• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제38권3호
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• pp.159-166
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• 2000

The present study intended to verify activities of cysteine proteinase of Pneumocystis carinii from rats and to purify the enzyme. In order to exclude the contamination of host-derived enzymes, concentrates of P. carinii was primarily treated with a mixture of proteinase inhibitors before Iysis of P carinii. A 68-kDa cysteine proteinase was finally purified from the crude extract of P. carinii by 4 sequential chromatographic methods. The enzyme showed an optimal activity at pH 5.5 in 0.1 M sodium acetate, and its activity was specifically inhibited by L-trans-epoxy-succinylleucylamido (4-guanidino) butane (E-64) and iodoacetic acid, suggesting that the enzyme is a cysteine proteinase. The 68-kDa proteinase weakly digested rnacrornolecules such as collagen, hemoglobin and fibronectin. The present study demonstrated the activity of cysteine proteinase at the 68-kDa band of P. carinii, and purified and characterized the molecule.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제34권3호
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• pp.177-184
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• 1996

흰쥐의 폐조직 절편에서 실험적으로 유발시킨 폐포자충을 검출하고자 조직내교잡법 (in situ hybridization)을 수행하였다 흰쥐는 methylprednisolone(데포-메드롤)을 10 mg/kg의 양으로 주 1회 피하주사하여 면역억제시켰고. 6 8 및 9주에 희생시켜 폐를 적출한 후 포르말린에 고정하였다. 폐포자충의 5S rRNA에 상보적인 22 base길이의 oligonucleotide probe를 주문제작(한국 생공)하였고 3' 부위에 biotin을 부착하였다 조직내교잡법은 Microp「obi stainin료 system과 manual capillary action법을 이용하여 1시간 이내에 수행하였다 폐포자충은 주로 폐포세포의 내강면. 폐포내 삼출물 및 세기관지의 분비물 등에서 검출되었다 6주 면역억제시 양성반응은 주 로 폐단면의 가장자리 부위에서 부분적으로 간찰되었으나. 8 내지 9주에서는 전체적으로 관찰되었 나. Grocott의 methenamine silver 염색법에 비하여 조직내 교잡법은 폐포자충을 신속하게 검출 할 수 있호 영양형의 검출에는 특히 유리하며. 다른 알려진 병원성 진균 및 원충류와의 교차반응이 없어. 실험적으로 유발시킨 폐포자충에 의한 폐렴의 진단에도 유용하게 사용될 수 있을 것으로 생각된다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제33권2호
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• pp.101-106
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• 1995

정상 한국 어린이의 폐포자충(hewowstiscwinii)에 대한 항체보유 양상을 파악하기 위하여 횐쥐 폐포자충의 조항원을 전기영동(SDS-PAGE)하고 면역이적(Western blot)을 시행하여 각 항원 분획에 반응하는 정상 한국 어린이 혈청에서의 IgG 항체 반응을 관찰하였다 전기영동으로 분리한 수용성 항원의 단백질 분획은 20-200 kDa 범위에서 20개 정도가 관찰되었다. 이들 분획 중에서 신생아의 혈청 15개와 정상 어린이 혈청 130개 합계 145개를 면역이적법으로 검사한 결과 40-55와 116 kDa 분획과 반응하였으나 미국 양성 표준혈청이 반응한 100 kDa 분획과는 반응하지 않았다 이 중에서 40-55와 116 kDa 하나 또는 두 분획에 대한 항체 양성률은 총 40.0%이었 고. 성별 구분이 가능한 남자 50명과 여자 48명에서 각각 56%와 33.3%의 양성률을 얻었다. 이 결과로 우리 나라에서 정상 어린이가 흰쥐 폐포자충 조항원 중 40-55와 116 kDa 분획과 반응하는 항체를 혈청 내에 가지고 있음을 확인하였다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제36권2호
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• pp.127-132
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• 1998

폐포자충증에 대한 이종항혈청의 예방 및 치료효과를 검증하고자 이 연구를 수행하였다. 횐쥐 (위스타)를 15마리씩 나누어 9개 실험군을 설정하고, 스테로이드 주사로 면역억제시켜 폐포자충의 감염을 유발하였다. 흰쥐 유래의 폐포자충 조항원을 토끼에 투여하여 얻은 면역혈청 중에서 IgG 항체만을 분리하여 실험에 사용하였다. 각 실헙군에 따라 면역억제 시작 2주전부터 억제 후 6주후 사이에 면역항체 주입을 시작하였고, 주 2회씩 7곤주 동안 주입하였다 대부분의 실험군에서는 면역항체를 일회에 0.4 ml (단백질량 0.976 mg)씩 주입하였고, 용량에 따른 예방 및 치료효과를 비교하기 위하여 0.2 ml (단백질량 0.488 mg)와 0.6 ml (단백질량 1.464 mg) 주입 실험군을 설정하였다. 그 결과 실험군별로 실험기간인 7틱주간 살아남고 폐에 세균감염이 없는 흰쥐 2-12마리에서 결과를 얻었다. 폐도말검사 결과 모든 개체에서 폐포자충이 확인되었고, 실험군에 따라 포낭형 수의 평균이 최저 13.5 (3군)에서 최고 52.5 (1군) 사이에 있었다. 통계학적인 검증 결과 기준이 되는 1군에 비하여 유의한 병원체의 감소가 확인된 실험군은 0.4 nU의 항체를 주 2회씩 7주간 주입한 3군, 5주간 주입한 4군, 3주간 주입한 5군과, 0.2 U를 7주간 주입한 8군이었다. 면역항체를 0.4 ml씩 9주간 주입한 2군과 항체를 0.6 ml씩 7주간 주입한 9군은 차이가 유의하지 않았다. 이 항체는 폐포자충의 표면에 있는 주항원 당단백질인 MSG (m3iorsurfaceycoprotein) 중에서 40-55, 92, 116, 200 kDa 분획과 주로 반응하였다. 이들 항원 분획이 숙주의 방어기전과 관련된 항체를 유발하는 항훤이며, 이 항원자극에 의하여 형성된 이종항체가 흰쥐의 폐포자충 감 염초기에 수동면역의 효과가 있어 예방이나 치료에 활용될 수도 있음을 확인하였다.