The antimicrobial substance produced by Lactobacillus bulgaricus was inactivated by pretense, which confirmed it as a bacteriocin and referred to 'bulgaricin HJ'. The bulgaricin HJ showed the inhibitory activity against mastitis pathogens, gram-positive and gram-negative bacteria. The optimal conditions for the production of bulgaricin HJ were at the temperature of $30^{\circ}C$ and 10 h after cultivation of L. bulgaricus. Staph. and Strep. agalactiae, common bovine mastitis pathogens, were treated with bulgaricin HJ by the agar well diffusion method and showed antimirobial activities to the bovine mastitis pathogens. The activity of the bulgaricin HJ was maintained at pH 6-7 and $100^{\circ}C$ for 60 min against the mastitis pathogens. The bulgaricin HJ was determined as class IV bacteriocin by various enzyme treatments. Colony forming units analysis with indicator strains by the treatments of bulgaricin HJ indicates that the mode of bacteriocin action was bactericidal rather than bacteriostatic.
The strain OK-63 isolated from katsuobushi was cultured on wheat bran medium and the isolate was morphologically identified as an Aspergillus niger group and showed maximum pretense activity and multiplication after 6 days of cultivation. Protease was purified by ammonium sulfate fractionation. Sephadex G-100 gel filtration and DEAE-cellulose column chromatography. The purified enzyme showed single band by polyacrylamide gel electrophoresis and the purity was 150 times higer than crude enzyme. The recovery of enzyme activity was found to be 45%.
Subpopulations of nucleotides that bind specifically to a variety of proteins have been isolated from a population of random sequence RNA/DNA molecules. Roughly one in $10^{13}$ random sequence RNA/DNA molecules folds in such a way as to create a specific binding site for small ligands. Since the development of in vitro selection procedure, more than 50 nucleic acid ligands (aptamers) have been isolated. These molecules are very useful for the study of molecular recognition between nucleic acid and protein/organic compound. In addition to these basic studies this method gives us a dream to produce new drugs against several diseases. We focused on several aptamers which specifically binds to trypsin-like serine proteases (thrombin, human neutrophil elastase, activated protein C and NS3 protease of human hepatitis C virus) and want to introduce their structural characteristics and some functions.
A Nuluk, a Korean traditional Koji for brewing, was made with wheat flour and Aspergillus oryzae L2 which had a good aroma and strong abilities In producing saccharogenic and dextrogenic enzymes. The cultural conditions for the production of saccharogenic and proteolytic enzymes were tested. The productivity of dextrogenic enzyme was improved when Nuluk was made with unsteamed wheat flour as compared with steamed one, but that of proteolytic enzyme was reduced. The addition of water containing 0.5% hydrochloric acid was unfavorable for the production of those two enzymes. The optimum ratio of water added to wheat flour for the production of those two enzymes was 28$^{\circ}C$ on the basis of wheat flour, The productivity of saccharogenic enzyme was enhanced when the Nuluk was molded after 20 hours of precultivation, but that of proteolytic enzyme was reduced as compared with no molding. The optimum temperatures for the production of saccharogenic enzyme and proteolytic enzyme were 36$^{\circ}C$ and 28$^{\circ}C$, respectively.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.238-238
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1994
녹용의 알려진 약리작용 중에서 녹용의 상용량 투여에 의해 나타나는 것은 강장작용과 창상치유작용이므로 이러한 작용이 진정한 녹용의 효능으로 간주될 수 있으나 이러한 작용을 생물활성 검색법으로 활용하여 녹용의 유효성분을 검색하기에는 재현성과 간편성이라는 면에서 어려운 점이 없지 않다. 녹용의 효능이 생체의 질소평형이 음의 방향으로 진행되었을 때 이를 정상 수준으로 복귀시키는 생물활성에 기인할 것이라는 가정하에서, 실험적으로 생체내 질소편형을 음의 방향으로 전환시킬 수 있는 급성기 반응 (acute-phase responce)을 야기시킨 다음 녹용의 효과를 연구하였다. 흰쥐의 급성기 반응물질 (acute-phase reactants, APR) 중에 서 positive ARP인 ceruloplasmin, $\alpha$-cysteine pretense inhibitor(= T-kininogen)는 비색정량법으로 간편하게 측정될수 있음에 착안하여 이 단백질을 지표로 삼아 turpentine oil로 급성 염증을 유발시킨 전후에 녹용 물추출액의 효과를 측정하였다. 그 결과 녹용의 상용량에서 괴소 4일 이상 경구투여한 흰쥐에서 급성 염증유발 후 4일에서 ceruloplasmin 의 혈중농도가 현저히 감소함을 알수 있었다. 급성 염증 유발후 녹용의 경구투여한 실험에서는 적어도 녹용 상용량의 3배 이상을 투여하여야 만 ceruloplasmin 혈중 농도를 감소시킬 수 있었다. 본 연구에서 수립된 생물활성을 이용하여 녹용의 유효 성분을 단리할 계획이다.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1996.04a
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pp.165-165
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1996
균의 감염에 의해 유도되는 패혈성 shock는 균이 분비하는 elastase가 관여하며, 외부에서 serine pretense inhibitor의 biopolymer의 투여로 균에 의해 유도된 패혈성 shock를 억제시킬 수 있다고 보고되고 있다. 이에 본 연구진은 패혈성 치료제의 개발의 목적으로, 국내에서 민간 약으로 많이 이용되고 있는 백편두로부터 새로운 elastase inhibitor를 분리, 정제하여 부분 아미노산 서열 및 특성을 조사하였기에 발표하고자 한다. 백편두 추출액을 여러 차례에 걸쳐 column chromatography을 수행하면서 얻어지는 각 fraction에 대하여 elastase MCA-기질 및 trypsin MCA-기질을 이용하여 활성 측정 후 elastase 기질 및 trypsin 기질에 대하여 활성을 억제하는 fraction들을 모아 $C_{18}$ open column chromatography 및 $C_{18}$ HPLC 과정을 수행하여 2종류의 trypsin 활성 억제 물질과 1종류의 elastase inhibitor를 분리, 정제하여 각각을 Ti1, Ti2 및 Ti3로 명명하였다. 전기영 동 상에서 단일 hand를 확인한 후 각각의 inhibitor들의 부분 아미노산 서열을 결정하였다.
Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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1986.12a
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pp.532.2-532
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1986
Alkaline protease which is an important enzyme used in detergents, leather tanning and food industry was produced by alkalophilic bacterium, Bacillus sp. KCTC 1723 isolated from soil. The maximum productivity of the enzyme in alkaline medium containing 1% sodium bicarbonate was obtained by incubating for 3 days at 37$^{\circ}C$. The optimum pH of the enzyme was 11.5 and calcium ion was effective on stabilization of the enzyme at high temperature. The enzyme was not inhibited by metal chelating agent such as El)TA but inhibited by diisopropyl fluorophosphate. Purification of the enzyme was carried out DEAE- and CM-cellulose column chromatographies and molecular weight of the purified enzyme was determined
A halotolerant and extracellular pretense producing yeast was isolated from traditional Meju and identified as a strain of Hansenular sp. S-9 by investigation of its microbiological characteristics. The optimum pH, temperature and NaCl concentration for growth of Hansenular sp. S-9 were pH 7.5, $30^{\circ}C$ and 0.5M, respectively. The protease production from Hansenular sp. S-9 was maximized when it was grown on BD medium containing 1.0% beef extract, 1.0% glucose and 0.5M NaCl for 72 h at $30^{\circ}C$.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1993.04a
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pp.124-124
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1993
녹용은 강심작용, 여성홀몬작용, 강장작용, 창상치유작용 등의 약리작용이 있는 것으로 보고되어 있는데 녹용의 상용량에서는 강장작용, 창상치유작용이 있는 것으로 알려져 있다. 녹용의 창상치유작용은 생체내 질소 평형이 음의 방향으로 되었을 때 이를 빠른 시간내에 정상적으로 회복시키는 약리효과에 기인하는 것으로 볼 수 있겠다. 본 연구에서도 흰쥐에 turpentineee oil (TPO)를 주사하여 acute-phase response를 일으켜 질소평형을 깨뜨린 실험 모델에서 녹용의 효과를 측정하였다. Acute-phase reactants중에서 $\alpha$$_2$-macroglobulin, $\alpha$$_1$-cysteine pretense inhibitor (T-kininogen), ceruloplasmin을 측정 하였는데 이 중에서 creuloplasmin의 측정이 재현성이 높았다. TPO로 급성염증을 유발시키면 2일 후에 ceruloplasmin의 혈청내 농도가 약 100% 증가하며 4일까지 지속하다가 5일째부터 감소하는데 이때 미리 녹용추출물을 투여한 군은 TPO주사 후 4일째에 50% 감소하였다. TPO로 염증을 유발하기 전에 녹용을 투여했을 때가 염증유발 후에 투여했을 때보다 녹용의 효과가 현저히 나타났다. 이러한 결과는 급성염증에 의해 깨어진 단백질 평형을 신속히 정상화시키는 효과가 있음을 나타내는 것으로 이러한 녹용의 효과를 지표로 하여 녹용의 유효성분 분리를 수행하고자 한다.
Proceedings of the Korean Society of Postharvest Science and Technology of Agricultural Products Conference
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2003.10a
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pp.219-219
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2003
찹쌀 및 가루를 사용하여 담금한 고추장(시험구 A: 찹쌀가루, 시험구 B: 찹쌀, 시험구 C: 찹쌀 및 가루의 혼용)의 화학성분, 효소력 및 texture를 측정한 결과는 다음과 같다. 수분, 조단백, 조지방, 적정산도, 무기성분, alcohol의 함량 및 PH는 시험구간에 차이가 없었다. 이미노태 질소함량과 산성 pretense 및 당화 amylase 활성은 A구가 높았고 환원당은 Brn가 경시적으로 높았다. Ca, Cu, K, Mn, Mg, P, Fe의 무기성분이 각 시험구에서 검출되었고 이중 K의 함량이 가장 높았으며 Cu, Mn, Fe는 극히 미량이었다. Aspartic acid, glutamic acid, cystine, arginia proline 등의 유리아미노산이 60일 숙성 고추장에서 양적으로 많이 검출되었고 histidine, valine의 함량은 적었으며, 유리아미노산의 총량은 A구 16.49, B구 13.68, C 구 15.84mg/g으로서 A 구가 가장 많았고 B 구의 고추장이 가장 적었다. texture를 측정한 결과 견고성과 부착성은 담금 직후에는 A구가, 숙성 후기에는 B 구가 높았으며 응집성, 탄력성은 A 구가 높았고 B 구가 낮았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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