Cytodiagnosis of pleural and ascitic fluid is a commonly performed laboratory examination. Especially, positivity for malignant cells in effusion cytology is very effective and also presents the first sign of malignancy in unknown primary site of the tumor. We examined each 34 cases of pleural and ascitic fluid cytologic specimen diagnosed as metastatic tumor, which was selected among 964 pleural fluid cytology cases and 662 ascitic fluid cytology cases from September 1989 to June 1995. Among the pleural fluid cytology specimens examined, 34 specimens were positive in 27 patients. The lung was the most frequent primary site(44%), followed by the stomach (12%), lymphoreticular neoplasm(12%), pancreas(3%) and colon(3%). And the cases of unknown primary site with positive pleural biopsy alone were 24%. Among trio ascitic fluid cytology specimens examined, 34 specimens were positive in 29 patients. The most common primary neoplasms. were carcinomas of ovary(32%), stomach(22%), colon(6%), breast(3%), pancreas(3%), and lung(3%) and lymphoreticular neoplasms(3%) The metastatic tumor was predominantly adenocarcinoma type in both pleural(82%) and ascitic(91%) fluid. The study of metastatic adeno- carcinoma in effusion from lung, ovary, and stomach was undertaken to find distinctive features for the identification of the primary site. The smears of metastatic pulmonary adenocarcinoma had a tendency to show high grade pleomorphism and many large tight cell clusters, whereas that of the ovarian adenocarcinoma showed low grade pleomorphism with abundant intracytoplasmic vacuoles in relatively clear background. That of the stomach revealed the intermediate features.
Mutant form of the p53 gene product is abnormally accumulated in the nuclei of the tumor cells due to prolonged half life, and readily detected by immunohistochemical methods. To determine the positivity rate of p53 in body cavity fluid according the primary site and histological types of tumors and the utility of p53 immunostaining as an adjunct in the diagnosis of malignancy, we reviewed 69 effusions, including pleural effusion, ascitic fluid, and pericardial fluid, that were diagnosed as overt malignancy and 21 effusions of suspicious malignancy, immunohistochemistry was performed on paraffin-embedded cell blocks using a monoclonal antibody to p53 supressor gene product(Clone DO7) and a standard avidin-biotin complex technique with a citrate buffer antigen retrieval solution. The results were as follows; of the 46 pleural effusions with overt malignancy, 22 were immunopositive for p53 protein; of the 21 ascitic fluids with overt malignancy, 5 were positive for p53. Positivity rates according to the primary sites of tumors were 18 of 34(52.9%), 8 of 21(38.1%), 1 of 9(11.1%) cases of the tumors of the lung, GI tract, and ovary, respectively. According to the histologic types of lung cancer, 11 cases(61.6%) were positive out of 18 adenocarcinomas, 2 of 5 large cell undifferentiated carcinomas, and 1 of 2 small cell undifferentiated carcinomas. Of 21 cases of suspicious malignancy, 6 were positive for p53 and all of them(6/6) were confirmed as adenocarcinoma of the lung or GI tract. These findings indicate that p53 immunostaining using paraffin embedded cell block is useful diagnostic and prognostic marker in body fluid cytology although negative immunostaining does not exclude malignancy.
1984년 10월부터 1986년 5월까지 영남대병원 임상병리과에 의뢰된 132예의 복수액과 늑막액의 진단적가치를 설정하기위한 연구로서 총 LD, LD 동위효소의 활성도, 생화학 및 혈액학적 검사, 세포진검사 등의 소견을 연구한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 복수액은 총 LD활성도 및 단백양으로 여출액의 감별이 가능하였다. 2. 복수액과 늑막액의 악성삼출액은 LD2가 염증성 삼출액에 비하여 증가되었고(P<0.01), 혈청에 비하여 LD4가 증가되어(P<0.05) 통계적 유의성을 나타내었다. 3. 늑막액과 복수액의 염증성 삼출액은 LD5가 증가하여 혈청과 악성삼출액에 비하여 의의성 있는(P<0.05) 증가를 나타내었다. 4. 복수액에서는 염증성 삼출액의 총 LD양은 악성삼출액에 비해 유의한 증가를 보여 총 LD활성도에 의한 삼출액의 구별이 가능하였으나 늑막액에서는 악성 삼출액과 결핵성 삼출액의 총 LD 활성도 차이의 통계적 유의성은 없었다. 5. 총 LD 및 LD5동위효소의 삼출액에서 백혈구수와 상관관계가 성립하지 않았다.
Malignant mesothelioma (MM) is a highly lethal neoplasm arising in pleura and the peritoneum and a rapid and accurate diagnosis is crucial for treatment of the disease. However, the sensitivity of cytological analysis using pleural or ascitic fluid is relatively low, yielding an accurate diagnosis in only $32{\sim}79%$ of cases. We tested the diagnostic value of epigenetic alterations in body fluid cytology as a supplement to conventional methods. Paraffin-embedded tissue blocks from 21 MM patients and associated body fluid cytology slides considered no evidence of malignancy were used to test for epigenetic alteration. Using methylation-specific PCR, we detected methylation of RASSF1A and p16 in 47.6% (10/21) of both surgically resected tumor samples, respectively. Body fluid samples of MM also showed abnormal methylation of RASSF1A and p16INK4a genes in 38.1% (8/21) and 33.3% (7/21) of cases. The concordance in the rates of RASSF1A and p16INK4a gene-methylation abnormalities determined from cytology samples and tissue samples were 61.9% (13/21) and 66.7% (14/21), respectively. Combining both genes increases the sensitivity of the test to 57.1 % (12 of 21) of cases. Our results suggest that testing for methylation abnormalities in selected individual genes or gene combinations has diagnostic value as an alternative or adjunct method to conventional cytological diagnosis.
Eighty cases of malignant effusion were cytologically studied to elucidate the incidence of primary tumor site and cytologic characteristics of each tumor types. Eighty fluid specimens were composed of 43 ascitic, 35 pleural, and 2 pericardial effusion and primary tumor site had been confirmed by histology. The frequent primary sites were stomach(22 cases, 28%), lung(21 cases, 26%), ovary(11 cases, 14%), liver(7 cases, 9%), and breast (4 cases, 5%). The principal malignant tumors were adenocarcinoma (56 cases, 70%), squamous cell carcinoma (7 cases, 9%), liver cell carcinoma (7 cases, 9%), small cell carcinoma (4 cases, 5%), and non-Hodgkin's lymphoma (4 cases, 5%). The distinctive cytologic findings according to primary tumor types were as follows; the gastric adenocarcinomas were mainly characterized by isolated cells and irregular clusters sometimes with signet ring cells. Papillary serous cystadenocarcinoma of ovary showed frequently papillary clusters and occasional psammoma bodies. Breast carcinoma of ductal type showed cell balls with smooth margins. Colonic adenocarcinoma showed rather irregular clusters or palisading pattern of cylindrical cells. Metastatic squamous cell carcinoma, liver cell carcinoma, small cell carcinoma, and non-Hodgkln's lymphoma showed also characteristic features. These findings Indicate that the cytological features observed in the great majority of malignant effusion are similar to those of primary tumor types, which are very helpful to indentify the primary tumor site.
We report a case of malignant pericardial effusion originated from adenocarcinoma of the lung incidentally diagnosed by bone scintigraphy, prior to echocardiographic detection. A 76 year-old man with adenocarcinoma of the lung underwent Tc-99m MDP bone scintigraphy to evaluate skeletal metastasis. Anterior images of the chest of the bone scintigraphy unexpectedly showed diffuse increased activity in the region of the heart surrounded by an oval-shaped band of increased activity corresponding to the periphery of the cardiac silhouette (Fig. 1). There was no evidence of bony metastasis. Pericardial effusion was confirmed by echocardiography (Fig. 2) and malignant cells were revealed by subsequent microscopic examination of the pericardial fluid. Bone scintigraphy using Tc-99m phosphate compounds is commonly used to detect bony metastasis in cancer patients. Tc-99m phosphate compounds occasionally accumulate in extra-osseous sites, including $pleural^{1,2)},\;pericardial^{3,4)},\;and\;ascitic\;fluids^{5,6)}$. It has been reported that their accumulation in serous effusions should strongly suggest $malignancy^{1-6)}$. The exact mechanism for accumulation of Tc-99m phosphate compounds in serous effusions is unclear. Several investigators have proposed that the radiopharmaceuticals exuded directly from peripheral vessels to the serous cavity due to increased vascularity and vascular permeability, and bleeding by disruption of blood vessels due to cancerous $infiltration^{5,6)}$.
환자의 복수와 늑막액으로부터 p-diazonium phenylphosphorylcholine(DPPC) coupled Separose-4B affinity chromatography와 hydroxylapatite chromatography를 실시하여 C-reactive protein (CRP)를 분리, 정제하였다. 정제된 CRP를 토끼에게 면역화하여 항혈청을 얻고 affinity chromatography를 하여 면역항체(IgG)를 분리하였다. 분리된 면역항체를 미립자에 감작시킨 후 미립자 응집반응에 의하여 3분내에 CRP를 측정할 수 있는 간이 면역 측정법을 개발하였다. 본 연구에서 개발된 CRP측정법의 검출범위는 0.5~20mg/㎗이며, 임상 시험 결과 0.7~2.9mg/㎗에서는 강한 응집 반응을, 5.O~l3.2mg/㎗에서는 약한 응집반응을 보였고 28mg/dl이상에서는 항원 과잉으로 인한(zone of Ag excess phenomenon) 위음성을 나타냈다. 74명의 환자 혈청을 대상으로 CRP의 농도를 조사한 결과 평균치는 3.8mg/dl이었으며 대부분의 환자에서는 10mg/dl 이하의 농도로 존재하였다. 그러므로 1차 판정시 음성을 나타낸 시료라도 혈청을 5~10배정도 희석하여 재분석한다면 오차없이 CRP 를 검출할 수 있었다. 환자 혈청을 검체로 하여 본 연구에서 개발한 면역측정법과 현재 수입 시판 중인 프랑스의 B사 제품과 일본의 I사 제품을 비교한 결과 좋은 상관관계를 보였다. 이와 같은 평가 분석을 통하여 볼 때 본 연구에서 개발한 간이 면역 측정법은 사용이 비교적 간편하며 신빙성이 있어 CRP를 스크리닝하는데 효과적임을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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