The acetylene black/silica composite particles were prepared by a simple and fast method using polyethylenimine (PEI) as a coupling agent. The composite particles were produced via the following two steps; adsorption of PEI on the surface of acetylene black particles and synthesis of silica by sol-gel process. The morphology of the composite particles was a core-shell, and a large number of micropores was created after silica was synthesized on the acetylene black surface.
It has been found that a number of diseases are associated with mutations in the mitochondrial DNA. Therapeutic gene delivery to mitochondria has been suggested as a clinical option for these diseases. In this study, we developed a gene carrier to mitochondria by the conjugation of mitochondrial leader peptide (LP) to polyethylenimine (PEI). Mitochondrial LP conjugated PEI (PEI-LP) was synthesized with low molecular weight PEI (2,000 Da, PEI2K). Gel retardation assay showed that PEI2K-LP formed complexes at a 1.0/1 weight ratio. In addition, PEI2K-LP protected DNA from the enzymatic degradation for at least 60 min, while naked DNA was completely degraded within 20 min. PEI2K-LP was compared with LP conjugated high molecular weight PEI (25,000 Da, PEI25K) in terms of toxicity and delivery efficiency. MTT assay showed that PEI2K-LP had much lower cytotoxicity than PEI25K-LP to 293 cells. In addition, cell-free DNA delivery assay showed that PEI2K-LP delivered more DNA to mitochondria at a 1.8/1 weight ratio than naked DNA or PEI. This result suggests that PEI2K-LP may be useful for the development of mitochondrial gene therapy system with lower cytotoxicity.
Polyethylenimine (PEI) has been used as cationic polymers for efficient gene transfer without the need for endosomolytic agents. Various kinds of PEIs with different molecular weight were tested in order to investigate the effects of the molecular weight of PEI on the transfection efficiency and cell cytotoxicity. The ${\beta}-galactosidase$ expression $(pCMV-{\beta}-gal)$ plasmid was used as a model DNA. Complex formation between PEI and pDNA was assessed by 1% agarose gel electrophoresis method. Particle size and zeta-potential of complexes were determined by electrophoretic light scattering spectrometer. In vitro transfection efficiency was assayed by measuring ${\beta}-galactosidase$ activity. Cell cytotoxicity was determined by MTT assay. Particle sizes of the complexes became smaller on increasing molecular weights of PEI and N/P ratios. Surface potential of complexes was increased as the molecular weight of PEI increased. Transfection efficiency of $pCMV-{\beta}-ga1$ on the HEK 293 cells was greatest with PEI 25 K system but having the lowest cell viability. PEI with high molecular weight showed higher transfection efficiency and cell viability than PEI with low molecular weight.
Zeolites with excellent adsorption capacity of volatile organic compounds were attached onto inorganic fibers which were the raw materials of honeycomb-type adsorbers. The amounts of zeolite particles attached onto the fibers considerably increased by treating them with hydrochloric acid, sulfuric acid, or hydrofluoric acid. Various functional groups such as chloropropyl, aminopropyl and epoxy groups of silane compounds, and amine groups of polyethylenimine were employed as covalent linkage materials between the fibers and zeolite particles. The state of the fibers coated with zeolite particles was examined by scanning electron microscopy, and the amounts of zeolite particles bound to the fibers were estimated from their BET surface areas. The largest amount was obtained when polyethylenimine was employed as a linkage material. Polyethylenimine was the most effective for attaching zeolite particles onto the inorganic fibers among various linkers employed.
Lee Kyung Man;Kim In Sook;Lee Yong Bok;Shin Sang Chul;Lee Kang Choon;Oh In Joon
Archives of Pharmacal Research
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v.28
no.6
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pp.722-729
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2005
With the aim to improve the specificity and to reduce the cytotoxicity of polyethylenimine (PEI), we have synthesized the conjugates of the branched PEI (25 kDa) with transferrin. The trans-ferrin-PEI (TP) conjugates with five compositions were synthesized using periodate oxidation method and confirmed by FT-IR spectroscopy and gel permeation chromatography. The free amine contents of TP conjugates, which were able to condense and deliver DNA, increased as the amount of PEI increased. TP/DNA polyplexes were characterized by measuring gel elec-trophoresis, ethidium bromide fluorescence quenching, particle size and zeta potential of complexes. Complete complexation of the polyplexes was observed above the N/P ratio of 5 in TP/DNA, and above 3 in PEI/DNA, respectively. The zeta potential of the complexes decreased as the amount of transferrin in TP conjugates increased. Transfection efficiency of TP conjugates was evaluated in HeLa cell and Jurkat cell systems. Among the five compositions of TP conjugates, TP-2 system mediated a higher $\beta$-galactosidase gene expression than PEI system in Jurkat cell which was known to express elevated numbers of transferrin receptors. From the results of the cell viability based on MTT assay, TP conjugates showed lower cytotoxicity com-pared with the PEI system. We expect that the TP conjugate can be used efficiently as a non-viral gene delivery vector.
Kim, Hyun-Jung;Kim, Hyun-Ah;Choi, Joon-Sig;Lee, Min-Hyung
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.30
no.4
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pp.897-901
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2009
Heme oxygenase-1 (HO-1) is an anti-inflammatory and anti-apoptotic protein and has been applied to various gene therapy researches. However, constitutive expression of HO-1 may induce deleterious side effects. In this research, hypoxia inducible HO-1 expression plasmid, pEpo-SV-HO-1, was constructed with the erythropoietin (epo) enhancer and simian virus 40 (SV40) promoter to avoid these unwanted side effects. Dexamethasone conjugated polyethylenimine (PEI-Dexa) was used as a gene carrier. It was previously reported that dexamethasone protected cardiomyocytes from apoptosis under hypoxia. In this research, PEI-Dexa reduced the caspase-3 level in hypoxic H9C2 cardiomyocytes as a derivative of dexamethasone, suggesting that PEI-Dexa is an anti-apoptotic reagent as well as a gene carrier. pEpo-SV-HO-1 was transfected to H9C2 cardiomyocytes using PEI-Dexa and the cells were incubated under normoxia or hypoxia. HO-1 expression was induced in the pEpo-SV-HO-1 transfected cells under hypoxia. In addition, cell viability under hypoxia was higher in the pEpo-SV-HO-1 transfected cells than the pEpo-SV-Luc transfected cells. Also, caspase-3 level was reduced in the pEpo-SV-HO-1 transfected cells under hypoxia. In addition to the anti-apoptotic effect of PEI-Dexa, hypoxia inducible HO-1 expression by pEpo-SVHO- 1 may be helpful to protect cardiomyocytes under hypoxia. Therefore, pEpo-SV-HO-1/PEI-Dexa complex may be useful for ischemic heart disease gene therapy.
Kim, Hoseon;Byun, Jongwoong;Choi, In Tae;Park, Yun Hwan;Kim, Sok;Choi, Yoon-E
Korean Journal of Environmental Biology
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v.37
no.4
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pp.741-748
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2019
As the occurrence of harmful algal blooms (HABs) have become severe in precious water resources, the development of efficient harmful algae treatment methods is considering as an important environmental issue for sustainable conservation of water resources. To treat HABs in water resources, various conventional physical and chemical methods have been utilized and showed treatment efficiency, However, these methods can lead to discharging of cyanotoxins into the water bodies by chemical or physical algal cell lysis or destruction. Thus, to overcome this limitation, the development of safe HABs treatment methods is required. In the present study, adsorption technology was investigated for the removal of harmful algal species, Microcystis aeruginosa from aqueous phases. Industrial waste biomass, Corynebacterium glutamicum biomass was valorized as biosorbent (PEI-modified alginate/biomass composite fiber; PEI-AlgBF) for M. aeruginosa through immobilization with alginate matrix and cationic polymer (polyethylenimine; PEI) coating. The functional groups characteristic of PEI-Alg was determined using FT-IR analysis. By adsorption process used PEI-AlgBF, 52 and 67% of M. aeruginosa could be removed under the initial density of M. aeruginosa 200×104 cells mL-1 and 50×104 cells mL-1, respectively. As the increasing surface area of PEI-AlgBF, the removal efficiency was increased. In addition, we could find that adsorptive removal of M. aeruginosa has occurred without any M. aeruginosa cell lysis and destruction.
Kim, Eun-Joong;Kim, Young-Bong;Choi, Han-Gon;Shim, Chang-Koo;Oh, Yu-Kyoung
Journal of Pharmaceutical Investigation
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v.35
no.5
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pp.343-348
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2005
Recently, siRNA has been emerging as new therapeutic agents for various diseases such as cancers and infectious diseases. However, the evaluation for delivery systems for siRNA has not been fully done. In this study, we designed and delivered siRNA of oncogenic E6 and E7 proteins to several cell lines and tested the delivery efficiencies of various cationic nonviral delivery vectors. Of cationic delivery systems tested in this study, lipid-based Lipofectamine revealed higher delivery efficiency of siRNA to cervical cancer cell line, SiHa, compared to other delivery systems. Notably, the polyethylenimine, which showed the comparable delivery efficiencies in plasmid DNA, did not show significant delivery of siRNA in cervical cancer cells. These results indicate that the mechanisms involved in siRNA delivery might be different from those in plasmid DNA delivery, and that cationic lipid-based delivery vehicles deliver siRNA with higher efficiency to intracellular target sites.
Immobilized cells of Arthrohacter nitroguajacolicus ZJUTB06-99 capable of producing nitrilase were used for biotransformation of acrylonitrile to acrylic acid. Six different entrapment matrixes were chosen to search for a suitable support in terms of nitrilase activity. Ca-alginate proved to be more advantageous over other counterparts in improvement of the biocatalyst activity and bead mechanical strength. The effects of sodium alginate concentration, $CaCl_2$ concentration, bead diameter, and ratio by weight of cells to alginate, on biosynthesis of acrylic acid by immobilized cells were investigated. Maximum activity was obtained under the conditions of 1.5% sodium alginate concentration, 3.0% $CaCl_2$ concentration, and 2-mm bead size. The beads coated with 0.10% polyethylenimine (PEI) and 0.75% glutaraldehyde (GA) could tolerate more phosphate and decrease leakage amounts of cells from the gel. The beads treated with PEI/GA could be reused up to 20 batches without obvious decrease in activities, which increased about 100% compared with the untreated beads with a longevity of 11 batches.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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