이 연구의 목적은 국산 녹차(Camellia sinensis L.)에서 추출한 차폴리페놀(tea polyphenols, TPP)에 노출된 Salmonella typhimurium의 여러 가지 세포반응을 조사하는 것이다. TPP는 S. typhimurium에 대하여 투여량에 비례한 살균효과를 보여주었다. TPP로 처리된 S. typhimurium 배양에서 세포막을 구성하는 포화 및 불포화 지방산은 조성에서 상당한 변화가 일어난 것으로 분석되었으며, 주사전자현미경 분석에서 아치사 농도의 TPP로 처리된 세포는 세포표면에 구멍이 나고, 속이 움푹 패인 불규칙한 모양으로 관찰되었다. TPP에 노출된 S. typhimurium 배양의 수용성 단백질 부분에 대한 이차원 폴리아크릴아미드 젤 전기영동에서 16개의 단백질이 TPP 노출에 의해 증가하는 것이 확인되었다. 항산화 및 chaperons, 전사 및 결합단백질, 에너지 및 DNA 대사 등에 수반되는 단백질을 포함하는 이들 유도된 단백질은 MALDI-TOF를 사용한 peptide mass fingerprinting에 의해 동정되었다. 이들 결과는 S. typhimurium에 대한 TPP 유도스트레스와 세포독성의 기작을 이해하는데 중요한 단서를 제공할 수 있다.
The effect of an ethanolic extract of the plant Trianthema portulacastrum L. on the $CCI_4$-induced chronic hepatocellular damage of Swiss albino mice has been investigated. The normal mice received olive oil (0.2 ml/mouse) for five weeks. The $CCI_4$ control mice, on the other hand, received $CCI_4$ (0.05 ml/mouse) in olive oil for five weeks. The extract was administered at the dose of 100 mg/kg or 150 mg/kg for five weeks by gastric intubation in addition to $CCI_4$ treatment. The $CCI_4$ administraction alone caused hepatocellular necrosis, severe anemia, leucopaenia, lymphocytopaenia, neutrophilia, eosinophilia and haemoglobinaemia along with the alterations of plasma albumin and globulin. The administration of plant extract (at 100 or 150 mg/kg) restored the $CCI_4$-induced alterations of the haematological parameters to the normal level. The extract of T. portulacastrum elicited a marked protection against $CCI_4$-induced hepatotoxicity as indicated by the several haematological parameters, related indices of formed elements, and different fractions of plasma protein. We also observed the dose-dependent antihepatotoxic effect of the extraction on these mice. The 150 mg/kg of extract was found to be more effective in normalizing the toxic effects of $CCI_4$ on the above parameters of mice. These results suggest that the hepatoprotective effect of T. poltulacastrum could be caused by its critical involvement in modulating several factors associated with erythropoiesis, and the boosting of general immunity of the host.
한국산 담자균류인 갓버섯 Lepiota procera의 균사를 액내 배양하여 항암성분인 단백성 다당체를 분리하였다. 이 성분은 DEAE-Sephadex A-50 이온교환수지와 Sepharose-4B gel Filtration을 이용하여 정제하여 Fraction C1을 얻었으며 이 Fr, Cr은 단백질과 다당체로 구성되어 있으며 항암 효과는 10mg/kg/day 투여군에서 64%의 저지유을 나타내었다. 이러한 항암작용의 기전을 밝히기 위한 연구의 일환으로 면역에 미치는 영향을 실험함 결과 이 단백다당체는 용혈반형성 세포수를 증가시켰으며, 저하된 지연성 과민반응을 회복시켰을 뿐만 아니라, carrageenan 투여에 의해 억제된 면역능을 다시 증강시켰음을 알 수 있었다. 이러한 결과들은 이 버섯의 항암작용이 세포독성에 의한 것이 아니라 종양에 대한 면역능을 강화시켜 발휘됨을 제시하고 있다.
Soybean contains a high concentration of carbohydrates that consist mainly of non-starch polysaccharides (NSP) and oligosaccharides. The NSP can be divided into insoluble NSP (mainly cellulose) and soluble NSP (composed mainly of pectic polymers, which are partially soluble in water). Monogastric animals do not have the enzymes to hydrolyze these carbohydrates, and thus their digestion occurs by means of bacterial fermentation. The fermentation of soybean carbohydrates produces short chain fatty acids that can be used as an energy source by animals. The utilization efficiency of the carbohydrates is related to the chemical structure, the level of inclusion in the diet, species and age of the animal. In poultry, soluble NSP can increase digesta viscosity, reduce the digestibility of nutrients and depress growth performance. In growing pigs, these effects, in particular the effect on gut viscosity, are often not so obvious. However, in weaning piglets, it is reported that soy oligosaccharides and soluble NSP can cause detrimental effects on intestinal health. In monogastrics, consideration must be given to the anti-nutritive effect of the NSP on nutrient digestion and absorption on one hand, as well as the potential benefits or detriments of intestinal fermentation products to the host. This mirrors the needs for i) increasing efficiency of utilization of fibrous materials in monogastrics, and ii) the maintenance and improvement of animal health in antibiotic-free production systems, on the other hand. For example, ethanol/water extraction removes the low molecular weight carbohydrate fractions, such as the oligosaccharides and part of the soluble pectins, leaving behind the insoluble fraction of the NSP, which is devoid of anti-nutritive activities. The resultant product is a high quality soy protein concentrate. This paper presents the composition and chemical structures of carbohydrates present in soybeans and discusses their nutritive and anti-nutritive effects on digestion and absorption of nutrients in pigs and poultry.
Mazzei, R.;Giomo, L.;Spadafora, A.;Mazzuca, S.;Drioli, E.
Korean Membrane Journal
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제8권1호
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pp.58-66
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2006
The ${\beta}-glucosidase$ from olive fruit is of particular interest compared to the ones from other sources because it has shown to have high specifity to convert the oleuropein into dialdehydes, which have antibacterial activity and are of high interest for their application in the food and pharmaceutical fields. The enzyme is not yet commercially available and advanced clean and safe technologies for its purification able to maintain the functional stability are foreseen. The purification of this protein from fruit extracts has been already tempted by electrophoresis but either enzyme deactivation or high background with unclear profiles occurred. In this work, fruit extracts obtained from the ripening stage that showed the highest enzyme activity have been processed by diafiltration and ultrafiltration. Asymmetric membranes made of polyamide or polysulphone having 50 and 30 kDa molecular weight cut-off, respectively, were tested for the diafiltration process. Ultrafiltration membranes made of polyethersulfone with 4 kDa molecular weight cut-off were used to concentrate the dia-filtered permeate solutions. The efficiency of the separation processes was evaluated byenzyme activity tests using the hydrolysis of p-D-nitrophenyl-${\beta}$-D-glucopyranoside (pNPGlc) as reaction model. Qualitative and quantitative electrophoresis were applied to analyze the composition of protein solution before and after the membrane separation; in addition dot blot and western blot analyses were applied to verify the presence of ${\beta}-glucosidase$ in the processed fractions. The overall results showed that the ${\beta}-glucosidase$ functional stability was preserved during the membrane operations and the removal of 20 kDa proteins allowed to increase the specific activity of the enzyme of about 52% compared to the one present in the initial fruit extract.
Kim, Jeong-Hee;Hyun, Soo-Jin;Yoon, Moon-Young;Jioon, Young-Hoon;Cho, Chul-Koo;Yoo, Seong-Yul
Archives of Pharmacal Research
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제20권3호
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pp.212-217
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1997
Induction of an adaptive response to ionizing radiation in mouse lymphoma (EL4) cells was studied by using cell survival fraction and apoptotic nucleosomal DNA fragmentation as biological end points. Cells in early log phase were pre-exposed to low dose of ${\gamma}$-rays (0.01 Gy) 4 or 20 hrs prior to high dose ${\gamma}$-ray (4, 8 and 12 Gy for cell survival fraction analysis; 8 Gy for DNA fragmentation analysis) irradiation. Then cell survival fractions and the extent of DNA fragmentation were measured. Significant adaptive response, increase in cell survival fraction and decrease in the extent of DNA fragmentation were induced when low and high dose .gamma.-ray irradiation time interval was 4 hr. Addition of protein or RNA synthesis inhibitor, cycloheximide or 5,6-dichloro-1-.betha.-d-ribofuranosylbenzimidazole (DRFB), respectively during adaptation period, the period from low dose ${\gamma}$-ray irradiation to high dose ${\gamma}$-ray irradiation, was able to inhibit the induction of adaptive response, which is the reduction of the extent DNA fragmentation in irradiated EL4 cells. These data suggest that the induction of adaptive response to ionizing radiation in EL4 cells required both protein and RNA synthesis.
Objectives : RVC has long been used for a useful natural agent ameliorating inflammation related symptoms in the folk medicine recipe. This study was performed to investigate effects of RVC on the inflammation and oxidation in RAW 264.7 cells. Methods : The RVC was extracted with 80% ethanol and sequentially partitioned with solvents in order to increase polarity. With the various fractions, we determined the activities on the inflammation and oxidation in RAW 264.7 cells. Results : 1. Among the various solvent extracts of RVC, the butanol fraction showed the most powerful inhibitory ability against nitric oxide (NO) production in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW 264.7 cells without affecting cell viability. 2. Butanol fraction showed a oxidation inhibition effect by decreasing the DPPH and OH radicals. 3. Butanol fraction exhibited the inhibitory avilities against iNOS and COX-2. 4. Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and Westem blotting analysis revealed that the BuOH fraction provided a primary inhibitor of the iNOS protein and mRNA expression in LPS-induced RAW 264.7 cells. Among the up-regulater molecules of iNOS and COX-2, the BuOh fraction of RVC was shown the inhibitory activity of phoshporylation of c-Jun N-terminal kinase (JNK) 1/2 and threonine protein kinase (AKT), the one of the MAPKs pathway. Conclusion : Thus, the present study suggests that the response of a component of the BuOH fraction to NO generation via iNOS expression provide a important clue to elucidate anti-inflammatory and anti-oxidation mechanism of RVC.
Trichoderma species/isolates exhibited varied degree of agglutination on sclerotial (Sc) and hyphal (Hy) surface of Macrophomina phaseolina. The agglutination efficiencies on Sc and Hy ranged from $11\;to\;57\%$. Isolates of T. harzianum (Th) and T. viride (Tv) showed greater agglutination on Sc ($23-57\%$) and Hy ($16-47\%$). Different enzymes (trypsin, pepsin, proteinase k, a-chymotrypsin, lyticase and glucosidase) and inhibitors (tunicamycin, cycloheximide, brefeldin A, sodium azide, dithiothreitol and SDS) reduced the agglutination potential of conidia of Th-23/98 and Tv-25/98; however, the extent of response varied greatly in different treatments. Different fractions of Th-23/98 and Tv-25/98 exhibited haemagglutinating reaction with human blood group A, B, AB and O. Haemagglutinating activity was inhibited by different sugars and glycoproteins tested. Crude haemagglutinating protein from outer cell wall protein fraction of Th-23/98 and Tv-25/98 were eluted on Sephadex G-100 column. Initially Th-23/98 and Tv-25/98 exhibited two peaks showing no agglutination activity; however, lectin activity was detected in the third peak. Similar to crude lectin, the purified lectin also exhibited haemagglutinating activity with different erythrocyte source. SDS-PAGE analysis of partially purified lectin revealed single band with an estimated molecular mass of 55 and 52 kDa in Th-23/98 and Tv-25/98, respectively. Trypsin, chymotrypsin and b-1,3-glucanase totally inhibited lectin activity. Similarly, various pH also affected the haemagglutinating activity of Th-23/98 and Tv-25/98. From the present observations, it can be concluded that the recognition/attachment of mycoparasite (T. harzianum and T. viride) to the host surface (M. phaseolina) may be most likely due to lectin-carbohydrate interaction.
홍삼에서 분리한 수용성 갈변물질의 항산화 활성을 DPPH 수소공여능 및 미토콘드리아 분획을 이용한 지질과산화, 산소 소모율 및 단백질 산화율을 조사한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. DPPH 수소공여능을 조사한 결과 수용성 갈변물질 S-1, S-2 분획은 반응시간이 경과함에 따라 완만하게 DPPH가 감소하였고, L 분획은 S-1, S-2 분획보다 시간이 경과함에 따라 감소폭이 증가하였다. 미토콘드리아 분획을 이용한 지질과산화 및 산소 소모율의 변화에서 첨가 농도가 높을수록 억제율이 높았으며, 특히, L분획이 S-1 및 S-2 분획보다 높은 활성을 보였다. 또한 수용성 갈변물질을 농도별로 각각 첨가했을시 단백질 산화에서 L분획에서 반응초기에 약간 급속히 진행되는 것으로 보이나, S-1과 S-2 분획에서는 비교적 농도 의존적으로 나타났으며, S-2 분획은 S-1 및 L 분획보다 억제율이 현저히 낮았다.
Kim, Da Young;Yoo, Jung Sik;Cho, Yoon Ah;Yoon, Ho Sik;Kim, Cheol-Hyun
한국축산식품학회지
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제41권4호
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pp.687-700
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2021
This study performed to evaluate the applicability of functional dairy food materials by comparing the calcium solubilization ability and anti-inflammatory effects of hydrolyzed casein protein. Commercial enzyme (Alcalase®; Neutrase®; Protamex®; Flavourzyme®) was added to the 10% casein solution to prepare the casein hydrolysates. Samples obtained every hour [1:200 (w/v)]. According to results of measuring the degree of hydrolysis (DH), all of four enzymatic hydrolysates increased rapidly from 30 to 40 min, and after 150 min, there were no change. Protamex® and Neutrase® had the highest DH compared to others enzymatic hydrolysates. After that, peptides obtained throughout a preparative liquid chromatography system. In the calcium solubility experiments, neutrase fraction (NF) 4 and NF7 showed similar activities with casein phosphopeptide (CPP). In vitro cell experiments showed that no cytotoxicity except for NF6. Also, the production of nitric oxide (NO) inhibited as the concentration of fraction samples increased. The cytokine (IL-1α, IL-6, and TNF-α) production was lower than lipopolysaccharide (+) group significantly. Therefore, the possibility of anti-inflammatory activity found in the hydrolyzed samples. According to the above experiments, NF3 and Protamex Fraction (PF) 3 selected. Amino acids selected throughout an AccQ-Tag system. As a result, 17 species of amino acids and several species of unknown amino acids identified. Both fractions had the highest content of phenylalanine. This study identified the potential of biologically active and functional peptides derived from casein that affect the food and dairy industry.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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