Cytodiagnosis of pleural and ascitic fluid is a commonly performed laboratory examination. Especially, positivity for malignant cells in effusion cytology is very effective and also presents the first sign of malignancy in unknown primary site of the tumor. We examined each 34 cases of pleural and ascitic fluid cytologic specimen diagnosed as metastatic tumor, which was selected among 964 pleural fluid cytology cases and 662 ascitic fluid cytology cases from September 1989 to June 1995. Among the pleural fluid cytology specimens examined, 34 specimens were positive in 27 patients. The lung was the most frequent primary site(44%), followed by the stomach (12%), lymphoreticular neoplasm(12%), pancreas(3%) and colon(3%). And the cases of unknown primary site with positive pleural biopsy alone were 24%. Among trio ascitic fluid cytology specimens examined, 34 specimens were positive in 29 patients. The most common primary neoplasms. were carcinomas of ovary(32%), stomach(22%), colon(6%), breast(3%), pancreas(3%), and lung(3%) and lymphoreticular neoplasms(3%) The metastatic tumor was predominantly adenocarcinoma type in both pleural(82%) and ascitic(91%) fluid. The study of metastatic adeno- carcinoma in effusion from lung, ovary, and stomach was undertaken to find distinctive features for the identification of the primary site. The smears of metastatic pulmonary adenocarcinoma had a tendency to show high grade pleomorphism and many large tight cell clusters, whereas that of the ovarian adenocarcinoma showed low grade pleomorphism with abundant intracytoplasmic vacuoles in relatively clear background. That of the stomach revealed the intermediate features.
Mutant form of the p53 gene product is abnormally accumulated in the nuclei of the tumor cells due to prolonged half life, and readily detected by immunohistochemical methods. To determine the positivity rate of p53 in body cavity fluid according the primary site and histological types of tumors and the utility of p53 immunostaining as an adjunct in the diagnosis of malignancy, we reviewed 69 effusions, including pleural effusion, ascitic fluid, and pericardial fluid, that were diagnosed as overt malignancy and 21 effusions of suspicious malignancy, immunohistochemistry was performed on paraffin-embedded cell blocks using a monoclonal antibody to p53 supressor gene product(Clone DO7) and a standard avidin-biotin complex technique with a citrate buffer antigen retrieval solution. The results were as follows; of the 46 pleural effusions with overt malignancy, 22 were immunopositive for p53 protein; of the 21 ascitic fluids with overt malignancy, 5 were positive for p53. Positivity rates according to the primary sites of tumors were 18 of 34(52.9%), 8 of 21(38.1%), 1 of 9(11.1%) cases of the tumors of the lung, GI tract, and ovary, respectively. According to the histologic types of lung cancer, 11 cases(61.6%) were positive out of 18 adenocarcinomas, 2 of 5 large cell undifferentiated carcinomas, and 1 of 2 small cell undifferentiated carcinomas. Of 21 cases of suspicious malignancy, 6 were positive for p53 and all of them(6/6) were confirmed as adenocarcinoma of the lung or GI tract. These findings indicate that p53 immunostaining using paraffin embedded cell block is useful diagnostic and prognostic marker in body fluid cytology although negative immunostaining does not exclude malignancy.
Body fluid Lactate dehydrogenase and its isoenzyme measurement was performed in 132 patients: 8 cases with peritonitis, 21 cases with malignant ascites, 43 cases with liver cirrhosis, 48 cases with tuberculous pleuritis, 12 cases with malignant pleural effusion respectively. Body fluid protein and glucose contents, red blood cell counts, white blood cell counts, cytologic examination were also performed as a comparative study. The results were as follows: 1. Measurement of total LD and protein amount could differentiate between transudate and exudate in the ascitic fluids. 2. In the malignant exudate of ascites and pleural fluid, the activity of LD2 isoenzyme was statistically increased compared with that of inflammatory exudate and the activity of LD4 isoenzyme was also increased compared with that of serum(P<0.05). 3. The inflammatory exudate of pleural fluid and ascites demonstrated the increase of LD5 isoenzyme activity stastistically compared with that of serum and malignant exudate(P<0.05). 4. A difference of total LD activity between malignant ascites and inflammatory ascites was significant statistically, while this was not observed in the pleural exudate. 5. Total LD and LD5 isoenzyme activity didn't correlated with the number of white blood cells in the exudate.
Malignant mesothelioma (MM) is a highly lethal neoplasm arising in pleura and the peritoneum and a rapid and accurate diagnosis is crucial for treatment of the disease. However, the sensitivity of cytological analysis using pleural or ascitic fluid is relatively low, yielding an accurate diagnosis in only $32{\sim}79%$ of cases. We tested the diagnostic value of epigenetic alterations in body fluid cytology as a supplement to conventional methods. Paraffin-embedded tissue blocks from 21 MM patients and associated body fluid cytology slides considered no evidence of malignancy were used to test for epigenetic alteration. Using methylation-specific PCR, we detected methylation of RASSF1A and p16 in 47.6% (10/21) of both surgically resected tumor samples, respectively. Body fluid samples of MM also showed abnormal methylation of RASSF1A and p16INK4a genes in 38.1% (8/21) and 33.3% (7/21) of cases. The concordance in the rates of RASSF1A and p16INK4a gene-methylation abnormalities determined from cytology samples and tissue samples were 61.9% (13/21) and 66.7% (14/21), respectively. Combining both genes increases the sensitivity of the test to 57.1 % (12 of 21) of cases. Our results suggest that testing for methylation abnormalities in selected individual genes or gene combinations has diagnostic value as an alternative or adjunct method to conventional cytological diagnosis.
Kim, Sang-Pyo;Bae, Ji-Yeon;Park, Kwan-Kyu;Kwon, Kun-Young;Lee, Sang-Sook;Chang, Eun-Sook;Kim, Chung-Sook
The Korean Journal of Cytopathology
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v.6
no.2
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pp.116-124
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1995
Eighty cases of malignant effusion were cytologically studied to elucidate the incidence of primary tumor site and cytologic characteristics of each tumor types. Eighty fluid specimens were composed of 43 ascitic, 35 pleural, and 2 pericardial effusion and primary tumor site had been confirmed by histology. The frequent primary sites were stomach(22 cases, 28%), lung(21 cases, 26%), ovary(11 cases, 14%), liver(7 cases, 9%), and breast (4 cases, 5%). The principal malignant tumors were adenocarcinoma (56 cases, 70%), squamous cell carcinoma (7 cases, 9%), liver cell carcinoma (7 cases, 9%), small cell carcinoma (4 cases, 5%), and non-Hodgkin's lymphoma (4 cases, 5%). The distinctive cytologic findings according to primary tumor types were as follows; the gastric adenocarcinomas were mainly characterized by isolated cells and irregular clusters sometimes with signet ring cells. Papillary serous cystadenocarcinoma of ovary showed frequently papillary clusters and occasional psammoma bodies. Breast carcinoma of ductal type showed cell balls with smooth margins. Colonic adenocarcinoma showed rather irregular clusters or palisading pattern of cylindrical cells. Metastatic squamous cell carcinoma, liver cell carcinoma, small cell carcinoma, and non-Hodgkln's lymphoma showed also characteristic features. These findings Indicate that the cytological features observed in the great majority of malignant effusion are similar to those of primary tumor types, which are very helpful to indentify the primary tumor site.
We report a case of malignant pericardial effusion originated from adenocarcinoma of the lung incidentally diagnosed by bone scintigraphy, prior to echocardiographic detection. A 76 year-old man with adenocarcinoma of the lung underwent Tc-99m MDP bone scintigraphy to evaluate skeletal metastasis. Anterior images of the chest of the bone scintigraphy unexpectedly showed diffuse increased activity in the region of the heart surrounded by an oval-shaped band of increased activity corresponding to the periphery of the cardiac silhouette (Fig. 1). There was no evidence of bony metastasis. Pericardial effusion was confirmed by echocardiography (Fig. 2) and malignant cells were revealed by subsequent microscopic examination of the pericardial fluid. Bone scintigraphy using Tc-99m phosphate compounds is commonly used to detect bony metastasis in cancer patients. Tc-99m phosphate compounds occasionally accumulate in extra-osseous sites, including $pleural^{1,2)},\;pericardial^{3,4)},\;and\;ascitic\;fluids^{5,6)}$. It has been reported that their accumulation in serous effusions should strongly suggest $malignancy^{1-6)}$. The exact mechanism for accumulation of Tc-99m phosphate compounds in serous effusions is unclear. Several investigators have proposed that the radiopharmaceuticals exuded directly from peripheral vessels to the serous cavity due to increased vascularity and vascular permeability, and bleeding by disruption of blood vessels due to cancerous $infiltration^{5,6)}$.
The C-reactive protein(CRP) from ascitic and pleural fluid was purified using calcium dependent affinity chromatography of CNBr activated Sepharose-4B covalently coupled to p-diazonium phenylphosphorylcholine(DPPC) and hydroxylapitite chromatography. Polyclonal antibody was prepared from rabbit by immunizing the purified CRP. Specific immunoglobulin G was isolated using affinity chromatography and coupled to microparticles. A sensitive microparticle-based immunoassay was developed to measure CRP within 3 mins. The detection range was between 0.5mg/dl) and 20mg/dl in serum, showing strong response in the range of 0.7~2.9 mg/dl, weak response in 5.0~13.2 mg/dl and zone phenomenon over 28mg/dl. The average value of CRP in 74 samples was 3.8mg/dl and most of the values were lower than 10mg/dl .The CRP values of serum samples were determined by our microparticle-based immunoassay, and were compared with those obtained using the other commercial products(B Co., France and I Co., Japan). Good correlations were shown between the values obtained by our developed microparticle-based immunoassay system and those by other commercial products. All performance characteristics evaluated make our developed microparticles-based immunoassay suitable for a simple, rapid, and reliable screening of CRP in serum.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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