Kim, Seong-Im;Bae, In-Ha;Kim, Hae-Kwon;Kim, Sung-Rye
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.26
no.3
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pp.407-417
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1999
Objective: Mammalian follicle cells are the most important somatic cells which help oocytes grow, mature and ovulate and thus are believed to provide oocytes with various functional and structural components. In the present study we have examined whether cumulus or granulosa cells might playa role in establishing the plasma membrane structure of mouse oocytes during meiotic maturation. Design: In particular the differential resistances of mouse oocytes against chymotrypsin treatment were examined following culture with or without cumulus or granulosa cells, or in these cell-conditioned media. Results: When mouse denuded oocytes, freed from their surrounding cumulus cells, were cultured in vitro for $17{\sim}18hr$ and then treated with 1% chymotrypsin, half of the oocytes underwent degeneration within 37.5 min ($t_{50}=37.5{\pm}7.5min$) after the treatment. In contrast cumulus-enclosed oocytes showed $t_{50}=207.0$. Similarly, when oocytes were co-cultured with cumulus cells which were not associated with the oocytes but present in the same medium, the $t_{50}$ of co-cultured oocytes was $177.5{\pm}13.1min$. Furthermore, when oocytes were cultured in the cumulus cell-conditioned medium, $t_{50}$ of these oocytes was $190.0{\pm}10.8min$ whereas $t_{50}$ of the oocytes cultured in M16 alone was $25.5{\pm}2.9min$. Granulosa cell-conditioned medium also increased the resistance of oocytes against chymotrypsin treatment such that $t_{50}$ of oocytes cultured in granulosa cell-conditioned medium was $152.5{\pm}19.0min$ while that of oocytes cultured in M16 alone was $70.0{\pm}8.2min$. To see what molecular components of follicle cell-conditioned medium are involved in the above effects, the granulosa cell-conditioned medium was separated into two fractions by using Microcon-10 membrane filter having a 10 kDa cut-off range. When denuded oocytes were cultured in medium containing the retentate, $t_{50}$ of the oocytes was $70.0{\pm}10.5min$. In contrast, $t_{50}$ of the denuded oocytes cultured in medium containing the filtrate was $142.0{\pm}26.5min$. $T_{50}$ of denuded oocytes cultured in medium containing both retentate and filtrate was $188.0{\pm}13.6min$. However, $t_{50}$ of denuded oocytes cultured in M16 alone was $70.0{\pm}11.0min$ and that of oocytes cultured in whole granulosa cell-conditioned medium was $156.0{\pm}27.9min$. When surface membrane proteins of oocytes were electrophoretically analyzed, no difference was found between the protein profiles of oocytes cultured in M16 alone and of those cultured in the filtrate. Conclusions: Based upon these results, it is concluded that mouse follicle cells secrete a factor(s) which enhance the resistance of mouse oocytes against a proteolytic enzyme treatment. The factor appears to be a small molecules having a molecular weight less than 10 kDa.
Purpose : Lipoprotein(a) is a genetically determined risk factor for atherosclerotic vascular disease and is elevated in patients with renal disease. Especially the patients with nephrotic syndrome exhibit excessively high Lp(a) plasma concentrations. Also the patients with end-stage renal disease have elevated Lp(a) levels. But the mechanism underlying this elevation is unclear. Thus, in this study, by measuring the level of serum Lp(a) in common renal diseases in children, we hoped to see whether there would be a change in Lp(a) in renal diseases other than nephrotic syndrome. Then, we figured out its implications, and looked for the factors that affect the Lp(a) concentrations. Methods : A total of 75 patients(34 patients with hematuria of unknown etiology, 10 with hematuria and hypercalciuria, 8 with IgA nephropathy, 8 with poststreptococcal glomerulone phritis, 3 with $Henoch-Sch\"{o}nlein$ nephritis, 7 with urinary tract infection, and 5 with or- thostatic proteinuria) were studied. The control group included 20 patients without renal and liver disease. Serum Lp(a), total protein, and albumin levels, 24-hour urine protein and calcium excretions, creatinine clearance and the number of RBCs and WBCs in the urinary sediment were evaluated. Data analysis was peformed using the Student t-test and a P-value less than 0.05 was considered to be statistically significant. Results : LP(a) was not correlated with 24-hour urine calcium and creatinine. Lp(a) level had a positive correlation with proteinuria and negative correlation with serum albumin and serum protein. Among the common renal diseases in children, Lp(a) was elevated only in orthostatic proteinuria (P<0.05). Conclusion : Lp(a) is correlated with proteinuria, serum protein, and serum albumin, but not with any kind of specific renal disease. Afterward, Lp(a) needs to be assessed in patients with orthostatic proteinuria and its possible role as a prognostic factor could be confirmed.
Background: The purpose of the present study was to investigate the effect of exercise on the activities of antioxidant enzymes, super oxide dismutase(SOD), glutathione peroxidase(GPX) and catalase(CAT) of skeletal muscle(gastrocnemius) and liver in streptozotocin(STZ) induced diabetic rats. The malondialdehyde(MDA) concentration was also measured as an index of lipid poroxidation of tho tissues by exercise-induced oxidative stresses in diabetic rats. Material and Methods: Male Sprague-Dawley rats were randomly divided into control and STZ-induced diabetic rats. The STZ in citrate buffer solution was injected twice at S days intervals intraperitoneally(50, 70 mg/kg respectively). On the 28th day after the first STZ injection, the diabetic animals were randomly divided into pre- and post-exercise groups, The exercise was introduced to the rats of post-exercise group by treadmill running until exhaution with moderate intensity ($V_{O2max}$: 50-70%) of exercise. The duration of average running time was 2 hours and 19 minutes. Results: The blood glucose concentration was increased(p<0.001) and plasma insulin concentration was decreased(p<0.001) in the diabetic rats. The glycogen concentration in the muscle and liver was decreased by exhaustive exercise in the diabetic rats(p<0.001), In the skeletal muscle, the activities of GPX was increased(p<0.05) and the activities of SOD and CAT were not changed in the diabetic rats compare to those of the control rats. The activities of GPX was not changed by exercise but the activities of SOD(p<0.01) and CAT(p<0.01) were decreased by exercise in the diabetic rats, The concentration of MDA was not changed by exercise in diabetic rats, and the values of pre-exercise and post-exercise diabetic rats were not different from the value those of control rats, In the liver, the activities of SOD was decreased(p<0.01), and the activities of GPX and CAT were not changed in diabetic rats compared to the values of control rats, The activities of SOD, GPX and CAT were not changed by exercise in diabetic rats but the activity of SOD seemed to decrease slightly, The MDA concentration was increased in the diabetic rats compared to the values of control rats(p<0.001), but there was no change of MDA concentration by exercise in diabetic rats, Conclusions: In summary, exhaustive physical exercise did not seem to impose oxidative stress on the skeletal muscle because of due to oxygen free radicals, regardless of the decrease in SOD and CAT in the diabetic rats, In liver tissue, the tissue damage by oxidative stress was observed in diabetic rats but the additional tissue damage by exhaustive physical exercise was not observed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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