transduction by B cell activating stimuli, would provide cells capacity for an efficient response to IL-4 in the early phase of IL-4 action, and may in part constitute the molecular basis of the reported anti-CD40 co-stimulatory effect on the IL-4-induced response.
Using murine immortalized microglial cells (BV-2), we examined the regulation of RANTES production stimulated by lipopolysaccharide (LPS), focusing on the role of mitogen-activated protein kinase (MAPK) and nuclear factor $(NF)-{\kappa}B.$ The result showed that RANTES (regulated upon activation of normal T cell expressed and secreted) was induced at the mRNA and protein levels in a dose- and time-dependent manner in response to LPS. From investigations of second messenger pathways involved in regulating the secretion of RANTES, we found that LPS induced phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase (Erk), p38 MAPK and c-Jun-N-terminal kinase (JNK), and activated $(NF)-{\kappa}B.$ To determine whether this MAPK phosphorylation is involved in LPS-stimulated RANTES production, we used specific inhibitors for p38 MAPK and Erk, SB 203580 and PD 98059, respectively. LPS-induced RANTES production was reduced approximately 80% at $25\;{\mu}M$ of SB 203580 treatment. But PD 98059 did not affect RANTES production. Pyrrolidine-dithiocarbamate (PDTC), $(NF)-{\kappa}B$ inhibitor, reduced RANTES secretion. These results suggest that LPS-induced RANTES production in microglial cells (BV-2) is mainly mediated by the coordination of p38 MAPK and $(NF)-{\kappa}B$ cascade.
Salvianolic acid B (SAB) is an active phytocomponent of a popular Chinese herb called Radix Salvia militiorrhiza with numerous biological properties. The anti-psoriasis activity of SAB was examined by evaluating various psoriasis inflammatory and keratin markers against imiquimod (IMQ)-induced psoriasis on BALB/c mice. Totally 50 healthy BALB/c mice were evenly divided into 5 groups including control, drug control (SAB; 40 mg/kg), IMQ-induced psoriasis (5%), IMQ exposure and treated with SAB (40 mg/kg), or standard methotrexate (MTX; 1 mg/kg). Mice supplemented with either SAB or MTX significantly lowered the values of psoriasis area severity index (PASI), erythema, scaling, skin thickness, inflammatory markers (interleukin [IL]-22/23/17A/1β/6) and lipid peroxidation product (malondialdehyde). Also, IMQ exposed BALB/c mice treated with SAB or MTX display lesser histopathological changes with enhanced antioxidant activities (catalase, superoxide dismutase). Moreover, the protein expression of keratin markers (K16 and K17) and phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K)/protein kinase B (Akt) signaling proteins (pAkt/Akt and pPI3K/PI3K) were significantly downregulated after administration with SAB and MTX as compared with IMQ induced mice. Taking together, SAB and MTX significantly ameliorate psoriatic changes by inhibiting psoriatic inflammatory and keratin markers through abolishing PI3K/Akt signaling pathway. However, further studies (clinical trials) are needed to confirm the anti-psoriatic property of SAB before recommending to psoriasis patients.
Piao, Mei Jing;Kim, Ki Cheon;Kang, Kyoung Ah;Fernando, Pincha Devage Sameera Madushan;Herath, Herath Mudiyanselage Udari Lakmini;Hyun, Jin Won
Biomolecules & Therapeutics
/
제29권1호
/
pp.90-97
/
2021
Ultraviolet B (UVB) radiation causes DNA base modifications. One of these changes leads to the generation of 8-oxoguanine (8-oxoG) due to oxidative stress. In human skin, this modification may induce sunburn, inflammation, and aging and may ultimately result in cancer. We investigated whether phloroglucinol (1,3,5-trihydroxybenzene), by enhancing the expression and activity of 8-oxoG DNA glycosylase 1 (Ogg1), had an effect on the capacity of UVB-exposed human HaCaT keratinocytes to repair oxidative DNA damage. Here, the effects of phloroglucinol were investigated using a luciferase activity assay, reverse transcription-polymerase chain reactions, western blot analysis, and a chromatin immunoprecipitation assay. Phloroglucinol restored Ogg1 activity and decreased the formation of 8-oxoG in UVB-exposed cells. Moreover, phloroglucinol increased Ogg1 transcription and protein expression, counteracting the UVB-induced reduction in Ogg1 levels. Phloroglucinol also enhanced the nuclear translocation of nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) as well as Nrf2 binding to an antioxidant response element located in the Ogg1 gene promoter. UVB exposure inhibited the phosphorylation of protein kinase B (PKB or Akt) and extracellular signal-regulated kinase (Erk), two major enzymes involved in cell protection against oxidative stress, regulating the activity of Nrf2. Akt and Erk phosphorylation was restored by phloroglucinol in the UVB-exposed keratinocytes. These results indicated that phloroglucinol attenuated UVB-induced 8-oxoG formation in keratinocytes via an Akt/Erk-dependent, Nrf2/Ogg1-mediated signaling pathway.
Periodontal disease is an inflammatory disease that affects the destruction of the bone supporting the tooth and connective tissues surrounding it. Periodontal ligament fibroblasts (PDLFs) induce overexpression of matrix metalloproteinase (MMP) involved in periodontal disease's inflammatory destruction. Osteoclasts take part in physiological bone remodeling, but they are also involved in bone destruction in many kinds of bone diseases, including osteoporosis and periodontal disease. This study examined the effect of baicalin on proteolytic enzymes' production and secretion of inflammatory cytokines in PDLFs and RAW 264.7 cells under the lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory conditions. Baicalin inhibited the expression of the protein, MMP-1 and MMP-2, without affecting PDLFs' cell viability, suggesting its possibility because of the inhibition of phosphorylation activation of mitogen-activated protein kinase's p38, and the signal transduction process of nuclear factor κB (NFκB)-related protein. Also, baicalin reduced the expression of MMP-8 and MMP-9 in RAW 264.7 cells. This reduction is thought to be due to the inhibition of the signal transduction process of NFκB-related proteins affected by inhibiting p65RelA phosphorylation. Also, baicalin inhibited the secretion of nitric oxide and interleukin-6 induced by LPS in RAW 264.7 cells. These results suggest that baicalin inhibits connective tissue destruction in periodontal disease. The inhibition of periodontal tissue destruction may be a therapeutic strategy for treating inflammatory periodontal-diseased patients.
Intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), which is induced by tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, contributes to the entry of immune cells into the site of inflammation in the skin. Here, we show that protein tyrosine phosphatase non-receptor type 21 (PTPN21) negatively regulates ICAM-1 expression in human keratinocytes. PTPN21 expression was transiently induced after stimulation with TNF-${\alpha}$. When overexpressed, PTPN21 inhibited the expression of ICAM-1 in HaCaT cells but PTPN21 C1108S, a phosphatase activity-inactive mutant, failed to inhibit ICAM-1 expression. Nuclear factor-${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$), a key transcription factor of ICAM-1 gene expression, was inhibited by PTPN21, but not by PTPN21 C1108S. PTPN21 directly dephosphorylated phospho-inhibitor of ${\kappa}B$ ($I{\kappa}B$)-kinase ${\beta}$ ($IKK{\beta}$) at Ser177/181. This dephosphorylation led to the stabilization of $I{\kappa}B{\alpha}$ and inhibition of NF-${\kappa}B$ activity. Taken together, our results suggest that PTPN21 could be a valuable molecular target for regulation of inflammation in the skin by dephosphorylating p-$IKK{\beta}$ and inhibiting NF-${\kappa}B$ signaling.
Background: Ginsenoside Rg3 (G-Rg3) is the major bioactive ingredient of Panax ginseng and has many pharmacological effects, including antiadipogenic, antiviral, and anticancer effects. However, the effect of G-Rg3 on mast cell-mediated allergic inflammation has not been investigated. Method: The antiallergic effects of G-Rg3 on allergic inflammation were evaluated using the human and rat mast cell lines HMC-1 and RBL-2H3. Antiallergic effects of G-Rg3 were detected by measuring cyclic adenosine monophosphate (cAMP), detecting calcium influx, and using real-time reverse transcription polymerase chain reaction, enzyme-linked immunosorbent assay, Western blotting, and in vivo experiments. Results: G-Rg3 decreased histamine release from activated mast cells by enhancing cAMP levels and calcium influx. Proinflammatory cytokine production was suppressed by G-Rg3 treatment via regulation of the mitogen-activated protein kinases/nuclear factor-kappa B and receptor-interacting protein kinase 2 (RIP2)/caspase-1 signaling pathway in mast cells. Moreover, G-Rg3 protected mice against the IgE-mediated passive cutaneous anaphylaxis reaction and compound 48/80-induced anaphylactic shock. Conclusion: G-Rg3 may serve as an alternative therapeutic agent for improving allergic inflammatory disorders.
In macrophages, lipopolysaccharide (LPS) alone or in combination with $interferon-{\gamma}\;(IFN-{\gamma})$ has been shown to release a nitric oxide (NO) through the increase of the transcription of the inducible nitric oxide synthase (iNOS) gene. To investigate the exact intracellular signaling pathway of the regulation of iNOS gene transcription by LPS plus $IFN-{\gamma},$ the effects of protein tyrosine kinase (PTK) inhibitor and protein kinase C (PKC) inhibitors on NO production, iNOS mRNA expression, nuclear $factor-_{\kappa}B\;(NF-_{\kappa}B)$ binding activity and the promoter activity of iNOS gene containing two $NF-_{\kappa}B$ sites have been examined in a mouse macrophage RAW 264.7 cells. LPS or $IFN-{\gamma}$ stimulated NO production, and their effect was enhanced synergistically by mixture of LPS and $IFN-{\gamma}.$ The PTK inhibitor such as tyrphostin reduced LPS plus $IFN-{\gamma}-induced$ NO production, iNOS mRNA expression and $NF-_{\kappa}B$ binding activity. In contrast, PKC inhibitors such as H-7, Ro-318220 and staurosporine did not show any effect on them. In addition, transfection of RAW 264.7 cells with iNOS promoter linked to a CAT reporter gene revealed that tyrphostin inhibited the iNOS promoter activity through the $NF-_{\kappa}B$ binding site, whereas PKC inhibitors did not. Taken together, these suggest that PTK, but not PKC pathway, is involved in the regulation of the iNOS gene transcription through the $NF-_{\kappa}B$ sites of iNOS promoter in RAW 264.7 macrophages by LPS plus $IFN-{\gamma}$.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.