Genetic polymorphism and molecular authentication were investigated with the commercial medicinal herb, Peony (Paeonia spp.), using random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers. To identify the polymorphism of the RAPD patterns among plant origins, 20 different random primers were applied to the genomic DNA extracted from Paeonia spp. plants such as Paeonia (P.) lactiflora, P. officinale and P. japonica. Ten primers out of 20 primers could be used to discriminate the plant species in the same genus and 72 out of 81 scored DNA fragments (88.9%) generated with these primers were polymorphic. Especially, four primers, such as OPA1, OPA3, OP9, and OPA13, were useful to discriminate the plant origins among the species of Peony. In the results of cluster analysis using RAPD data obtained from the 10 primers, Peony (Paeonia spp.) plants used in this study were grouped into the two distinctive clusters, genetically. Herb medicine, especially P. lactiflora, were easily identified, when species-specific primers were applied to the investigation for discriminating herb medicine currently traded in domestic herb market, Kyungdongmart. Consequently, RAPD analysis was useful method to discriminate plant origins and the commercial medicinal herbs, Paeonia spp..
This study was carried out to clarify the genetic constitution of biochemical polymorphic loci controlling blood protein and enzymes as genetic rnarkers in Korean native chicken(KNG) population Blood samples were collected from 230 KNG representing three colored-lines(reddish-, yellowish- and blackish- brown) raised in Daejeon branch of National Livestock Research Institute. Eight blood marker loci, transferrin(Tf), post-albumin(Pas), albumin(Alb), amylase-1(Arny-1), es-terase-1(Es-1), alkaline phosphatase(Akp), catalase(Cat) and hemoglobin(Hh) were analyzed by using starch, agarose and polyacrylamide gel electrophoresis. Based on the gene frequencies of polymorphic marker loci, the genetic characteristics of KNF population was analyzed, and the genetic ariability within population was quantified. The genetic relationships between KNC and other native fowls or improved breeds were also estimated. The gene frequencies of Tf, Pas and AIb loci were similar to those of improved breeds among the seven biochemical polymorphic loci, while gene frequencies of Cat and Es-i loci were remarkably different between KNC and improved breeds. Gene frequencies of amy-i and Akp loci were similar to those of New Hampshire and Rhode Island Red and White Leghorn, respectively. However in comparison with other improved breeds, great differences were observed in gene frequencies of these loci The average heterozygosity, effective number of alleles and homogeneity index for the seven loci combined were estimated to be .334, 1.639 and .373, respectively. Based on the dendrogram and genetic distances, the KNC was genetically closer to New Hampshire, Plymouth Rock and Rhode Island Red breeds than to the White Leghorn breed.
Aerides vandarum and Vanda stangeana are two rare and endangered vandaceous orchids with immense floricultural traits. The intergeneric hybrids were synthesized by performing reciprocal crosses between them. In vitro germination response of the immature hybrid embryos was found to be best on half-strength Murashige and Skoog medium supplemented with 20% (v/v) coconut water/liquid endosperm from tender coconut. Determination of hybridity was made as early as the immature seeds or embryos germinated in vitro, using randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) markers. Out of 15 arbitrarily chosen decamer RAPD primers, two were found to be useful in amplification of polymorphic bands specific to the parental species and their presence in the reciprocal crosses. However, a decisive profile that can identify the reciprocal crosses could not be provided by RAPD. Amplification of the trnL-F non-coding regions of chloroplast DNA of the parent species and hybrids aided easy identification of the reciprocal crosses from the fact that maternal inheritance of chloroplast DNA held true for these intergeneric hybrids. Subsequent restriction digestion of the polymerase chain reaction (PCR) amplified trnL-F non-coding regions of chloroplast DNA also consolidated the finding. Such PCR-based molecular markers could be used for early determination of hybridity and easy identification of the reciprocal crosses.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.29
no.2
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pp.169-178
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2014
In this study, we investigated genetic diversity of 22 microsporidian isolates infecting tropical tasar silkworm, Antheraea mylitta collected from various geographical forest locations in the state of Jharkhand, India, using polymerase chain reaction (PCR)-based marker assay: random amplified polymorphic DNA (RAPD). A type species, NIK-1s_mys was used as control for comparison. The shape of mature microsporidians was found to be oval to elongate, measuring 3.80 to $5.10{\mu}m$ in length and 2.56 to $3.30{\mu}m$ in width. Of the 20 RAPD primers screened, 16 primers generated reproducible profiles with 298 polymorphic fragments displaying high degree of polymorphism (97%). A total of 14 RAPD primers produced 45 unique putative genetic markers, which were used to differentiate the microsporidians. Calculation of genetic distance coefficients based on dice coefficient method and clustering with un-weighted pair group method using arithmetic average (UPGMA) analysis was conducted to unravel the genetic diversity of microsporidians infecting tasar silkworm. The similarity coefficients varied from 0.059 to 0.980. UPGMA analysis generated a dendrogram with four microsporidian groups, which appear to be different from each other as well as from NIK-1s_mys. Two-dimensional distribution based on Euclidean distance matrix also revealed considerable variability among different microsporidians identified from the tasar silkworms. Clustering of few microsporidian isolates was in accordance with the geographic origin. The results indicate that the RAPD profiles and specific/unique genetic markers can be used for differentiating as well as to identify different microsporidians with considerable accuracy.
Epe, Isma Akter;Bir, Md. Shahidul Haque;Choudhury, Abul Kashem;Khatun, Asma;Aktar, Most Mohshina;Arefin, Md. Shamsul;Islam, Mohammed Aminul;Park, Kee Woong
Korean Journal of Agricultural Science
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v.48
no.2
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pp.283-297
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2021
Investigation of genetic diversity and molecular characterization in high yielding rice varieties is important for their identification. The experiment was conducted during 2016 - 2017 to analyse the genetic diversity of fifteen high yielding rice varieties in Bangladesh by using random amplification of polymorphic DNA (RAPD) markers. Polymorphism was revealed in 12 RAPD primers out of 30, whereas no other reaction was detected on the remaining 18 primers. The 40 out of 45 bands (88.89%) polymorphics were produced by the primers and ranged from 50 to 100%. The maximum number of polymorphic bands was produced by the primer OPB-18 whereas the lowest number of polymorphic bands belonged to OPC-12. The genetic similarity coefficients were determined with the RAPD data, which ranged from 0.47 to 0.94. The unweighted paired group of arithmetic means (UPGMA) dendrogram presented the studied rice varieties into two major clusters. Moreover, the value of Nei's genetic diversity is 0.26 and the Shanon information index is 0.41. The study produced distinct positions, suggesting that the genotypes were different from each other. The results indicated that these markers could be efficient for comparing the genetic relationships, patterns of variation, and measurement of genetic distance among rice varieties. Considering all of these results, RAPD analysis is found to be an effective tool for estimating the genetic diversity of different rice varieties. The outcomes of this research may contribute to the germplasm data of rice accessions and a future breeding program of rice genotypes.
The kallikrein-kinin system affects regulation of blood pressure, and genes encoding for the components of this system have been considered as good candidates for hypertension. To evaluate the relationship between genetic polymorphisms of candidate genes involved in this system and hypertension, we performed case-control studies using genetic markers in Korean normotensives and hypertensives, respectively. By association study, there was a marginal association with hypertension in AA genotype distribution of A1789G polymorphism in the hKLK1 gene (P=0.0754). Thus, this genetic polymorphism may weakly contribute to the susceptibility to hypertension in Koreans. We also observed that significant linkage disequilibrium exists among three polymorphic sites in the hKLK1 gene studied, suggesting that the three genetic polymorph isms can be useful as genetic markers in clinical association studies. Further studies using larger sample sizes and more genetic markers will be needed to clarify genetic influence of kallikrein-kinin system for hypertension.
For rapid and secure differentiation of P. infestans from other Phytophthora species, two fragments obtained from randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) profiles were selected as markers. Also, primers for in polymerase chain reaction (PCR) to detect P. infestans specifically were developed by analyzing the sequences of ITSII regions in rDNA of Phytophthora species. The primers, PISP-1 and ITS3 amplified a single. Fragment 450 bp of about in P. infestans, but not in other fungal or bacterial isolates. Annealing temperatures and template DNA quantities were varied for the optimization of PCR conditions. From the result of the PCR detection study, species-specific primers were selected under annealing temperatures ranging from 55$^{\circ}C$ to 61$^{\circ}C$, and template DNA levels ranging from 10 pg to 100 ng.
To understand the signal transduction pathway that leads to the activation of the wound-inducible proteinase inhibitor II (pin2) promoter. $F_2$ progenies of wound (-) mutant crossed with wild-type Arabidopsis plants were biochemically and genetically characterized. Wound (-) mutant was derived from transgenic Arabidopsis plants containing bacterial cytosine deaminase gene under the control of pin2 promoter. The cytosine deaminase assays indicated that wound (-) mutant is a dominant inhibitor of wound-inducibility as only 3 of the $20F_2$ progenies showed cytosine deaminase (CDase) activity, To construct a structural map of the wound (-) mutant chromosomal regions, cleaved, amplified polymorphic sequences (CAPS) markers that cover all Chromosomes were used. Chromosomal regions covered by three different CAPS markers could be candidates for further fine mapping of the location of the wound (-) mutation. g4026, RGA1 and ASA1 located at 84.9 on recombinant inbred (RI) map of chromosome I, at 1.75 on RI map of chromosome II, and 18.35 on RI map of chromosome V, respectively.
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.154-154
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2017
In accordance with the opening of the Korean rice market, this study was focused on establishment of database for discriminating the Korean rice varieties and imported brand rices using DNA markers. In this study, the SNP markers were developed using single nucleotide polymorphisms between the reference sequences of japonica and them of 40 brand rices which collected in Australia, China, Thailand, United States and Vietnam. The developed SNP markers were screened to a total of 360 rices including 320 Korean rice varieties and 40 imported brand rices. We selected polymorphic markers among Korean bred rive varieties and imported brand rices. The selected markers were classified into 3 grades. The markers of A grade produced DNA band in 360 rices of 30~40%, B grades produced in 40~60%, and C grades produced bands over 60% rices. First, we tried to set-up the discriminating system using the minimum SNP markers of A grade. Especially, a set of sixteen SNP markers could identify among Korean bred rice varieties and imported brand rices. Additionally, some SNP markers like NSb for Pib gene, JJ80-T for Pi5 and YL155/YL87 for Pita which linked to resistance genes to blast were used to fingerprinting system. These markers were set-up as multiplex set for enhancing the identification efficiency among rice varieties. Finally, the selected SNP markers would be used to the fluidigm assay to construct the database for elaborate discrimination of rice varieties.
Park, Cho Rong;Kim, Jeong Hee;Yu, Yong Man;Youn, Young Nam
Korean journal of applied entomology
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v.55
no.3
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pp.245-256
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2016
Elytra of Harmonia axyridis exhibit varied color patterns. In the present study, we deciphered the genetic basis for intraspecific diversity of elytra color patterns in H. axyridis, using amplified fragment length polymorphism (AFLP). Twenty-eight AFLP reactions were performed to generate a total of 2,741 bands. Of these, 20 bands were polymorphic for each color pattern. The polymorphic bands showed differences of genetic character among different color patterns of H. axyridis. Among them, ten candidate AFLP markers were color-linked. S1, S2, and S20 markers were detected in Succinea 1 and 2 variants of H. axyridis, whereas S3 and S5 were specifically detected in the Conspicua variant. S15, S18, and S19 were specific to the Succinea 2 variant. Polymerase chain reaction (PCR) products of these ten AFLP markers were sequenced. BLAST analysis of these sequences against the GenBank database revealed their homology to DNA fragments of unknown function. Based on the color-linked AFLP markers, sequence characterized amplified region (SCAR) markers were designed for PCR amplification of genomic DNA. Of the ten AFLP markers, five were successfully converted into SCAR markers, which could discriminate elytra color polymorphism in H. axyridis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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