$\^$31/ P-NMR experiment was performed to detect phophonates (Pn) utilization and degradation in the several different C-P lyase mutants of E. coli and in E. aerogenes and the recombinants. The relative peak intensity (RPI) for the standard samples of 0.5 mM methylphosphonate (MPn) and 1.0 mM aminoethylphosphonate in glucose-MOPS medium showed 0.5 : 1.0 ratio. In the case of BW14329 (.DELTA.phnC-P, .delta.phoA), RPI did not change significantly after 24 hrs culturing, which means it nearly could not utilize Pn. In vivo $\^$31/ P-NMR spectrum of E. aerogens (BWKL 16627) during 3 hrs starvation showed two intense peaks at 0-2 ppm and at near-10 ppm which indicate intracellular orthophosphate (Pi) and pyrophosphate (PPi), respectively. Both of them might be released by degradation of inorganic polyphosphate pool. When MPn is supplied to the medium as an unique P source, Pi content in the cell has the constant, but PPi seems to be slightly decreased. Recombinants (BWKL 16954) grew slower than E. aerogenes in the glucose-MOPS media with various P sources. In vivo $\^$31/ P-NMR spectrum of recombinant did not show any intense signal in the cell. Surprisingly, under the cultivation adding with MPn, a few intense peaks in the region of Pi AND phospate monoester were detected.
Park, Ki-Soo;Choi, Yang-Il;Lee, Sang-Hwa;Kim, Chong-Hee;Auh, Joong-Hyuck
Food Science and Biotechnology
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v.17
no.4
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pp.794-798
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2008
Guar gum and $\kappa$-carrageenan were investigated as a substitutes for phosphate in pork meat processing. Emulsion-type pork sausages were prepared in which 0.5% phosphate was used for the control, and either $\kappa$-carrageenan or guar gum were added at levels of 0.1 or 0.5% for comparison. The hydrocolloid compounds significantly enhanced water holding capacity and cooking loss. However, hardness, cohesiveness, and chewiness were not well-maintained when compared to the control; this was attributable to the altered water distribution as well as enhanced water holding capacity of the sausages by the addition of $\kappa$-carrageenan and guar gum. Furthermore, the phosphate-free sausages had similar storage stability as the phosphate-added sausage. Overall, the results suggest that $\kappa$-carrageenan or guar gum can be used in place of phosphate in conventional processing to successfully prepare phosphate-tree pork sausages.
In this study, the stabilizer, PH and lysis method for optimum condition of S. uvarum protoplast formation were investigated, and also enzyme activity and poly-P formation of intact cell and protoplast mere compared. Upon protoplast formation, incubation time of 5 hours in snail gut enzyme and 3 hours in drisielase were reignited. 0.8 Mole mannitol and 6 mole KCl were apt to protoplast formation. Protoplast was contained less 22-27 percentage in ALPase, 4-15 percentage in ACPase than intact cell. Accumulation of inorganic polyphosphate did not increase significently in protoplast compared with intact cell.
This study evaluated the kinetics of acrylamide (AM) biodegradation by mixed culture bacteria and Enterobacter aerogenes (E. aerogenes) in sequencing batch reactor (SBR) systems with AQUASIM and linear regression. The zero-order, first-order, and Monod kinetic models were used to evaluate the kinetic parameters of both autotrophic and heterotrophic nitrifications and both AM and chemical oxygen demand (COD) removals at different AM concentrations of 100, 200, 300, and 400 mg AM/L. The results revealed that both autotrophic and heterotrophic nitrifications and both AM and COD removals followed the Monod kinetics. High AM loadings resulted in the transformation of Monod kinetics to the first-order reaction for AM and COD removals as the results of the compositions of mixed substrates and the inhibition of the free ammonia nitrogen (FAN). The kinetic parameters indicated that E. aerogenes degraded AM and COD at higher rates than mixed culture bacteria. The FAN from the AM biodegradation increased both heterotrophic and autotrophic nitrification rates at the AM concentrations of 100-300 mg AM/L. At higher AM concentrations, the FAN accumulated in the SBR system inhibited the autotrophic nitrification of mixed culture bacteria. The accumulation of intracellular polyphosphate caused the heterotrophic nitrification of E. aerogenes to follow the first-order approximation.
Graphene doped zinc oxide nanoparticles (G-ZnO) were prepared using modified hummer's technique together with the ultrasonic method and characterized by field emission scanning electron microscopy (FESEM), X-ray powder diffraction (XRD), fourier-transform infrared spectroscopy (FTIR) and high-resolution transmission electron microscopy (HRTEM). Different samples of epoxy resin nanocomposites reinforced with G-ZnO nanoparticles were prepared and were marked as F1 (without adding nanoparticles), F2 (1% w/w G-ZnO), and F3 (2% w/w G-ZnO) in combination of ≈ 56:18:18:8w/w% with epoxy resin/hardener, ammonium polyphosphate, boric acid, and Chitosan. The peak heat release rate (PHRR) of the epoxy nanocomposites was observed to decrease dramatically with the increasing G-ZnO nanoparticles. However, the LOI values increased significantly with the increase in wt % of G-ZnO nanoparticles. From the UL-94V data, it was confirmed that the F2 and F3 samples passed the flame test and were rated as V-0. The results obtained in the present work clearly revealed that the synthesized samples can be used as efficient materials in fire-retardant coating technology.
In this study, we aimed to enhance the accumulation of chorismate (CHR) and anthranilate (ANT), key intermediates in the shikimate pathway, by modifying a shikimate over-producing recombinant strain of Corynebacterium glutamicum [19]. To achieve this, we utilized a CRISPR-driven genome engineering approach to compensate for the deletion of shikimate kinase (AroK) as well as ANT synthases (TrpEG) and ANT phosphoribosyltransferase (TrpD). In addition, we inhibited the CHR metabolic pathway to induce CHR accumulation. Further, to optimize the shikimate pathway, we overexpressed feedback inhibition-resistant Escherichia coli AroG and AroH genes, as well as C. glutamicum AroF and AroB genes. We also overexpressed QsuC and substituted shikimate dehydrogenase (AroE). In parallel, we optimized the carbon metabolism pathway by deleting the gntR family transcriptional regulator (IolR) and overexpressing polyphosphate/ATP-dependent glucokinase (PpgK) and glucose kinase (Glk). Moreover, acetate kinase (Ack) and phosphotransacetylase (Pta) were eliminated. Through our CRISPR-driven genome re-design approach, we successfully generated C. glutamicum cell factories capable of producing up to 0.48 g/l and 0.9 g/l of CHR and ANT in 1.3 ml miniature culture systems, respectively. These findings highlight the efficacy of our rational cell factory design strategy in C. glutamicum, which provides a robust platform technology for developing high-producing strains that synthesize valuable aromatic compounds, particularly those derived from the shikimate pathway metabolites.
Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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2003.10a
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pp.19-19
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2003
This presentation reviewed the dietary vitamin C requirements in main marine finfish culture in Korea. In experiment I, an II-week feeding trial was conducted to study the effects of the different levels of dietary vitamin C on growth, tissue ascorbic acid concentrations and histopathological changes in parrot fish. Casein and gelatin based diets were formulated to contain 0, 60, 120, 240, 480 and 2000mg L-ascorbic acid (AA)kg diets on Ah equivalent basis in the form of L-ascorbyl-2-monophosphate (AMP), 60 and 240 mg AA/kg diet as L-ascorbic acid. Broken line analysis of weight gain indicated that the dietary vitamin C requirement of parrot fish is l18$\pm$12 mg AA/kg diet in the form of L-ascorbyl-2-monophosphate for maximum growth. In experiment II, a 12-week experiment was conducted to compare L-ascorbyl-2-monophosphate-Ca (AMP-Ca) with L-ascorbyl-2-monophosphate-Na/Ca (AMP-Na/Ca) for supplying the dietary vitamin C for juvenile Korean rockfish Sebastes schlegeli. Fish were fed one of 11 semi-purified diets containing equivalent of 0, 50, 100, 200, 400, and 800 mg ascorbic acid (AA)kg diet in the form of AMP-Ca or AMP-Na/Ca for 12 weeks. Broken line analysis of weight gain indicated that the dietary vitamin C requirement of Korean rockfish is 100 mg AA/kg diet in the form of AMP-Na/Ca, and 117 nag AA/kg diet in the form of AMP-Ca. In experiment III, a 12-week experiment was conducted to study the effects of different dietary levels of vitamin C, L-ascorbyl-2-polyphosphate (ASPP), on growth and tissue vitamin C concentrations in juvenile olive flounder. Fish were fed one of six semi-purified diets containing an equivalent of 0, 25, 50, 75, 150, or 1500 mg ascorbic acid (AA) kg 1 diet in the form of ASPP for 12 weeks. Based on broken line analyses for WG and PER, the optimum dietary levels of vitamin C were 91 and 93 mg AA/kg diet, respectively.
Extractions fro fertilizer and soil samples were performed to yield the operationally defined fractions 'soluble' chromate (extractable with $NH_4NO_3$), 'exchangeable' chromate (extractable with phosphate buffer pH 7.2), and these results were compared with the data obtained by extractions with ammonium sulfate, borate buffer pH 7.2, saturated borax pH 9.6, and polyphosphate (Graham's salt). In order to maintain the pH of extractant solution about constant, the concentration of extractant buffer had to be raised to at least 0.5 M. The results strongly depended on the kind of extractant, and the solid: liquid ratio. For most of the samples investigated, the extraction efficiency increased in the order borate-sulfate-nitrate-phosphate. Whereas the recovery of $K_2CrO_4\;and\;CaCrO_4$ added to the samples of basic slags prior to the extraction was about complete, the recovery of added $PbCrO_4$ was highly variable. In soil extracts, the color reaction was interfered from co-extracted humics, which react with the chromate in weak acid solution during the time period necessary for color reaction (1 hour). However, this problem can be overcome by standard addition and subtraction of the color of the extractant solution. In soil extract of about pH < 7, organic material reduced chromate during the extraction period also, and standard addition of soluble chromate is recommended to prove recovery and the stability of chromate in the samples. In admixtures of soils and basic slags, results for hexavalent chromium were lower than from the mere basic slags. This effect was more pronounced in phosphate than in nitrate extracts. As a proficiency test, samples low in organic carbon from contaminated sites in Hungary were tested. The results from $NH_4NO_3$ extracts satisfactorily matched the results of the Hungarian labs obtained from $CalCl_2$ extractants.
This study compared the effects of dietary supplementation of citrus by-product (CBP) and CBP fermented with Bacillus subtilis (F-CBP) on growth performance, feed utilization, intestinal histology and innate immunity of red seabream Pagrus major with three commercial immune-boosting products. The six experimental diets were supplemented with L-ascorbyl-2-polyphosphate (LAPP; the control diet), CBP or F-CBP at a concentration of 100 mg vitamin C equivalent/kg diet or one of three commercial immune boosters. The Experimental diets were fed to triplicate groups of 17 fish (initial body weight, 116 g) for 8 weeks. The water temperature during the feeding trial was maintained at $13-15^{\circ}C$. Growth and feed utilization did not differ significantly among the six dietary treatments, nor did the phagocytic activity, superoxide dismutase or total immunoglobulin concentrations. However, myeloperoxidase activity was significantly higher in the CBP groups. For the intestinal histology, the intestine diameter, villi and enterocyte heights and number of goblet cells did not differ significantly among groups. Therefore, CBP or F-CBP can be used as a valuable eco-friendly byproduct in diets for fishes including red seabream to maintain their normal growth and health.
Park, Jong-Bok;Lee, Han-Woong;Lee, Soo-Youn;Lee, Jung-Ok;Bang, Iel-Soo;Park, Eui-So;Park, Doo-Hyun;Park, Yong-Keun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.6
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pp.929-935
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2002
The 5-stage biological nutrient removal (BNR) process with step feed system showed a very stable organic carbon and nutrient removal efficiency ($87\%\;COD\,;79\%\;nitrogen,\;and\;87\%$ phosphorus) for an operation period of 2 years. In each stage at the pilot plant, microbial communities, which are important in removing nitrogen and phosphorus, were investigated using fluorescence in-situ hybridization (FISH) and 165 rDNA characterization. All tanks of 5-stage sludge had a similar composition of bacterial communities. The totat cell numbers of each reactor were found to be around $2.36-2.83{\times}10^9$ cells/ml. About $56.5-62.0\%$ of total 4,6-diamidino-2-phenylindol (DAPI) cells were hybridized to the bacterial-specific probe EUB388. Members of ${\beta}$-proteobacteria were the most abundant proteobacterial group, accounting for up to $20.6-26.7\%$. The high G+C Gram-positive bacterial group and Cytophaga-Flexibacter cluster counts were also found to be relatively high. The beta subclass proteobacteria did not accumulate a large amount of polyphosphate. The proportion of phosphorus-accumulating organisms (PAOs) in the total population of the sludge was almost $50\%$ in anoxic-1 tank. The high G+C Gram-positive bacteria and Cytophaga-Flexibacter cluster indicate a key role of denitrifying phosphorus-accumulating organisms (dPAOs). Both groups might be correlated with some other subclass of proteobacteria for enhancing nitrogen and phosphorus removal in this process.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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