Changes and possible origin of haemolymph proteins during the cuticle formation and hardening are determined by means of acrylamide gel electrophoresis and immunodiffusion. The results by acrylamide gel electrophoresis showed at least 19 protein bands in the haemolymph and 13 fractions in the fat body with relatively constant pattern during the period of cuticle formation and hardening. Both haemolymph and fat body proteins are generally characterized by the presence of three to four heavy stained bands and several thin bands near the top region of the gel. At least over five haemolymph proteins are constantly present during this period. Immunodiffusion tests show that of total eight to nine pupal haemolymph proteins two proteins were already detected in the fat body before pupation and other two proteins were also found in the fat body immediately after pupation, suggesting fat body as possible source of these two haemolymph proteins.
SDS-polyacrylamide gel electrophoresis for the proteins obtained from the plasma, Scapharca subcrenata and suapharca broughtonii, and for the proteins of muscles of several species in Bivalvia was performed. The protein patterns of plasma showed little difference between S. subcrenata and S. broughtonii in lower molecular weight weight proteins. However, the protein patterns of muscles of other species, which wre used in this study, were more shown in the lower molecular weights than the higher molecular weights in difference. Thus it is thought be an interesting fact. The protein band of blood corpuscles, 17,800 dalton, was not appeared in S. broughtonii, but this band was appeared in S. subcrenata. Henceforth this is the significantly important difference in these two species. But the protein patterns obtained from muscles of the species did not show a difference in a range of molecular weights between 10,000 and 100,000 daltons. Meanwhile, several protein bands obtained from Meretrix lusoria were similar to those of Mercenaria stimpsona. Hence, in this study, 6 protein bands which exist all species in Bivalvia and 4 characteristic protein bands in S. subcrenata and S. broughtoniionly, were investigated. And in four species of Eulamellibranchia, two protein bands in comon and the characteristic band of 23,000 dalton which is belong to Meretrix lusoria and Mercenaria stimdsona, were found. The molecular weights of the characteristic protein patterns, which are contained in each species, were measured and compared.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.14
no.4
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pp.381-386
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1985
This experiment was conducted to investigate changes of soybean curd yield according to the extension of soaking time during manufacturing of soybean curd. To investigate those changes systematically, transmission electron microscopy and disc-gel electrophoresis were used. The soybean curd yield was increased from 45.0% to 50.5% and 55.4% respectively as soaking time is extended from 5 hours to 10 and 24 hours. The solid extraction and soybean milk coagulation were also increased according to the extension of soaking time. From disc-gel electrophoresis patterns of soybean milk protein and soybean curd protein, numbers of band were increased and major band thickened by expending the soaking time. Most of high molecular bands of soybean milk protein were transfered to soybean curd. Crude 7S proteins of soybean milk and soybean curd in dis-gel electrophoresis were appeared to be 4 and 5 bands respectively, and crude 11S proteins of soybean milk and soybean curd were appeared to be 9 and 8 bands respectively. Of soybean milk bands, most of 11S component transfered to soybean curd. Transmission electron photomicrographs revealed that the dimension of each protein body became larger and the numbers of spherosome around the protein bodies in unit area fewer by extending the soaking time of soybean.
Protein spectra from 6 species of Gossypium were obtained by disc electraphoresis of seed extracts. Protein extracts were made by soaking 0.5g. of seed in 15ml of Tris-glycine buffer for 24 hours. Gels 24 hours. Gels were stained in 0.5% Amido Black solution for 1 hour, and destained in 7% acetic acid for 72 hours. Nine to 15 bands were visible in each gel. Homologies of Protein bands among the species were determined by migration velocity. Evidences obtained from electrophoretic separation of seed Protein were consistent with those from genetic, cytological, morphological and Phenogenetic methods regarding the origin of New World cultivated cottons. Possibility, however, does not exist to exclude Gossypium herbaceum from one of the Progenitors of New World cultivated cottons from electrophoretic evidences alone.
During the germination of mungbean seeds, the changes of water contents, total and soluble proteins, and electrophoretic pattern of the soluble proteins were examined. The moisture content of a dry mungbean was 12.7%, which was greatly increased after the soaking. Along to the germination period, the moisture contentof the mungbean sprouts was gradually increased up to 90.7%. The contents of total and soluble proteins were sharply decreased after the soaking of the mungbean and decreased gradually during the germination. PAGE of the soluble proteins showed two broad bands and three sharp bands. During the germination, two broad bands were weadened but other bands were relatively stable. SDS-PAGE showed 19 discrete bands and during the germination, the most of the bands were thinned or disappeared. But some of the protein bands were stable until the end of germination.
Korean ginseng was purified to obtain radioprotective protein fractions by buffer extraction, ammonium sulfate fractionation, CM-cellulose column chromatography, heat inactivation and Sephadex G-75 column chromatography. The final three fractions, GI, GII and GIII were subjected to Disc-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and SDS-PAGE. The molecular weights(M.W.) of native and denatured proteins were estimated by using regression line equations obtained from the mobilities of standard proteins. As the results, in Disc-PAGE, the GI fraction showed two protein bands with M.W. of above 213, 000 and 55, 000, GII showed one band with M.W. of 44, 000 and GIII, also one band with M.W. of 19, 000. In SDS-PAGE, GI fraction gave four subunit bands with M.W. of above 114, 000, 27, 000, 24, 000 and 19, 000, GII gave two bands with M.W. of 46, 000 and 22, 000, and GIII, one band of 19, 000.
Changes in haemolymph proteins, hydrolases such as esterase(EST), acid phosphatase(ACP) and alkaline phosphatase(ALP) , and inorganic ion(Na+, K+ and Cl- ) contents were induced by the injection of Bacillus thuringiengis into haemocoel of the last instar larva of Heliothis assulta. Protein concentration of haemolymph was increased until 24 hrs after injection, and decreased thereafter. Among the 8 basic protein bands identified through acid - polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE), 2 bands(bands a and b) became stronger by the bacterial infection. Activities of EST and ALP increased until 12 hrs after injection and then fell down, whereas ACP activity was decreased continuously with time after injection. Contents of inorganic ions were all increased by the bacterial injection, showing slow rate of increase in the chloride ion, but rapid in the sodium and potassium ions.
The purpose of this experiment was to study one side of germination physiology based on that protein profiles and protease relating to protein metabolism, that peroxidase, catalase, $\alpha$-amylase, $\beta$-amylase, and malate dehydrogenase involved in the carbohydrate metabolism of seed germination. All these experiments were divided into the two groups with and without acetone treatment, and were carried out. The protein bands of each germinating stage between the groups treated with and without acetone showed certain basic pattern in polyacrylamide gel disc electrophoresis. However, there was a little difference in the number of protein band, optical density, and migration velocity between two groups. The isozyme bands of peroxidase, and catalase between two groups in polyacrylamide gel disc electrophoresis did not show the numeral difference, but the optical density of certain germinating stage treated with acetone was higher than the group untreated with it and it showed their enzyme activity. The $\alpha$-amylase and $\beta$-amylase activities which involved in starch metabolism of seed germination were higher in the treated group than the other. On one hand, the protease activity of hydrolase occurred in the seeds for germination was also higher, more or less in the treated group than in the other. The isozyme band pattern of malate dehydrogenase in TCA cycle of energy metabolism pathway was very different between two groups growing for 72 hours with and without acetone treatment in cellulose acetate electrophoresis. It indicated that two isozyme bands of malate dehydrogenase was high. Consequently these experimental results mentioned above indicated that acetone treatment before sowing had an effect on dissolving certain complexed lipid substance involved in the seed coats, the activity of carbohydrate hydrolase increased with water absorption which was most comfortable in its germination, dissolved glycerin and fatty acid became certain energy source, and they stimulated the acceleration of respiration metabolism.
A clone pSL 2-1, which is a recombinant plasmid believed to contain the mosquitocidal crystal-line protein gene of the Bacillus sphaericus 1593, was expressed in Escherichia coli JM83 and the product of the clone was purified and identified. The unsolubilized mosquitocidal crystal proteins from the B. sphaericus had formed 43, 58, 64, 100, 113, and 130 Kd bands in the SDS-polyacrylamide gel, but the NaOH-solublized proteins at pH 12 formed 2 protein bands of 43- and 64Kd in the gel because the larger protein (precursor) bands were cleaved. The products of the pSL 2-1 clone was purified by Sephadex G-200 and only the fractions having lethal activity to the 3rd in-star larvae of mosquito Culex pipiens were analyzed by the gel. The only single protein band of 42 Kd toxic to the larvae was formed. The major toxic protein being produced from the B. sphaericus 1593 and the pSL 2-1 clone was found to be the 42 Kd.
Objective: Sarcoplasmic proteins include proteins that play critical roles in biological processes of living organisms. How seasons influence biological processes and meat quality of postmortem muscles through the regulation of protein phosphorylation remain to be investigated. In this study, the phosphorylation of sarcoplasmic proteins in pork longissimus muscle was investigated in four seasons. Methods: Sarcoplasmic proteins were extracted from 40 pork carcasses (10 for each season) and analyzed through ProQ Diamond staining for phosphorylation labeling and Sypro Ruby staining for total protein labeling. The pH of muscle, contents of glycogen and ATP were measured at 45 min, 3 h, and 9 h postmortem and the water (P2b, P21, and P22) was measured at 3 h and 9 h. Results: A total of 21 bands were detected. Band 8 (heat shock cognate 71 kDa protein; heat shock 70 kDa protein 1B) had higher phosphorylation level in summer than that in other seasons at 45 min postmortem. The phosphorylation levels of 3 Bands were significantly different between fast and normal pH decline groups (p<0.05). The phosphorylation levels of 4 bands showed negative associations with immobilized water (P21) and positive association with free water (P22). Conclusion: The phosphorylation levels of sarcoplasmic proteins involved in energy metabolism and heat stress response at early postmortem time differed depending on the seasons. These proteins include heat shock protein 70, pyruvate kinase, phosphoglucomutase-1, glucose-6-phosphate isomerase, and carbonic anhydrase 3. High temperatures in summer might result in the phosphorylation of those proteins, leading to pH decline and low water holding capacity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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