Objective: The Id family of helix-loop-helix proteins are thought to affect the balance between cell growth and differentiation by negatively regulating the function of basic-helix-loop-helix (bHLH) transcriptional factors. The aim of this study was to investigate the expression pattern of Ids (Id-1, -2, -3, and -4) in preimplantation mouse embryos at mRNA and protein levels. Methods: Oocytes and preimplantation embryos were collected from reproductive organs of female ICR mice following superovulation. RT-PCR was performed to investigate the mRNA expression patterns of Id genes and their protein were localized by immunofluorescence analysis. Results: Id-1 and Id-3 mRNAs were strongly expressed at the germinal vesicle (GV) oocyte and the blastocyst stages. Id-2 mRNA was expressed throughout preimplantation embryo development, but Id-4 was not expressed. Immunofluorescence showed that Id-1 and Id-2 were predominantly localized in cytoplasmic region, but the immunofluorescence signal of Id-3 was weak throughout preimplantation embryo development. Conclusion: These data show for the first time that Ids are expressed in preimplantation mouse embryos and suggest that Ids may play an important role in early preimplantation embryo development and uterine physiological changes.
Objective: To verify the effect of Matrigel, a ECM complex from Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) mouse sarcoma on the preimplantation development and apoptosis of mouse fertilized eggs. Method: Late pronucleus stage eggs were cultured through the blastocyst stage in the presence of Matrigel (0.5%, v/v). Characteristics of apoptosis and cell number assesed by Hoecst staining and TUNEL labeling at the blastocyst stage, respectively. Results: Morphological development, number of cells per embryo was significantly increased but rate and number of TUNEL positive nuclei of the embryo were decreased in the presence of Matrigel. Conclusion: This result suggested that at low concentration of Matrigel improves both viability and morphological development in the preimplantation mouse embryos.
A sodium-independent facilitative glucose transporter 1 (Glut1) is a major route by which glucose can be transported across the plasma membrane of mouse embryo. Although it has been known that insulin-like growth factor-I (IGF-I) promotes glucose transport into the mouse embryo, whether IGF-I directly regulates transcription of Glut1 has been uncovered in mouse preimplantation embryo. This study was aimed to elucidate the role of glucose and IGF-I in development and Glut1 expression in preimplantation mouse embryo. Two-cell embryos developed in blastocyst regardless of the glucose in the presence of pyruvate. IGF-I significantly increased the number of blastomeres in the mid-blastula. Deprivation of glucose did not affect the amount of Glut1 transcripts in morula cultured from 2-cell embryo. IGF-I potentiated Glut1 expression in morula cultured from 2-cell embryo even in the absence of glucose. Taken together, it is concluded that depletion of glucose does not promote Glut1 expression the in morula cultured form 2-cell embryo, and that increment of Glut1 expression possibly mediates embryotropic effect of IGF-I on preimplantation mouse embryo.
There studies were conducted using inbred ICR mice to examine the sex of preimplantation mouse embryo. The morphological normality of mice embryos treated with the culture medium containing rat H-Y antiserum(10%, v/v) plus complement(20%,v/v) was observed and also the sexing of embryos was investigated by chromosomal analysis. The results obtained were summarized as follows: 1. The viability of preimplantation mouse embryos, which were incubated in vitro with different media condition, was scored 68.9-85.5% in control group. However, 151 embryos normally developed up to blastocyst and 160 embryos were retarded growth or destroyed out of total 311 embryos treated in the medium containing H-Y antiserum(10%, v/v) plus complement(20%,v/v). 2. H-Y antiserum was prepared from inb red rats (Wistar and Donryu strain) with different immunization times (4, 5 and 6th) to examine the specific titer of embryos by the number of immunization. Precentage of normally developed embryos incubated either in the medium containing the antiserum of Wistar plus complement or Donryu plus complement was revealed 50.9, 47.4 and 50.0% (4, 5 and 6th immunization and 47.8, 41.2 and 48.7%, respectively. 3. Twenty two females and five males were identified out of fourty-eight normally developed embryos incubated in the medium containing H-Y antiserum plus complement by chromosomal analysis.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
/
2002.11a
/
pp.102-102
/
2002
Heparin-bindin epidermal growth factor (HB-EGF) is one of the EGF family to be expressed at the time of implantation in the mouse uterus. Although HB-EGF has been shown to stimulate the development of embryo and uterus in the mouse, its correlation between cell adhesion molecules remains undefined. Integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$, one of the cell adhesion molecules, is an important mediator of cell-substratum and cell-cell adhesion in implantation. In the present studies, we investigated the effects of HB-EGF on the embryonic development, initiation of implantation and expression of integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ in in vitro culture, blocking of HB-EGF, RT-PCR and immunofluores cence analysis. The results showed that HB-EGF significantly improved the developmental rate of hatched embryos (24.1%, p<0.01) and outgrowth embryos (42.5%, p<0.01). On the other hand, this growth factor showed no offset before the hatching embryonic stage. Analysis of RT-PCR showed that HB-EGF upregulated the expression level of integrina $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ subunit genes on the preimplantation embryo and outgrowth of blastocyst (120hr and 144hr after hCG injection). Immunofluorescence analysis showed that the integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ subunits localized at the pericellular borders and cell-cell contact areas. Increase in fluorescence intensity was observed in the HB-EGF treated embryos. Intrauterine injection of an anti-HB-EGF antiserum at day 3 significantly decreased the number of implantation sites (14.4, p<0.01) and significantly increased the number of recovered embryos(6.4, p<0.05) at day 5. From these results, it imply that HB-EGF improve the embryo development and accelerated the expression of integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ in the preimplantation mouse embryos.
These studies were carried out to examine the sex of preimplantation mouse embryo. For the investigation of sex-ration of mouse embryos, morula and blastocysts stage embryos treated with H-Y antiserum (10%, v/v) and FITC anti-mouse-IgG were divided into the positive and negative embryos. Positive and negative identified embryos were observed the viability according to the in vitro cultured and the sex ratio was also investigated by chromosomal analysis. The results obtained in these studies were summarized as follows: 1. Two hundred sixty-seven recovered embryos of morula or blastocyst stage were incubated in medium containing H-Y antiserum and FITC anti-mouse-IgG. Positively or negatively identified embryos were 139 and 128. This trend indicated the approximal sex ratio was 1:1. 2. Sex ratio was measured using the embryos treated with indirect immunofluorescence assay to examine the relationship between embryo developmental stage and sex ratio. Sex ratio of morula stage embryos was 45.2% positive and 54.8% negative, on the other hand, the ratio switched to 56.4% positive and 43.6% negative embryo in blastocyst stage. 3. Fourty-seven positive and 57 negative embryos were obtained out of 104 morula stage embryos treated with indirect immunofluorescence assay. Survived positive or negative embryos during in vitro culture were 42 and 49, respectively out of 47 and 57 embryos. 4. The numbers of negative and positive embryos were 171 and 92 out of 163 blastocyst embryos which were incubated in the medium containing H-Y antiserum and FITC anti-mouse-IgG. The result of karyotype test showed the successful rate of sexing embryo is positive and negative embryos was63.0% (58/92) and 62.0% (44/71). The final female to male ratio within 58 positive embryos was 22.7:77.6, and the ratio of the 44 negative embryos was 77.3:22.7.
In this study, we have examined the role of cAMP in gap junctional communication (GJC) in preimplantation mouse embryos. GJC was monitored by Lucifer Yellow (LY) injected into one blastomere of compacted embryos. The speed of GJC was defined as the time taken for the last blastomere of the embryo to become visibly fluorescent. The median time for 8-cell embrvos (140 sec) was similar to that for 16-cell (135 sec). To determine whether cAMP and cAMP-dependent protein kinase (PKA) are involved in the regulation of GJC, the effects of PKA inhibitor (H8) and cAMP analogues (Rp-cAMP and 8-Br-cAMP) on dye transfer between blastomeres of compacted embryos were examined. Some of the embryos treated with either H8 or Rp-cAMP failed to transfer LY to all blastomeres within 10 min. In contrast, 8-Br-cAMP speeded up fluorescent dye transfer. The median time to fill all blastomeres with LY was 140 sec in untreated controls and 90 sec in siblings treated with 8-Br-cAMP. Inhibition of PKA by H8 or Rp-cAMP induced delay or arrest in embryo development after compaction, but the increase of intracellular cAMP showed no effect. These findings suggest that GJC in preimplantation mouse embryos is regulated by cAMP-PKA pathway and transient interference by PKA inhibitors induces the developmental delay beyond compaction.
Objective: In vitro culture of preimplantation embryos is improved by grouping embryos together in a drop of media. Individually cultured embryos are deprived of paracrine factors; with this in mind, we investigated whether the addition of a single embryo-secreted factor, interleukin-6 (IL-6), could improve the development of individually cultured embryos. Methods: Mouse embryos were cultured individually in $2{\mu}L$ of G1/G2 media in 5% oxygen and supplemented with a range of doses of recombinant mouse or human IL-6. Results: Mouse IL-6 increased hatching at doses of 0.01 and 10 ng/mL compared to the control (93% and 93% vs. 78%, p< 0.05) and increased the total number of cells at a dose of 0.1 ng/mL compared to the control ($101.95{\pm}3.36$ vs. $91.31{\pm}3.33$, p< 0.05). In contrast, the highest dose of 100 ng/mL reduced the total number of cells ($79.86{\pm}3.29$, p< 0.05). Supplementation with human IL-6 had a different effect, with no change in hatching or total cell numbers, but an increase in the percentage of inner cell mass per embryo at doses of 0.1, 1, and 100 ng/mL compared to the control ($22.9%{\pm}1.1%$, $23.3%{\pm}1.1%$, and $23.1%{\pm}1.1%$ vs. $19.5%{\pm}1.0%$, p< 0.05). Conclusion: These data show that IL-6 improved mouse embryo development when cultured individually in complex media; however, an excess of IL-6 may be detrimental. Additionally, these data indicate that there is some cross-species benefit of human IL-6 for mouse embryos, but possibly through a different mechanism than for mouse IL-6.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.