Objectives : This study was carried out to investigate the effects of Jeondo-San(JDS) on anti-Inflammation and anti-Propionibacterium acnes. Methods : The effects of JDS on anti-Inflammation and anti-Propionibacterium acnes were measured by the cytotoxicity of Raw 264.7 cell, the inhibition for NO, $TNF-{\alpha}$, $PGE_2$, iNOS and COX-2, the blocking $NF-{\kappa}B$ into nucleus and the sterilizing power for Propionibacterium acnes. Results : 1. All concentrations of JDS has no cytotoxicity in Raw 264.7 cell. 2. All concentrations of JDS inhibited the production of NO in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 3. All concentrations of JDS did not significantly inhibit the production of $TNF-{\alpha}$ in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 4. All concentrations of JDS inhibited the production of $PGE_2$ in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 5. All concentrations of JDS did not inhibit the expression of COX-2 but concentrations of 50\;{\mu}g/ml$, 100\;{\mu}g/ml$ JDS inhibited iNOS expression in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 6. Concentrations of 50\;{\mu}g/ml$, 100\;{\mu}g/ml$ JDS has the effect of blocking $NF-{\kappa}B$ into nucleus in LPS-induced macrophage Raw 264.7 cell. 7. All concentrations of IDS did not have the inhibitory effect of Propionibactrium acnes. Conclusions : The present date suggest that JDS has a effect on the stage of inflammation of acne.
본 연구는 뽕잎 추출물에 눈꽃 동충하초 균사체(Paecilomyces japonica) 배양액의 Propionibacterium acnes에 대한 생육 억제 활성을 조사한 것이다. 배양 배지내의 뽕잎 추출물 농도는 3%일 때 가장 높은 여드름 균 생육 억제 활성이 나타났으며, 3% 농도의 뽕잎 추출물을 이용한 균사체 배양날짜별 활성은 25일 배양시 가장 높은 여드름 균 생육 억제 활성을 확인 할 수 있었다. 또한 여드름 균에 생육 억제 활성을 가지는 물질은 동충하초 균사체의 2차 대사산물로 판단 할 수 있었다. 뽕잎 추출물에 동충하초 균사체 배양액의 처리농도별 여드름 활성은 처리 농도가 상승할수록 증가하였다. 그리고 5% 감자만을 넣고 배양하였을 경우 여드름 균의 활성이 나타나지 않았으며, 합성 배지인 PDB를 사용 시 뽕잎 추출물을 이용해 배양하였을 때보다 낮은 활성을 나타내었다. 또한 뽕잎 추출물에 동충하초 균사체 배양액의 여드름균 생육 억제 활성의 열 안정성을 확인하기 위한 열처리 결과, $100^{\circ}C$에서 45분 까지 열에 안정함을 확인 할 수 있었다. 이러한 결과로 볼 때 뽕잎 추출물에 동충하초 배양액의 여드름균 생육 억제 물질은 배당체 또는 peptide 인 것으로 판단된다. 따라서, 뽕잎 추출물을 이용한 동충하초 균사체 배양액은 여드름균 생육 억제 활성이 뛰어나며, 열에 안정한 천연 여드름 억제 화장품료 조성물로서의 이용가능성이 확인 하였다.
여드름은 만성 염증 질환으로 주로 청소년기에 발생하는 것으로 알려져 있으나 대기오염, 약물 남용 등의 원인에 의해 아동기 및 성인기에도 나타날 수 있다고 알려져 있다. 여드름을 유발하는 정확한 원인은 밝혀져 있지 않으나 한 가지 원인보다 스트레스, 호르몬의 변화, 유전, 외부 환경 등 다양한 요인들이 복합적으로 작용한다고 여겨지고 있다. Propionibacterium acnes (P. acnes)는 여드름을 유발하는 균으로 모낭 내에 상주하여 피지의 중성지방을 분해하고 유리 지방산을 형성하여 모낭 내 염증을 유발한다. 따라서 피지의 생성 증가는 P. acnes의 생존에 좋은 영향을 주고 피부에서 염증반응을 유발하는 monocytic cell의 활성화와 염증성 사이토카인(pro-inflammatory cytokine)의 증가를 유발한다. 따라서 여드름 치료를 위해서는 P. acnes의 증식 억제 및 염증반응을 최소화하는 것이 중요하다. 본 논문에서는 유칼립투스(Eucalyptus globules) 추출물이 P. acnes에 의한 염증반응에 나타내는 효과를 확인하고자 하였다. 유칼립투스 추출물 처리는 P. acnes가 유도하는 염증 매개자로 알려진 $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, IL-2와 인플라마좀 복합체인 NLRP3의 유전자 발현을 효과적으로 감소시키는 것을 확인하였다. 뿐만 아니라 염증성 사이토카인의 유전자 발현에 중요하다고 알려진 전사인자(transcription factors) $NF-{\kappa}B$와 NFAT의 활성 역시 유칼립투스 추출물을 처리하였을 때 감소하는 것을 알 수 있었다. 따라서 본 논문을 통해 유칼립투스 추출물이 P. acnes에 의해 초래되는 여드름의 치료 보조제로 사용될 수 있으며, 천연 추출물의 사용이 항생제 장기 복용으로 인해 유발되는 항생제 내성을 해결하는 좋은 대안이 될 것이라고 예상할 수 있다.
천연 식물 재료를 이용한 여드름 개선제 개발을 위해 솔잎, 오미자, 에탄올 추출물의 여드름 원인균으로 알려진 Propionibacterium acnes, Staphylococcus epidermidis와 Malasseizia furfur에 대한 증식억제 효과를 검토한 결과 여드름 원인균 3종류 모두에 항균력을 나타내었다. 오미자. 솔잎의 M. furfur에 대한 성장억제효과는 초기배양시 균의 억제효과가 뚜렷하게 나타났으며, 오미자의 경우 모든 농도에서 $10^1$CFU/mL 이하 또는 사멸하는 경향을 나타내었다. S. epidermidis에 대한 오미자, 솔잎이 높은 성장억제효과를 보였으며, 0.12% 이상일 때 강한 항균효과를 나타내었다. P. acnes의 성장은 솔잎, 오미자를 0.06% 이상 첨가한 경우 배양 1일째 모두 사멸하여 매우 높은 항균활성을 나타내었다. 솔잎, 오미자의 생육억제효과는 여드름 원인균 중 P. acnes가 가장 강하게 나타났고, M. furfur, S. epidermidis 순이었다. 각 천연물의 여드름 원인균에 대한 최소저해 농도를 측정한 결과, P. acnes의 MIC는 0.075 mg/mL로 가장 낮게 나타났고, M. furfur는 0.6-l.8 mg/mL, S. epidermidis에 대해 1.2%-l.8mg/mL으로 높게 나타났다.$ 80^{\circ}C$, $100^{\circ}C$에서 30분 동안, 121$^{\circ}C$ 15분 열처리한 오미자와 솔잎 추출물의 여드름 원인균에 대한 항균효과는 가열 온도가 증가함에 따라 다소 감소하였으나 추출물의 항균활성에는 뚜렷한 영향을 미치지 않았다.
The in vitro antibacterial activities of honeybee(Apis mellifera. L) venom collected by a bee venom collector were investigated against several bacteria including antibiotic-susceptible and resistant Propionibacterium acnes. Honeybee venom was prepared with different concentrations and they showed strong antibacterial activites. Honeybee venom inhibited the growth of the tested antibiotic-resistant P. acnes at the concentration of 1 mg/ml. The inhibitory activities of the honeybee venom showed time-dependent manner. Honeybee venom did not influence the viability of human dermal fibroblast at the high concentration of less than 10 mg/ml. From these results, we expect that honeybee venom has strong antibacterial activities and has advantage for treating cure.
Biotransformation is often used to improve chemical activity. We evaluated the antimicrobial activity of rhapontigeuin, converted from rhapontin after treatment with Pectinex. Rhapontigenin showed 4-16 times higher antimicrobial activity than rhapontin. The activity was higher against Gram-positive strains than Gram-negative strains. Minimum inhibitory concentrations (MICs) of rhapontigenin, retinol, and five antibiotics were determined by the microbroth dilution method for antibiotic-sensitive and -resistant Propionibacterium acnes. We also investigated the in vitro antibacterial activity of rhapontigenin in combination with antibiotic against antibiotic-resistant P. acnes. The antibiotic combination effect against resistant P. acnes was studied by the checkerboard method. The combination formulations (rhapontigenin and clindamycin, retinol and clindamycin) showed synergistic effects on the inhibition of the growth of clindamycin-resistant P. acnes. It is predictable that the combination of antibiotics with rhapontigenin is helpful to treat acne caused by antibiotic-resistant P. acnes. The antibacterial activity of rhapontigenin was enhanced by biotransformation.
Objective : This study was performed to evaluate the effect of Lithospermum erythrorhizon extracts on the inflammatory cytokines gene expression by the bacteria of Propionibacterium acnes (P. acnes) which elicits acne in human monocytes, THP-1 cell line. Experiment : Cytotoxicity of Lithospermum erythrorhizon extracts was analyzed by XTT assay. Real time RT-PCR was applied to analyze the cytokines gene expressions of IL-8, MCP-1 and TNF-$\alpha$. Translocation of transcription factor NF-${\kappa}B$ from cytoplasm into nucleus was observed using immunocytochemistry and confocal microscopy. Results : Lithospermum erythrorhizon extracts did not show cytotoxicity as high as in $1,000\;{\mu}g/ml$ of concentration. Transcription levels of inflammatory cytokines, IL-8, MCP-1 and TNF-$\alpha$ were increased by P. acnes in THP-1 and Lithospermum erythrorhizon extracts decreased the upregulated transcription levels. Lithospermum erythrorhizon extracts significantly inhibited the translocation of NF-${\kappa}B$ into nucleus by P. acnes. Conclusion : This study suggests that Lithospermum erythrorhizon extracts have anti-inflammatory effects on P. acnes treated THP-1 as decreasing the mRNA expressions of IL-8, MCP-1 and TNF-$\alpha$. This anti-inflammatory effect of Lithospermum erythrorhizon extracts may be useful in therapeutic treatments for acne vulgaris.
본 연구는 여드름을 유발하는 세균인 Propionibacterium acnes에 대해 다양한 토양에서 분리된 세균 균주들의 항균효과를 조사하기 위해 수행되었다. 수백 개의 분리 세균균주 중 Paenibacillus elgii DS381과 Paenibacillus elgii DS1515, Burkhoderia gladioli DS518, Streptomyces lienomycini DS620는 2가지 균주의 P. acnes에 대해 높은 항균활성을 나타내었다. 이 분리균주들은 agar well diffusion test에서 15.5~34.3 mm 직경의 저해대를 형성하였으며, 특히 DS620는 가장 큰 저해대 직경(28.3~34.3 mm)을 나타내었다. 분리 균주가 생성하는 항균 물질은 DS381과 DS1515 균주의 경우lipopeptide (pelgipeptin, paenipeptin), DS518은 protease, 그리고 DS620은 anthracycline 인 것으로 추정되며, 이들 모두 P. acnes에 대해매우낮은 최소저해농도를 나타내었다[DS381와 DS1515 (0.078 mg/ml), DS518 (0.312 mg/ml), DS620 (0.000078 mg/ml)]. P. acnes를 대상으로 한 time-kill assay에서는 네 균주의 항균물질이 모두 24시간 이내에 P. acnes를 완전히 사멸시켰다. 이 결과는 네 가지 항균활성 균주들이 분비하는 항균물질들이 여드름을 유발하는 P. acnes에 대하여 효율적인 치료 소재로 사용될 수 있는 가능성을 보여준다.
Objectives : This experimental study was performed to investigate the effects of Sulfur extract on anti-inflammation and anti-Propionibacterium acnes. Methods : The cytotoxicity of Sulfur extract about viability of Raw 264.7 cell were tested using a colorimetric tetrazolium assay(MTT assay). To investigate the anti-inflammation effects of Sulfur extract on LPS-induced macrophage Raw 264.7 cell, we used ELISA kit and Western blots. We evaluated anti-oxidation effects of Sulfur extract on HaCaT cell by Enzyme recycling method. And we investigated the inhibitory effects of Sulfur extract on Propionibactrium acnes using paper disk diffusion method. Results: 1. Sulfur extract has a little cytotoxicity in Raw 264.7 cell. 2. Concentration of $100\;{\mu}g/m{\ell}$ Sulfur extract inhibited the production of NO in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 3. Sulfur extract showed a oxidation inhibition effect by decreasing the DPPH radicals. 4. Sulfur extract has not the significant inhibition effect of Propionibactrium acnes. Conclusions: These results indicate that Sulfur extract has anti-inflammation and anti-oxidation effects. If further study is performed, the use of Sulfur extract will be valuable and benificial in the therapy of Propionibactrium acnes.
Propionibacterium acnes is the predominant organism in sebaceous regions of the skin and is thought to play an important role in the pathogenesis of inflamed lesions. Antibacterial compounds against P. acnes were isolated from the ethanol extract of Kaempferia pandurata Roxb. and identified as panduratin A and isopanduratin A. Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of panduratin A for P. acnes were 2 and $4{\mu}g/mL$, respectively, while those of isopanduratin A were 4 and $8{\mu}g/mL$, respectively. The time-dependent killing effect showed that panduratin A and isopanduratin A completely inhibited the growth of P. acnes at 4 and $8{\mu}g/mL$ in 48 hr, respectively. Panduratin A and isopanduratin A demonstrated high antibacterial activities not only against P. acnes but also other skin microorganisms. The results suggest that panduratin A and isopanduratin A could be employed as natural antibacterial agents to inhibit the growth of acne and skin disease causing microorganisms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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