Pleuratus ostreatus로부터 ascorbate oxidizing enzyme을 황산암모늄 침전, preparative polyacrylamide gel 전기영동, DEAE Sepharose CL-6B 이온교환크로마토그라피, Sephadex G-150 gel 여과크로마토그라피의 단계를 거쳐 순수분리 하였다. 이 효소의 분자량은 gel 여과크로마토그라피에 의하여 140,000 정도로, 효소의 소단위 분자량은 SDS-polyacrylamide gel 전기영동에 의하여 66,000 정도로 추정되었다. Isoelectric focusing에 의하여 이 효소는 6.0의 등전점을 갖는 것으로 밝혀졌고, 최적반응온도는 $85^{\circ}C$ 정도, 최적반응 pH는 5.2 정도인 것으로 나타났다. 본 효소는 L-ascorbic acid와 D-isoascorbic acid에 대하여 동일한 친화도를 갖는 것으로 보이며, Km값은 두가지 기질에 대해 모두 2.2µM 이였다.
근섬유의 생화학적 특성을 규명하기 위하여 red muscle과 white muscle로 부터 myofibril과 actomyosin을 각각 조제하고 그 생물활성 및 SDS-polyacrylamide gel전기 영동상을 비교하였다. 또한 동물의 중류에 따른 특성의 차이를 알아보기 위하여 소의 근육과 닭의 근육을 비교하였다. Myofibril의 SDS-polyacrylamide gel 전기 영동상으로 부터 red muscle은 white muscle보다 30K성분의 함량이 높다는 사실을 알았다. 소의 근육과 닭의 근육은 actomyosin ATPase활성의 이온강도의존성 및 ATPase activity-pH curve에서 차이를 보였다.
Clostidium botulinum type B가 생성하는 독소를 정제할 수 있는 방법을 연구하였다. 정제과정은 독소를 ammonium sulfate로 배양액에서 침전시켜 추출한후 Polymin P를 처리하여 핵산 및 기타 단백질을 최대한 제거한 후 Sephaex G-I00에서 gel fiItration을 시키고 DEAE-Sephadex로 이온교환 크로마토그래피를 시켰다. 이러한 과정으로 정제된 독소의 회수율은 17%였으며 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis 결과 하나의 선을 나타내 동질성을 증명하였다. 정제된 독소의 분자량은 163,000이였으며 $\beta$-mercaptoethanol을 사용하여 환원시킨 결과 분자량 106,000과 56,000의 하위 단위체로 분리되었다.
Viroid-like RNA molecules were detected from the low molecular weight RNAs isolated from the Korean peonies which showed typical viroid symptoms of epinasty and dwarfing. Low molecular weight RNAs including viroid RNA molecules were purified by the Qiagen anion exchange minicolumns. Viroid-like RNA molecules showed a single viroid specific band in the native polyacrylamide gel. They were separated into two bands in the denaturing gel conditions. The band of circular form of viroid-like RNAs was crossed over the horizontal band of the linear form of viroid-like RNA molecules in 0~8 M urea gradient gel under the denaturing conditions of 37$^{\circ}C$. The two circular forms of viroid-like RNA molecules were detected in the reverse polyacrylamide gel electrophoresis. The viroid-like RNA molecules purified from the peonies were supposed to be unidentified viroid RNA molecules.
The introduction of molecular biology methodologies to plant improvement programs offers an invaluable opportunity for extensive germplasm characterization. We have applied the developed technique of random amplification of polymorphic DNA(RAPD)to the analysis of evaluating genetic diversity among Korean wild Codonopsis lanceolata. A total of 340 polymorpic hands were gernerated on agarose- and polyacrylamide-gel by 19 primers of abitrary sequence. grouped by cluster analysis using sample matching coefficients of similarity. Among of the samples. the minimum genetic distance value was obtained between sample no. 1(Girisan) and no. 2(Girisan), and the largest value between sample no. 11(Sulaksan) and no. 17(Sulaksan).In separate cluster dendrograms based on agareose - and polyacryamide-gel. some differences were observed; In the case of agarose gel,41 samples could be devided into 7 groups at below about 0.44 level of distance. However they were divided into 6 gourps at below about 0.40 level of distance in the case of polyacrylamide gel. These results showed that polymophic data in agrose were not grouped to wild plant selected from each mountainous district except for wild plants selected from Sulaksan and Chiaksan. We believe that polyacrylamide-RAPD is a superior method for detecting DNA polymorphism compared to agarose-RAPD method.
Adsorption of cationic polyacrylamide dry strength resins onto the surface of papermaking fibers and fines is critical for their effective utilization. Since dry strength resins are frequently employed when recycled fibers containing a great deal of fines are used as a raw material, their adsorption characteristic onto the recycled fiber fines is of great importance. In this study, effects of recycling on adsorption characteristics of cationic polyacrylamide onto primary and secondary fines were examined. Never dried bleached hardwood kraft pulp was beaten and dried for recycling. In each recycling step the adsorption characteristic of a cationic PAM onto primary and secondary fines was evaluated by kjeldahl nitrogen analysis method. The influence of recycling on water retention value and carboxyl content along with the sheet density and tensile strength was examined. Secondary fines of never dried pulp adsorbed twice as much of C-PAM as the primary fines, however, the adsorption capacity of the secondary fines decreased rapidly during the course of recycling and showed lower adsorption capacily than primary fines.
The enzyme produced by Rhizopus japonicus was able to convert selectively ginsenoside-Rb$_1$which is the most abundant ginseng saponin, into ginsenoside-Rd which was known to be superior to ginsenoside-Rb$_1$pharmaceutically. The convertible enzyme was purified homogeneous from wheat bran culture of Rhizopus japonicus by ammonium sulfate fractionation and column chromatography of TEAE-cellulose, DEAE-Sephadex A-50, Sephadex G-150, Sepharose 2B. Specific activity of the purified enzyme was increased to a bent 96 folds and yield was appeared to be 11% of culture extract. Evidence for homogenity was obtained from polyacrylamide and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Molecular weight of the enzyme was estimated about 88, 000 daltons by Sephadex G-l50 gel filtration and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, and it did not consist of any subunit.
Application of polyacrylamide gel (PAG) instead of agar to solid cultures of Streptomyces spp. was studied. The improved media were prepared by 1) gelling 20 ml of 5% acrylamide in a glass petri dish at room temperature, 2) washing by running water for more than 8 hr to remove residual reaction reagents, 3) drying at 5$0^{\circ}C$ for 12 hr to make a gel film, 4) autoclaving at 121$^{\circ}C$ for 15 min, and 5) swelling gel for about 4 hr by adding sterile liquid medium. In PAG media there were no differences from the observation of morphological characteristics showing during the cellular differentiation on agar media, whereas the ability to utilize carbohydrates differed somewhat from agar media. Agar media thus were little favorable for biochemical tests which the growth was determined depending on the formation of colony, but washed PAG was superior to serve as a solidifying agent.
A fast and sensitive protein staining method in sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) using both an acidic dye, Coomassie Brilliant Blue R-250 (CBBR) and a basic dye, Neutral Red (NR) is described. It is based on a counter ion-dye staining technique that employs oppositely charged two dyes to form an ion-pair complex. The selective binding of the free dye molecules to proteins in an acidic solution enhances the staining effect of CBBR on protein bands, and also reduces gel background. It is a rapid staining procedure, involving fixing and staining steps with short destaining that are completed in about 1 h. As the result, it showed two to fourfold increase in sensitivity comparing with CBBR staining. The stained protein bands can be visualized at the same time of staining.
This study was performed to introduce recently developed polyvinylamine as a wet-end process and paper strength improving aids. As a retention and drainage aids, high cationic charged polyvinylamine was more effective at the BCTMP and ONP stock condition than LBKP stock condition. As a dry tensile strength aid, dual system of polyvinylamine with anionic polyacrylamide was the best at the LBKP or ONP stock conditions. On the other hand, polyvinyl amine alone was better than dual system of polyvinylamine with anionic polyacrylamide at the BCTMP condition. As a wet tensile strength aid, polyvinylamine single system and dual system of polyvinylamine with anionic polyacrylamide were good at LBKP, BCTMP and ONP stock conditions. However, poly(aminoamide)-epichlorohydrin resin was good at LBKP and ONP stock conditions but efficiency of poly(aminoamide)-epichlorohydrin resin was remarkably decreased at BCTMP stock condition.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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