In order to improve practical utility of agro-microorganisms (AMs) which had been cultured and disseminated to promote plant growth and to control crop diseases, 51 isolates of AMs were collected from 18 agricultural extension centers in local government and screened for multi-functions such as antifungal activity, activities of phosphorus solubilization, IAA and siderophore production, nitrogen fixation, and hydrolytic enzyme activity. Finally we selected one isolate showing good antifungal activity and multi-functions related to plant growth and disease control. The selected isolate, Paenibacillus polymyxa CW, showed good inhibitory effect against plant pathogens, Pyricularia gresea, Colletotrichum acutatum, Fusarium oxysporum, Phomopsis sp., Aspergillus niger, Rhizoctonia solani and Phytophthora capsici. Suppressive effect of P. polymyxa CW against the used plant pathogens except for R. solani was much higher than that of P. polymyxa AC-1 storing in National Academy of Agricultural Science. We found P. polymyxa CW isolate showed good activity in siderophore and IAA formation, and nitrogen fixation. With P. polymyxa CW isolate, siderophore formation activity was similar to that of P. polymyxa AC-1, but IAA formation and nitrogen fixation activity was much higher than that of P. polymyxa AC-1. However neither P. polymyxa CW nor P. polymyxa AC-1 showed hydrolytic enzyme (chitinase, pectinase and cellulase) activity. The treatment of P. polymyxa CW with culture suspension of different cell density ($10^8$, $10^7$. $10^6$ cfu/ml) showed that the highest density reduced incidence of red pepper powdery mildew by 68.3% after 10 days of application. As application density of P. polymyxa CW was decreased, its control efficacy was proportionally decreased. In addition, when P. polymyxa CW was treated to control tomato powdery mildew at the same concentrations and their control effects were investigated after 7 days of inoculation, disease incidence was 0.03, 19.5, 45.7%, respectively, compared to 56.3% that of untreated check. Like red pepper powdery mildew, increase of application density of P. polymyxa CW resulted in increase of its control efficacy proportionally. P. polymyxa CW showed a density-dependent control efficacy against red pepper and tomato powdery mildews. Therefore we think that mode of action of the antagonist for suppressing two powdery mildew diseases might be antibiosis and density of more than $10^8cfu/ml$ was needed to control effectively the two diseases. On this basis, we think that P. polymyxa CW can be a promising control agent for suppressing powdery mildews of red pepper and tomato.
Kim, Han-Soo;Park, Jiyong;Cho, Sung-Won;Park, Kee-Hyun;Lee, Gung-Pyo;Ban, Soo-Jung;Lee, Chang-Roo;Kim, Chung-Sun
Journal of Microbiology
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v.41
no.3
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pp.196-201
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2003
The object of this study was to characterize Bacillus strains GB-017 and GB-0356, which produce antifungal substances, especially for plant pathogens. In addition, this study was undertaken to characterize the culture conditions required for the production of antifungal substances and to document some of the properties of the antifungal substance produced by these soil-isolated strains. Strains GB-0365 and GB-017 were found to be bacillus-shaped, gram-positive and motile, and to inhibit Botrytis cineria, Fusarium sp., Pythium sp., and Rhizoctonia solani. Antagonistic activity was maintained up to pH 9.0, and the antifungal activity was stable to heat at 80$^{\circ}C$ for 1 h. Antifungal substances were separated and purified using ion exchange and adsorption columns including WK-I0(H$\^$+) (pH 7.0), HP20 column (pH 3.0) and IPA (pH 3.0). and IPA. Its UV absorption spectrum showed major peaks at 231 and 259 nm, corresponding to polyene and lactone. A fast atom bombardment mass spectrum (FAB MS) showed a highest peak at 441 m/z and major peaks at 192, 205, and 370 m/z.
An, Tae Jin;Park, Myung Soo;Jeong, Jin Tae;Kim, Young Guk;Kim, Yong Il;Lee, Eun Song;Chang, Jae Ki
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.27
no.6
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pp.404-411
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2019
Background: In September 2017, wilting and rhizome rot symptoms were observed on Atractylodes macrocephala Koidz. in Jecheon-si and Eumseong-gun. This study was carried out to isolate hitherto unidentified pathogenic fungi from A. macrocephala and to test the pathogenicity of isolated fungi against Atractylodes spp. genus such as A. macrocephala, A. japonica, and their interspecific hybrids. Methods and Results: The diseased plants were washed with running tap water, and the boundary between the healthy area and the diseased area was cut while the pathogens were isolated by growing cultures from the diseased areas on Phytophthora semi-selective medium. The internal transcribed spacer (ITS) region of the isolates was used in this study for identification. Test plants were cultivated in the glasshouse at 20℃ - 30℃ for 4 months and then used for pathogenicity test. The pots with plants inoculated with mycelial plugs and zoospores were placed at 25℃ for 48 h in a dew chamber where relative humidity was above 95%, and then moved into the glasshouse at 20℃ - 30℃. The presence or absence of pathogenicity of the strains was determined by evaluating the symptom of plant wilting. The inoculation test was performed in three replicates with a non-treated control. Conclusions: On the basis of results of ITS sequence analysis, the strains isolated from the diseased plants was identified as Phytophthora sansomeana. Biological assay using test plants confirmed the pathogenicity of P. sansomeana against Atractylodes macrocephala. This is the first report of rhizome rot in A. macrocephala caused by P. sansomeana.
Background: Korean ginseng (Panax ginseng Meyer) is a perennial herb prone to various root diseases, with Phytophthora cactorum being considered one of the most dreaded pathogens. P. cactorum causes foliar blight and root rot. Although chemical pesticides are available for disease control, attention has been shifted to viable, eco-friendly, and cost-effective biological means such as plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) for control of diseases. Methods: Native Bacillus amyloliquefaciens strain HK34 was isolated from wild ginseng and assessed as a biological control agent for ginseng. Leaves from plants treated with HK34 were analyzed for induced systemic resistance (ISR) against P. cactorum in square plate assay. Treated plants were verified for differential expression of defense-related marker genes using quantitative reverse transcription polymerase chain reaction. Results: A total of 78 native rhizosphere bacilli from wild P. ginseng were isolated. One of the root-associated bacteria identified as B. amyloliquefaciens strain HK34 effectively induced resistance against P. cactorum when applied as soil drench once (99.1% disease control) and as a priming treatment two times in the early stages (83.9% disease control). A similar result was observed in the leaf samples of plants under field conditions, where the percentage of disease control was 85.6%. Significant upregulation of the genes PgPR10, PgPR5, and PgCAT in the leaves of plants treated with HK34 was observed against P. cactorum compared with untreated controls and only pathogen-treated plants. Conclusion: The results of this study indicate HK34 as a potential biocontrol agent eliciting ISR in ginseng against P. cactorum.
Tobamoviruses are the major viral pathogens of tomato and bell pepper. The preliminary results showed that Acibenzolar-Smethyl(ASM; S-methylbenzo(1,2,3) thiadiazole-7-carbothiate) pre-treatment to tomato and tobacco plants reduces the concentration of Tomato mosaic tobamovirus(ToMV) and Tobacco mosaic tobamovirus(TMV) in tomato and bell pepper seedlings, respectively. Pre-treatment of the indicator plant(Nicotiana glutinosa) with the ASM followed by challenge inoculation with tobamoviruses produced a reduced number and size of local lesions(67 and 79% protection over control to TMV and ToMV inoculation, respectively). In order to understand the mechanism of resistance the gene expression profiles of antiviral genes was examined. RT-PCR products showed higher expression of two viral resistance genes viz., alternative oxidase(AOX) and RNA dependent RNA polymerase(RdRp) in the upper leaves of the ASM-treated tomato plants challenge inoculation with ToMV. Further, the viral concentration was also quantified in the upper leaves by reverse transcription PCR using specific primer for movement protein of ToMV, as well as ELISA by using antisera against tobamoviruses. The results provided additional evidence that ASM pre-treatment reduced the viral movement to upper leaves. The results suggest that expressions of viral resistance genes in the host are the key component in the resistance against ToMV in the inducer-treated tomato plants.
Lee, Hyun;Park, Myung Soo;Park, Ji-Hyun;Cho, Hae Jin;Park, Ki Hyeong;Yoo, Shinnam;Lee, Jun Won;Kim, Nam Kyu;Lee, Jin Sung;Park, Jae Young;Kim, Changmu;Kim, Jae-Jin;Lim, Young Woon
Mycobiology
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v.48
no.3
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pp.184-194
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2020
Macrofungi play important roles in forest ecology as wood decayers, symbionts, and pathogens of living trees. For the effective forest management, it is imperative to have a comprehensive overview of macrofungi diversity in specific areas. As a part of the National Institute of Biological Resources projects for discovering indigenous fungi in Korea, we collected macrofungi in Gayasan National Park from 2017 to 2018. These specimens were identified based on morphological characteristics and sequence analysis of internal transcribed spacer (ITS) or the nuclear large subunit rRNA (LSU) region. We discovered 17 macrofungi new to Korea: Butyrea japonica, Ceriporia nanlingensis, Coltricia weii, Coltriciella subglobosa, Crepidotus crocophyllus, Cylindrobasidium laeve, Fulvoderma scaurum, Laetiporus cremeiporus, Lentinellus castoreus, Leucogyrophana mollusca, Marasmius insolitus, Nidularia deformis, Phaeophlebiopsis peniophoroides, Phanerochaete angustocystidiata, Phlebiopsis pilatii, Postia coeruleivirens, and Tengioboletus fujianensis. We described their detailed morphological characteristics.
Ahn, Geum Ran;Ahn, Hong Seok;Kwon, Hyuk Woo;Ko, Han Gyu;Kim, Seong Hwan
Journal of Mushroom
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v.14
no.4
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pp.168-173
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2016
Four fungal species, during indoor air monitoring for fungi that possibly affect the field testing of a newly bred shiitake cultivar in cultivation houses located in Cheongyang, Chungnam Province and Jangheung, Jeonnam Province. Of these species, two are known to be plant pathogens and the other two are saprobes but potent contaminators in the mushroom cultivation environment. This study reports the morphological characteristics and phylogenetic relationships of these four species based on nucleotide sequences of the internal transcribed spacer (ITS) and 18S rDNA region, including their known information.
Pythium species (Pythiales, Oomycetes) are well known as the algal pathogen that causes red rot disease in Pyropia / Porphyra species (Bangiales, Rhodophyta). Accurate species identification of the pathogen is important to finding a scientific solution for the disease and to clarify the host-parasite relationship. In Korea, only Pythium porphyrae has been reported from Pyropia species, with identifications based on culture and genetic analysis of the nuclear internal transcribed spacer (ITS) region. Recent fungal DNA barcoding studies have shown the low taxonomic resolution of the ITS region and suggested the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 (cox1) gene as an alternative molecular marker to identify Pythium species. In this study, we applied an analysis of both the ITS and cox1 regions to clarify the taxonomic relationships of Korean Pythium species. From the results, the two closely related Pythium species (P. chondricola and P. porphyrae) showed the same ITS sequence, while the cox1 marker successfully discriminated P. chondricola from P. porphyrae. This is the first report of the presence of P. chondricola from the infected blade of Pyropia yezoensis in Asia. This finding of the algal pathogen provides important information for identifying and determining the distribution of Pythium species. Further studies are also needed to confirm whether P. chondricola and P. porphyrae are coexisting as algal pathogens of Pyropia species in Korea.
Lee, Hojun;Kim, Seul I;Park, Sojung;Nam, Eunwoo;Yoon, Hyunjin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.28
no.11
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pp.1896-1907
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2018
Salmonellosis is commonly associated with meat and poultry products, but an increasing number of Salmonella outbreaks have been attributed to contaminated vegetables and fruits. Enteric pathogens including Salmonella enterica spp. can colonize diverse produce and persist for a long time. Considering that fresh vegetables and fruits are usually consumed raw without heat treatments, Salmonella contamination may subsequently lead to serious human infections. In order to understand the underlying mechanism of Salmonella adaptation to produce, we investigated the transcriptomics of Salmonella in contact with green vegetables, namely cabbage and napa cabbage. Interestingly, Salmonella pathogenicity island (SPI)-1 genes, which are required for Salmonella invasion into host cells, were up-regulated upon contact with vegetables, suggesting that SPI-1 may be implicated in Salmonella colonization of plant tissues as well as animal tissues. Furthermore, Salmonella transcriptomic profiling revealed several genetic loci that showed significant changes in their expression in response to vegetables and were associated with bacterial adaptation to unfavorable niches, including STM14_0818 and STM14_0817 (speF/potE), STM14_0880 (nadA), STM14_1894 to STM14_1892 (fdnGHI), STM14_2006 (ogt), STM14_2269, and STM14_2513 to STM14_2523 (cbi operon). Here, we show that nadA was required for bacterial growth under nutrient-restricted conditions, while the other genes were required for bacterial invasion into host cells. The transcriptomes of Salmonella in contact with cabbage and napa cabbage provided insights into the comprehensive bacterial transcriptional response to produce and also suggested diverse virulence determinants relevant to Salmonella survival and adaptation.
With the appearance of pathogenic microorganisms, which were resistant to free chlorine, the significant attention to the necessity of powerful alternative disinfection methods such as ozone, chlorine dioxide, LTV irradiation to inactivating pathogens has been increased in water treatment. Among these alternative disinfection methods, ozone is well known as strong biocidal method and the usage of ozone is also increasing in Korea. However, in Korea, there has been no report on the quantitative study of Cryptosporidium parvum with ozone and its evaluation in advanced drinking water treatments. This study reports on the methodology for predicting the ozone inactivation of Cryptosporidium parvum by ozone disinfection in advanced drinking water treatment. The method is based on the fact that a specific inactivation level of microorganisms is achieved at a unique value of ozone exposures, independent of ozone dose and type of water, and quantitatively described by a delayed Chick-Watson model. The required values ${\bar{C}}T$ for 2 log inactivation of Cryptosporidium parvum was $6.0mg/L{\cdot}min$ and $15.5mg/L{\cdot}min$ at $20^{\circ}C$ and $5^{\circ}C$, respectively. From this obtained Cryptosporidium parvum inactivation curves and calculated ${\bar{C}}T$ values of advanced drinking water treatment water in Korea with FIA (Flow injection alaysis), we can predict that water treatment plant can achieve a 1.1~1.8 log inactivation and 0~0.4 log inactivation at $20^{\circ}C$ and $5^{\circ}C$, respectively. This methodology will be useful for drinking water treatment plants which intend to evaluate the disinfection efficiencies of their ozonation process without full scale test and direct experiments with Cryptosporidium parvum.
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