• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제25권2호
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• pp.267-278
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• 1995

Human polymorphonuclear leukocytes(PMN) are the most numerous host cell in periodontal pockets and their presumed role is to form a protective barrier between the bacteria and periodontal tissues. Microbial component LPS activates macrophages to produce $IL-1{\beta}$, $MIP-1{\alpha}$, $-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$ and IL-6, etc. These cytokines have autocrine function to the macrophages, and paracrine function to other cell such as PMN and affect them to produce some biological functions. In the present study, human PMN were tested for the expression of $IL-1{\beta}$ and $MIP-1{\alpha}$ mRNA. Also we performed the receptor binding assay and in vitro assay for the antimicrobial action of HL-60 cell to determine whether HL-60 can replace the peripheral PMN in analyzing the biological functions. PMN were stimulated with $IL-1{\beta}$, TPA, $MIP-1{\alpha}$, LPS, IL-2 and total cytoplasmic RNA were extracted for the northern blot analysis. In order to determine the induction kinetics of $IL-1{\beta}$ or $MIP-1{\alpha}$ mRNA expression, cells were stimulated for 0,1,2,3 hours. We found peak expression of $IL-1{\beta}$ mRNA after 1hr of induction with $IL-1{\beta}$, LPS and after 2hr of induction with TPA. $MIP-l{\alpha}$ also induced but a scarce $IL-l{\beta}$ message from PMN. In contrast to the $IL-l{\beta}$ mRNA expression, $MIP-1{\alpha}$ were not induced from PMN in any culture conditions. Receptors for $MIP-1{\alpha}$ were identified on dibutyryl cyclic AMP(dbcAMP)-treated HL-60 as well as peripheral PMN. dbcAMP treatment significantly enhanced antimicrobial action of undifferentiated HL-60 cell. MIP-1 further increased enhancing effect of dbcAMP. $IL-1{\beta}$, to a lesser extent, also increased dbcAMP-induced enhancing effect of antimicrobial action of HL-60 cell.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제8권6호
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• pp.319-327
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• 2004

This study was aimed at evaluating the effect of defibrotide on the development of the surgically induced reflux esophagitis, on gastric secretion, lipid peroxidation, polymorphonuclear leukocytes (PMNs) accumulation, polymorphonuclear leukocytes adherence, superoxide anion and hydrogen peroxide production in PMNs, scavenge of hydroxyl radical and hydrogen peroxide, cytokine (interleukin-1 ${\beta}$, tumor necrosis $factor-{\alpha}$) production in blood, and intracelluar calcium mobilization in PMNs. Defibrotide did not inhibit the gastric secretion and not change the gastric pH. Treatment of esophagitis rats with defibrotide inhibited lipid peroxidation, and myeloperoxidase (MPO) in the esophagus in comparison with untreated rats. Defibrotide significantly decreased the PMN adherence to superior mesenteric artery endothelium in a dose-dependent manner, Superoxide anion and hydrogen peroxide production in $1{\mu}M$ formylmethionylleucylphenylalanine (fMLP)- or $0.1{\mu}g/ml$ N-phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)-activated PMNs was inhibited by defibrotide in a dose-dependent fashion. Defibrotide effectively scavenged the hydrogen peroxide but did not scavenge the hydroxyl radical. Treatment of esophagitis rats with defibrotide inhibited interleukin-1 ${\beta}$ production in the blood in comparison with untreated rats, but tumor necrosis $factor-{\alpha}$ production was not affected by defibrotide. The fMLP-induced elevation of intracellular calcium in PMNs was inhibited by defibrotide. The results of this study suggest that defibrotide may have partly beneficial protective effects against reflux esophagitis by the inhibition lipid peroxidation, PMNs accumulation, PMNs adherence to endothelium, reactive oxygen species production in PMNs, inflammatory cytokine production(i.e. interleukin-1 ${\beta}$), and intracellular calcium mobilization in PMNs in rats.

• 한국임상수의학회지
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• 제23권4권
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• pp.393-399
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• 2006

전신마취제인 케타민은 흥분성 아미노산의 활성을 방해하는 N-methyl-D-aspartate (NMDA) 수용체의 비경쟁적인 길항제이다. 본 연구는 개 말초혈액 백혈구의 순간산소과소비현상(Oxidative burst activity; OBA)에 있어서 케타민의 효과를 검토하였다. 탐식세포의 OBA는 유세포 분석기로 분석하였다. 케타민을 말초혈액 다형핵백혈구(peripheral blood polymorphonuclear cells; PMN)와 monocyte-rich cells에 직접처리 하였을 때는 OBA가 감소하였으며, 또한 케타민을 처리한 말초혈액 단핵구세포(peripheral blood mononuclear cells; PBMC) 배양상층액에 의해서도 PMN과 monocyte-rich cells의 OBA가 감소하였다. 그러나 케타민을 처리한 PMN 배양상층액에 의해서는 탐식세포의 OBA에 있어서 아무런 변화가 없었다. 하지만 이러한 OBA의 감소는 latex beads를 넣어 탐식반응이 일어날 때만 측정되었다. 이상의 결과로부터 탐식반응이 일어나는 동안 케타민은 호중구와 단핵구와 같은 개 말초혈액 탐식구의 OBA에 있어 억제효과를 나타내었다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제39권3호
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• pp.228-235
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• 1992

연구배경 : 다형핵구는 폐조직세포들을 방어하는데도 중요한 역할을 하지만, 방어기전을 수행하는 과정에서 오히려 폐조직세포들의 손상을 초래하기도 한다. 그러나 다형핵구에 의한 폐조직세포 손상이, 폐조직세포들에 대한 다형핵구의 직접적인 세포득성작용에 의한 것인지, 혹은 다형핵구로부터 유리되는 어떤 세포독성 매개물질에 의한 것인치에 대해서는 아직 불확실하다. 한편 histamine은 알레르기성 질환 및 일부 호흡기질환의 병인에 중요한 매개물질로 작용하기도 하지만, 다형핵구의 여러 기능들을 조절하는 작용도 하는 것으로 알려져 있다. 따라서 저자를온 다형핵구에 의한 폐조직세포의 손상기전을 보다 명확히 이해하고, 이에 대한 히스타민의 영향을 연구하기 위해 본 연구를 시작하였다. 방법 : $^{51}Cr$을 부착시킨 A549 폐포세포와 4명의 건강한 비흡연자들의 말초 정맥혈로부터 분리한 다형핵구 혹은 다형핵구 상충액을 함께 배양하여 발생되는 폐포세포 손상정도를 $^{51}Cr$-release assay로 측정하여 비교하는 한편, 각각의 경우에 다형핵구를 histamine으로 전처치함으로써 나타나는 변화를 관찰하였다. 결과 : 1) 세포자극제의 종류와 농도 및 전처치한 히스타민의 농도에 따라 다소 차이는 있었지만, 전반적으로 다형핵구 자체에 의한 폐포세포 손상 정도보다는, 다형핵구상충액에 의한 폐포세포 손상 정도가 더 심한 경향을 보였다. 2) Histamine으로 전처치한 다형핵구 자체에 의한 폐포세포 손상 정도는, HBSS만으로 전처치한 다형핵 자체에 의한 폐포세포 손상 정도에 비해, 전처치한 histamine의 농도와 다형핵구 자극제의 종류 및 농도에 따라 억제 혹은 증강되는 일정치 않은 양상을 나타냈다. 3) Histamine으로 전처치한 다형핵구의 상층액에 의한 폐포세포 손상 정도는, HBSS만으로 전처치한 다형핵구의 상층액에 의한 폐포세포 손상 정도에 비해, 전반적으로 억제되는 경향이 있었다. 결론 : 이상의 연구결과 다형핵구에 의한 폐세포 손상은, 다형핵구의 폐포세포에 대한 직접적인 세포독성 작용보다는 활성화된 다형핵구로부터 분비되는 어떤 세포독성 물질들에 의해 매개되는 것으로 생각되며, histamine은 정상적으로는 다형핵구의 세포독성작용을 억제하나, 다형핵구와 폐포세포간의 상호작용시에는 주위의 미세환경에 따라 다르게 작용할 수도 있을 것으로 추측된다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제25권3호
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• pp.733-740
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• 1995

This investigation was undertaken to determine the relationship between the amount of polymorphonuclear leukocyte(PMN) enzyme myeloperoxidase(MPO) in gingival crevicular fluid(GCF) collected from active or control site and gingival disease status described by clinical indices(gingival index, papillary bleeding index, pocket depth, periotron unit). The results were as follows : 1. MPO activity/site was greater at active sites than at control sites. 2. According to increasing the clinical parameters, MPO/sites was higher statistically (P<0. 01, P<0.05). 3. High MPO(unit/site) groups was higher statistically than low MPO(unit/site) groups in various clinical parameters. 4. Correlation coefficients between MPO(unit/site) and GI, MPO($unit/{\mu}l$ GCF) and periotron unit were 0.4782, -0.5901, respectively.

• Restorative Dentistry and Endodontics
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• 제30권2호
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• pp.138-144
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• 2005

Enterococcus faecalis의 추출물을 성인의 말초혈액으로부터 얻은 인간의 백혈구를 이용해 Matrix Metalloproteinase-8 (MMP-8)의 생산에 미치는 영향에 대해서 알아보았다. Enterococcus faecalis를 배양한 뒤 초음파 분쇄를 하여 추출물을 얻어냈다. 이중 일부는 적정한 농도의 Ca(OH)_2$를 처리하였다. 이후 E. faecalis 추출물군, E. faecalis 추출물에 $Ca(OH)_2$ 를 처리한 군으로 분리하여 다형핵백혈구를 자극하여 MMP-8의 생산량을 측정하였다. MMP-8는 처리하지 않은 PMN group에서도 나타났고, PMN을 E. coli LPS로 자극시킨 경우 증가하였다 (p < 0.05) SEF group 들에서는 MMP-8의 생성량이 SEF 의 농도가 증가함에 따라 감소하였다 (p < 0.05). 따라서 Enterococcus faecalis는 PMN의 MMP-8 생산 억제 효과를 가진다고 볼 수 있다. $Ca(OH)_2$로 처리한 SEF 군의 경우 각기 다른 SEF 농도에서도 모두 MMP-8 생성량이 아무 처리도 하지 않은 PMN 군보다 많았다 (p < 0.05) . 하지만 각 군들 사이에 통계적 차이는 없었다 (p > 0.05).

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제1권2호
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• pp.131-136
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• 1993

In the present study, the effect of $HgCl_2$on the function of human peripheral polymorphonuclear leukocytes(PMNs) was examined. PMNs were isolated from human peripheral blood with density centrifugation in Ficoll-Paque. The cells were then incubated with $0.5{\sim}5{\mu}M\;HgCl_2$and glass adherence, chemotactic activity and erythrocyte-antibody rosette forming activity were measured. $HgCl_2$ decreased the function of PMNs in all three aspects tested. $HgCl_2$significantly diminished glass adherence(40.5 {\mu}M: 92{\pm}12%$ (percentage of control, $mean{\pm}$ S.D.); 41 {\mu}M: 46{\pm}11%,$ P<0.01; $3{\mu}M: 35{\pm}7%,$P<0.01;$5{\mu}M:49{\pm}10%,$ P<0.01). Similarly, significant differences were observed in chemotactic activity after $HgCl_2$treatment compared with control (control: $0.95{\pm}0.14mm; 0.5 {\mu}M: 0.91{\pm}0.11 mm; 1 {\mu}M: 0.77{\pm}0.16mm, P<0.05; 3{\mu}M: 0.61{\pm} 0.06mm, P<0.01; 5{\mu}M: 0.15{\pm}0.03 mm, P<0.01).$ Also, 4HgCl_2$decreased the percentage of rosette-forming PMNs, indicating diminished phagocytic activity of PMNs upon $HgCl_2$ exposure compared with control (control: $58{\pm}4%; 1{\mu}M: 53{\pm}4%, p<0.05; 3{\mu}M: 49{\pm}3%, P<0.01; 5{\mu}M: 46{\pm}3%, P<0.01).$ Cell viability was not antered after $HgCl_2$treatment (483{\pm}5%$ viability in control PMNs versus $81{\pm}8%$ viability in $5{\mu}M$ Hg-treated PMNs), suggesting that the impaired PMN function after $HgCl_2$treatment was not due to nonspecific cytotoxicity induced by $HgCl_2$. $HgCl_2$-induced decrease in the function of PMNs may have some implications in depressed host susceptibilityupon bacterial challenge after mercury exposure.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제8권1호
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• pp.43-50
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• 2004

Ischemia followed by reperfusion in the presence of polymorphonuclear leukocytes (PMNs) results in a marked cardiac contractile dysfunction. Amrinone, a specific inhibitor of phosphodiesterase 3, has an antioxidant activity against PMNs. Therefore, we hypothesized that amrinone could attenuate PMNs-Induced cardiac dysfunction by suppression of reactive oxygen species (ROS) produced fby PMNs. In the present study, we examined the effects of amrinone on isolated ischemic (20 min) and reperfused (45 min) rat hearts perfused with PMNs. Amrinone at $25\;{\mu}M$, given to hearts during the first 5 min of reperfusion, significantly improved coronary flow, left ventricular developed pressure (P<0.001), and the maximal rate of development of left ventricular developed pressure (P<0.001), compared with ischemic/reperfused hearts perfused with PMNs in the absence of amrinone. In addition, amrinone significantly reduced myeloperoxidase activity by 50.8%, indicating decreased PMNs infiltration (p< 0.001). Superoxide radical and hydrogen peroxide production were also significantly reduced in fMLP- and PMA-stimulated PMNs pretreated with amrinone. Hydroxyl radical was scavenged by amrinone. fMLP-induced elevation of $[Ca^{2+}]_i$ was also inhibited by amrinone. These results provide evidence that amrinone can significantly attenuate PMN-induced cardiac contractile dysfunction in the ischemic/reperfused rat heart via attenuation of PMNs infiltration into the myocardium and suppression of ROS release by PMNs.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제3권6호
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• pp.579-586
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• 1999

Complement-mediated neutrophil activation has been hypothesized to be an important mechanism of reperfusion injury. It has been proposed that C1 esterase inhibitor (C1 INH) may prevent the complement- dependent activation of polymorphonuclear leukocytes (PMNs) that occurs within postischemic myocardium. Therefore, The effect of C1 INH was examined in neutrophil dependent isolated perfused rat heart model of ischemia (I) (20 min) and reperfusion (R) (45 min). Administration of C1 INH (5 mg/Kg) to I/R hearts in the presence of PMNs $(100{\times}10^6)$ and homologous plasma improved coronary flow and preserved cardiac contractile function (p＜0.001) in comparison to those I/R hearts receiving only vehicle. In addition, C1 INH significantly (p＜0.001) reduced PMN accumulation in the ischemic myocardium as evidenced by an attenuation in myeloperoxidase activity. These findings demonstrate the C1 INH is a potent and effective cardioprotective agent inhibits leukocyte-endothelial interaction and preserves cardiac contractile function and coronary perfusion following myocardial ischemia and reperfusion.

• 한국임상수의학회지
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• 제20권3호
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• pp.294-301
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• 2003

개의 전층피부 창상에서 삼출물의 정도와 창상수축, 상피화, 그리고 치유에 대해 hydrocollodi(Duoderm/$\circledR$, HC)과 hydrogel(Nu-Gel$\circledR$, HG) occlusive dressing materials 의 효과를 비교하였다. 3쌍의 정사각형 전층피부 창상을 2${\times}$2cm 의 크기로 12마리 개의 몸통 등외측 면에(6개의 창상/한 마리) 만들었다. HC와 HG, 생리 식염수(대조창)를 무작위로 배분한 2개의 창상에 각각 적용하였다. 창상의 육안적 소견과 병리조직학적 소견을 4주 동안 평가하였다. 창상유발 7일 후, 비교 그룹 간의 평균 창상수축 정도, 평균 상피화율, 평균 창상 치유율에 유의성있는 변화가 관찰되지 않았다. 창상 유발 14일(P<0.01)과 21일(P<0.05) 후, HG 처치창의 평균 상피화율이 HC 처치창의 평균 상피화율과 대조창의 상피화율보다 유의적으로 더 높게 나타났다. 창상 유발 21일 후(P<0.05), HG 처치창의 창상 수축율이 HC 처치창의 평균 창상 수축율과 대조창의 평균 창상 수축율보다 유의적으로 더 높게 나타났다. 창상 유발 21일 후(P<0.02), HG 처치창의 창상 치유율이 HC 처치창의 평균 창상 치유율과 대조창의 평균 창상 치유율보다 유의적으로 더 높게 나타났다. 창상 유발 1, 4, 7일 후, HC 처치창과 대조창의 피하에 다형핵 백혈구의 심한 침착이 관찰되었고, HG 처치창의 피하에 중등도의 다형핵 백혈구의 침착이 관찰되었으나, HG 처치창, HC 처치창 간의 어떠한 유의적인 변화도 발견되지 않았다. 창상 유발 14일 후, HG 처치창에서 상피성 세포가 유의적으로 표면 위로 자라났고, 부종은 창상 밑 조직까지 감소하였으며, 육아조직은 교원질 섬유로 대체되었다. 창상 유발 21일 후, 다른 창상에 비해, HG 처치창은 유의적으로 창상 표면이 거의 재생성 상피로 덮였으며, 육아조직은 창상 유발 14일 후와 비교해서 유의적으로 교원질 섬유로 대체되었다. 위의 모든 결과에서 보듯이, 개에서 전층피부 창상의 처치 시 HG의 사용은 HC와 생리 식염수에 비해 창상치유 복구기의 치유 속도를 촉진하는 것으로 사료된다.