Environmental Sciences Bulletin of The Korean Environmental Sciences Society
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v.4
no.4
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pp.231-240
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2000
Effects of Jasmonic Acid and Wounding on Polyphenol Oxidase Activity in Senescing Tomato Leaves The effects of jasmonic acid(JA) and wounding on polyphenol oxidase(PPO) during leaf senescence was investigated by measuring the PPO activity in detached tomato(Lycopersicon esculentum Mill.) leaves of two-week-old seedlings. The PPO activity in the detached senescing leaves increased significantly in the dark. The leaf segments responded to the application of JA with accelerated senescence, as indicated by the loss of chlorophyll and rapid increase in the PPO activity. The senescence-promoting action of JA differed in the light and dark. Wounding the detached senescing leaves by scraping surface segments or making punctures with needles considerably delayed the loss of chlorophyll and had a significant effect on the PPO activity, the amounts of which were roughly proportional to the intensity of the wounding. In the dark, the combination of wounding plus JA resulted in stable levels of chlorophyll and PPO. JA and ABA acted similarly in both unwounded and wounded leaves, however, the amount of chlorophyll and PPO in the wounded segments was always higher than in the respective controls. JA was found to eliminate the senescence-retarding action of benzyladenine. In a histochemical localization test, the PPO activity was found to be localized in the cell walls of the parenchyma tissue, thereby indicating moderate cytoplasmic reactions. In the JA-treated plants, the PPO activity was intense in the cells of the cortex and phloem parenchyma. Accordingly, based on these observations it would appear that PPO is a component of a defense response maker, whereas JA plays an integral role in the intracellular signal transduction involved in inducible defense mechanisms.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.17
no.4
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pp.348-357
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1988
The present work was undertaken to investigated the purification and characterization of polyphenol oxidase (PPO ; EC 1.10.3.1) in sweet potato, particularly the number of PPO isozymes, and PPO properties such as pH optimum, heat stability, substrate specificity, kinetics, and inhibitor studies. The purification achieved was 23.1 fold from crude extract with a yield of 41.5%. Eight PPO isozymes and twelve PPO isozymes were detected by disc polyacrylamide gel electrophoresis and isoelectric focusing, respectively. The specific activity of each isozyme separated by isoelectric focusing was in the range of $6,000{\sim}46,700U/mg$. This enzyme was sweet below $65^{\circ}C$ and the pH optimum of PPO occurred at 6.0-6.5. The substrate specificity of sweet potato PPO showed the high affinity toward the odiphenolic compounds. Km and Vmax for catechol were found to be 6.7 mM and $20{\triangle}A/min$, me protein, respectively. Inhibitor studies indicated that dithiothreitol was the most potent among the inhibitors used in the present work.
Polyphenol Oxidase(PPO) was purified from an extract of Ginkgo biloba leaves by ammonium sulfate fractionation followed by sephadex G-150 column chromatography, which resulted in a 18-fold increase in specific activity. The enzyme was most active at pH 8.5 and the temperature optimum for the PPO catechol oxidation reaction was $45^{\circ}C$. Heat inactivation studies showed that heating for 7, 9 and 48 min, at 80, 70 and $60^{\circ}C$ respectively caused a 50% loss in enzymatic activity and that the enzyme was completely inactivated after heat treatment at $90^{\circ}C$ for 60 min. Km values of the PPO for catechol, hydroquinone and 4-methylcatechol derived from Lineweaver-Burk plots were $6.06\;{\times}\;10^{-4}M,\;1.02\;{\times}\;10^{-3}M,\;1.41\;{\times}\;10^{-3}M$ respectively. Of the substrates tested, 4-methylcatechol was oxidized most readily and the enzyme did not oxidize monophenols. The enzyme datalyzed browning reaction was completely inhibited in the presence of reducing reagents, namely ascorbic acid, cysteine, glutathione, 2-mercaptoethanol, potassium metabisulfite at 0.5 mM level. Sodium chloride showed very little inhibition effect on Ginkgo biloba leaves PPO. Lineweaver-Burk analysis of inhibition data revealed that the inhibition by cysteine, 2-mercaptoethanol, potassium cyanide was competitive with ki values of $1.1\;{\times}\;10^{-5}M,\;2.4\;{\times}\;10^{-5}M,\;8\;{\times}\;10^{-5}M$, respectively. Among the divalent cations, $Cu^{2+}ion$ was a strong activator on PPO and $Mn^{2+}ion$ was little or no effect on PPO activity $Ni^{2+}ion$ was an inhibitor on PPO.
The characteristics of crude polyphenol oxidase extracted from mushroom[Tricholoma matsutake(S. Ito et Imai) Sing.] were investigated. The enzyme showed highest affinity to pyrogaroll among trihydroxyphenols. Except for o-diphenols the enzyme was inactive in di-and monophenols. The optimum pH was about 4 and the optimum temperature ranged from 45 to $55^{\circ}C$. The enzyme activity was completely inhibited by $70^{\circ}C$ heat treatment for 2 min. $Cu^{++}$, $Fe^{++}$ and $Mg^{++}$ activated the enzyme at low concentration($10^{-1}mM$), but inhibited at high concentration (1mM). The most potent inhibitors were Na-diethyldithiocarbamate, L-ascorbic acid, L-cysteine and NaCl. The Km value with pyrogaroll was 0.88mM.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.39
no.7
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pp.1018-1023
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2010
This study was conducted to investigate quality changes of apple slab after pretreating with supercritical $CO_2$. L, a, b and color difference values were little changed at increasing temperature and pressure. Polyphenol oxidase was inhibited according to increment of supercritical $CO_2$ temperature and pressure. Springiness and hardness were increased at increasing pressure and temperature condition of pretreatment but hardness showed lower value than untreatment. The texture like sponge of dried apple slab was probably due to channels which were made during penetration and release of carbon dioxide.
Hunter's color value "a" in dried-persimmon of table and full ripe fruit was higher than that in unripe fruit. In case of soluble solid content, full ripe fruit was $50^{\circ}Brix$, the highest degree, while unripe fruit was $40^{\circ}Brix$, the lowest degree. PPO activation of unripe fruit was 4.7, which was higher than table-ripe fruit (0.7) and full ripe (1.0). Polyphenol oxidase activation remained even while drying, but there was no difference in PPO activation degree as drying period increased. Total phenol content of unripe fruit was 101.4, which was higher than table-ripe fruit (57.5) and full ripe fruit (67.4). Total phenol content level increased as drying period increased, which was based on fresh weight. Hardness of unripe and table ripe fruit continued to decrease until three weeks during softening. After that, hardness was high and it started drying. However, in full ripe fruit, hardness increased after two weeks and softening was fast during the drying period, and its weight reduction rate was lower than that of unripe and table ripe fruit.
Three potato cultivars, Sumi,Daejima and Namjak, were prepared as slices. They were dipped in distilled water for 20 seconds. The potato slices were packed in polyethylene bags and stored at $5^{\circ}C$. Browning degree, total phenol and chlorogenic acid contents and polyphenol oxidase (PPO) activity were measured. And the correlation analysis of browning parameters were conducted. The results were as follows. There were increase in browning degree, phenolic content and PPO activity during cold storage of potato slices with different cultivars. Among three cultivars, Sumi showed the highest browning degree, phenolic content and PPO activity and also showed the highest % increse of browning and PPO activity during cold storage. On the contrary, Daejima was the lowest. But Daejima showed the highest % increase in phenolic contents during cold storage. With Sumi, browning degree was significantly correlated with PPO activity and phenolic contents (p<0.05). With Daejima and Namjak, a significant correlation was found between browning degree and PPO activity (p<0.05). From the above results, enzymatic browning reactions of potato slices and factors affecting them were dependent on cultivar. Among the tested three cultivars, Daejima showed the lowest browning degree during cold storage and thus seems to be desirable for minimal processing.
This study was conducted to investigate the effect of ultrasound with ascorbic acid on the quality of fresh-cut apples. Prepared apple cubes were dipped in distilled water (US) or in 1% ascorbic acid solution (AS), both were treated with ultrasound at 40 kHz, while the other sample was just dipped in 1% ascorbic acid solution for 1 min (AA). All samples were stored at $4^{\circ}C$ for 12 days. AS treatment had an effect on apple cube color as indicated by its significantly higher L values and lower ${\Delta}E$ value whereas AA- and US-treated samples showed a considerable browning. Higher inhibition rate on browning and polyphenol oxidase (PPO) activity of 46 and 98%, respectively, were observed after AS treatment. The highest total phenolic content of AS-treated samples was shown during whole storage periods. This investigation revealed that the use of ultrasound in combination with ascorbic acid had a positive effect on quality maintaining of fresh-cut apples.
Polyphenol oxidase (PPO) was purified from an extract of Perillae Folium by ammonium sulfate fractionation and sephadex G-150 gel filtration, which molecular weight estimated 65,000$\pm$1,000 in SDS-gel electrophoresis, and pI value was 4.8. The pH and temperature optima were 6.0 and $30^{\circ}C$ respectively. $K_{m}$ values of the PPO for various phenolics derived from Lineweaver-Burk plots were 4.0$\times$10$^{-4}$, caffeic acid; 4.2$\times$10$^{-3}$M, 4-methylcatechol. The inhibition by 4-nitrocatechoi, potassium cyanide, cysteine, 2-mercaptoethanol was competitive with $K_{i}$ values of 7.6$\times$10$^{-5}$M, 7.2$\times$10$^{-5}$M, 3.6$\times$10$^{-5}$M, 2.2$\times$10$^{-5}$M, respectively. Among the divalent cations, Cu$^{2+}$ ion was strong activator on PPO and Zn$^{2+}$, Ni$^{2+}$ ions were little effect on PPO activity. In comparing the amino acid composition of Perillae Folium PPO with that of wheat isozyme, grape, spinach showed similarity. But the content of glycine phenylalanine was abundant relatively.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.6
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pp.1013-1016
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2004
The inhibitory effect of MRPs (Maillard reaction products) on enzymatic browning of taro was investigated. The MRPs prepared by heating glycine and glucose at 9$0^{\circ}C$ for 7 hr exhibited a strong inhibitory effect on taro polyphenol oxidase (PPO). The maximum inhibitory activity of MRPs against taro PPO was detected toward (+)-catechin, catechol, 4-methylcatechol followed by L-$\beta$-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) and pyragallol as a substrate. The MRPs synthesized from fructose and glucose with glycine as a amino acid significantly reduced the taro PPO activity. MRPs prepared by higher glycine or glucose concentration showed stronger inhibition against taro PPO. Increasing reaction time of the glycine and glucose promoted the inhibitory effect of MRPs against the PPO activity of taro, whereas the color formation was gradually increased.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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