Populus. caspica L. is an Iranian indigenous poplar species which naturally distributed in the northern part of country. Unfortunately, overuse has removed many of the stems of better form, so that natural stands now usually appear small and crook. Therefore genetic variation for selection of new superior clone of this species is needed. Conventional hybridization system is currently used to induce genetic variation in poplar species but incompatibility barriers have been observed between them. In vitro ovule embryo culture was used to overcome incompatibility obstacle for interspecific hybridization between Populus caspica L. with Populus deltoids L.62/75. Female flowers of Populus caspica L. have artificially been pollinated with pollen grain of P. deltoides 62/75 in one direction using twig and pot crossing system. Ovaries at different ages (7, 14 and 21 days after pollination) were disinfected through 70% ethanol for 1 minute, 5% of sodium-hypochlorite solution for fifteen min followed by three time rising with sterile distil-water. Isolated ovaries were then transferred to MS hormone free medium containing 30 and 60 g/L sucrose for embryo development and germination. Collected data have been analyzed by two factorial experimental designs. The results indicated that there were significant differences between age of embryos for development and germination at ${\alpha}=0.01%$. Highest embryo germination (45%) was observed from 21 days old ovaries. No significant differences were observed between MS culture media containing 30 and 60 g/L for percentages of ovary-embryo germination and number of germinated embryo per ovary at ${\alpha}=0.05%$. Fourteen percentage of embryo germination obtained in MS medium supplemented with 60 g/L sucrose, while only 35% of isolated ovaries were able to germinate in MS containing 30 g/L sucrose. Induced plantlets in 4 cm height were transferred into pots containing soilless (1:1:1 peat, per lit and vermiculite) medium for acclimatization. After successful acclimatization, plants were delivered to nursery.
To sled the superior clones of Populus alba ${\times}$ Populus glandulosa $F_1$, growth and some growth-related enzyme activities were examined for thirteen, two-year-old and fifteen, three-year-old trees at Seoul National University nursery in Suwon. Clonal differences in total dry weight per tree and leaf surface area per tree were significant at the 5% level. Significant correlations were found between total dry weight per tree and leaf surface area per tree (r=0.875), between leaf peroxidase activity per tree and total dry weight per tree (r=0.854), and between leaf nitrate reductase activity per tree arid total dry weight per tree (r=0.914). Leaf peroxidase and nitrate reductase activities per unit fresh weight of one-year-old tree increased with increasing leaf order numbers basipetally, reaching maximum values in the eighteenth and thirty-third leaves, respectively, and decreased gradually from those leaves to basipetal lower leaves. Clones 65-29-19, 66-15-3, 65-22-11, 66-14-93, and 66-26-55 among two-year-old trees, and clones 64-6-44, 66-14-29, 66-26-55, 65-22-11, and 68-1-54 among three-year-old trees showed greater leaf surface areas, peroxidase and nitrate reductase activities per unit leaf fresh weight than other clones, Growth of Populus alba ${\times}$ Populus glandulosa $F_1$ clones might be estimated from either leaf surface area per tree or peroxidase and nitrate reductase activities per tree. Therefore, measurements of leaf surface area and leaf enzyme activities appear useful to select superior Populus clones at early growth stages.
Two fast-growing clones 65-29-19 and 66-6-8 and two less fast-growing clones 66-14-29 and 66-14-99 were compared at intensively cultured plots to identify what morphological characters are related to fast growth and high biomass yield of Populus alba ${\times}$ Populus glandulosa $F_1$. The plantations were established in the spring of 1982 and 1983 at the Seoul National University nursery in Suweon. Differences in dry matter production were found among two-year-old clones but not, among one-year-old clones. Highly significant correlations were found between total leaf area per tree and total dry weight per tree and between total branch length per tree and total dry weight per tree for two-year-old clones. This relation was more obvious during the late growing season. Morphological characters desirable for producing high biomass identified in fast-growing clones were as follows; high shoot-root ratio, high leaf surface area per tree, long leaf retention period, and many small leaves and compact crown architecture in the upper portion of true crown.
An effective in vitro multiplication method was developed for clones of Populus davidiana Dode. Ten different media were tested for their effect on shoot multiplication. Both MS and LP medium with 0.2mg/l BAP appeared to be the best for the shoot multiplication with the rate of 9 shoots per explant. There were significant differences among the clones in both multiplication rate and shoot growth. While some clones did not require BAP to promote shoot formation, others did. More than 60% of in vitro shoots rooted on the half-strength GD medium containing 0.2mg/l IBA.
Effects of polyamines and their biosynthetic inhibitors on adventitions shoot regeneration of Populus leaf segments were investigated. Polyamine inhibitors such as difluoromethyl arginine (DFMA), difluoromethyl ornithine (DFMO), and dicyclohexylamine (DCHA) decreased the fresh weight of cultured leaf segment and the rate of adventitious shoot regeneration. The inhibitory effects of DCHA were stronger than any other oplyamine inhibitors, and the rest were in the order of DFMO and DFMA. The inhibitory effects of these inhibitors were lessened or disappeared by the addition of polyamines, among which spermidine was the highest in its effect. Therefore, it is suggested that the spermidine may be related to the adventitious shoot regeneration of Populus leaf segments.gments.
Lee Jun-Won;In Jun-Gyo;Lee Bum-Soo;Choi Yong-Eui;Kim Jin-Ju;Yang Deok-Chun
Plant Resources
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v.8
no.1
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pp.1-8
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2005
A type 3 metallothionein cDNA (PMT3a) from ozone-treated Populus alba${\times}$Populus glandulosa cDNA library has been isolated and characterized. A PMT3a cDNA is 459 nucleotides long and has an open reading frame of 201 bp with a deduced amino acid sequence of 66 residues (pI 4.94). The deduced amino acid sequence of PMT3a matched to the previously reported metallothionein genes. The deduced amino acid sequence of PMT3a showed the $86\%$ identity with P. balsamifera ${\times}$P. deltoides. Expression of PMT3a by the RT-PCR was increased 60 min than 30 min after drought treatment. The ozone treated poplar increased at 30 min in the early time and then decreased at 60 min.
Anthocyanin formation in callus cultures using Populus alba ${\times}$ Populus glandulosa was evaluated on basal MS medium supplemented with various levels of growth regulators, sucrose and nitrate concentrations. The highest yield of anthocyanin from cultured cells was produced under 5% sucrose, 1/8 strength of nitrate(12.5% of basic concentration) and combination of 1.0 mg/l IAA with 2 mg/l BAP, respectively. The high anthocyanin producing cell line no. 11 was selected among 15 cell lines, showing over 80% cells contained anthocyanin producing cells. From these cells, the highly productive red protoplast was isolated and the highest protoplast yield, $6.7{\times}10^6$ was obtained in enzyme combination IV which is composed of 2.0% cellulase, 0.5% macerozyme and 0.1% pectolyase.
To select the superior clones of Populus alba ${\times}$ Populus glandulosa $F_1$, growth and some growth-related physiological characters were examined for thirteen, one-year-old and fifteen, two-year-old clones, respectively at the Seoul National University nursery in Suweon, Clonal differences in growth (total dry weight per tree), leaf area per tree and leaf chlorophyll content per tree at tow-year-old plots were highly significant at the 1% level, but not at one-year-old plots, Highly significant correlation was found between leaf area per tree and total dry weigh per tree (r=0.865), between leaf chlorophyll content per tree and total dry weight per tree (r=0.888), and between photosynthetic ability per tree and total dry weight per tree (r=0.745). The photosynthetic ability and leaf chlorophyll content per unit leaf area of one-year-old plant increased with increasing leaf order number from top. reached maximum value in the twenty-eithth and thirty-third leaves, respectively, and then decreased gradually from those leaved to base, Clones 68-1-54, 66-26-55 and 65-22-11 showed test growth based on leaf area per tree, leaf chlorophyll content per unit leaf area and photosynthetic ability of leaf tissue per unit area. Growth yield of populus alba ${\times}$ P. glandulosa $F_1$ clones could be estimated from either leaf area per tree of leaf chlorophyll content per tree. Therefore, measurements of leaf area and leaf chlorophyll content appear useful to select superior populus clones early growth.
The effects of ozone (O$_{3}$) exposures on chlorophyll content of trembling aspen(Populus tremuliodes) rooted cuttings were studied. Ozone was treated with 100 ppb fumigation for 6 hours per day, for three consecutive days per week in open-top chamber. The ozone exposures caused severe foliage damage expressed in necrotic patches and extensive chlorosis. Degradation of chlorophyll was observed mostly in mature leaves. The chlorophyll response to ozone exposure maintained a similar pattern during all experimental seasons and plant materials, Significant genetic variation in O$_{3}$ responses was revealed by differences in sensitivies among clones.
Polyamine contents and the activities of their main biosynthetic enzymes, arginine decarboxylase (ADC) and ornithine decarboxylase(ODC), were investigated in Populus leaf segments during adventitious shoot regeneration with the addition of 1 millimolar polyamine synthesis inhibitors. From the study of polyamine synthesis inhibitors, ODC was found to be the principal route of polyamine biosynthesis in adventitious shoot regeneration of Populus leaf segments. The ADC inhibitor difluoromethyl arginine(DFMA) and ODC inhibitor difluoromethyl ornithine(DFMO) strongly reduced the putrescine content. On the contarary, DCHA, an inhibitor of spermidine synthase, increased it. Spermidine content was decreased with the treatment of each polyamine synthesis inhibitor, but the inhibitory effect of DCHA was stronger than any other polyamine inhibitor. The decreased polyamine level by polyamine synthesis inhibitors was restored with the exogenously applied polyamine. Comparing the polyamine contents with the adventitious shoot regeneration rate, were observed a close correlation between spermidine content and adventitious shoot regeneration of Populus leaf segments.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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