Cheong, Hyeonsook;Paudyal, Dilli Parasad;Jun, Jae Yeoul;Yeum, Cheol Ho;Yoon, Pyung Jin;Park, Chan Guk;Kim, Man Yoo;So, Insuk;Kim, Ki Whan;Choi, Seok
Molecules and Cells
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제20권2호
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pp.235-240
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2005
Extracts of pine needles (Pinus densiflora Sieb. et Zucc.) have diverse physiological and pharmacological actions. In this study we show that pine needle extract alters pacemaker currents in interstitial cells of Cajal (ICC) by modulating ATP-sensitive $K^+$ channels and that this effect is mediated by prostaglandins. In whole cell patches at $30^{\circ}C$, ICC generated spontaneous pacemaker potentials in the current clamp mode (I = 0), and inward currents (pacemaker currents) in the voltage clamp mode at a holding potential of -70 mV. Pine needle extract hyperpolarized the membrane potential, and in voltage clamp mode decreased both the frequency and amplitude of the pacemaker currents, and increased the resting currents in the outward direction. It also inhibited the pacemaker currents in a dose-dependent manner. Because the effects of pine needle extract on pacemaker currents were the same as those of pinacidil (an ATP-sensitive $K^+$ channel opener) we tested the effect of glibenclamide (an ATP-sensitive $K^+$ channels blocker) on ICC exposed to pine needle extract. The effects of pine needle extract on pacemaker currents were blocked by glibenclamide. To see whether production of prostaglandins (PGs) is involved in the inhibitory effect of pine needle extract on pacemaker currents, we tested the effects of naproxen, a non-selective cyclooxygenase (COX-1 and COX-2) inhibitor, and AH6809, a prostaglandin EP1 and EP2 receptor antagonist. Naproxen and AH6809 blocked the inhibitory effects of pine needle extract on ICC. These results indicate that pine needle extract inhibits the pacemaker currents of ICC by activating ATP-sensitive $K^+$ channels via the production of PGs.
아시아 지역 널리 자생하고 있는 소나무는 항암, 조골세포의 콜라겐 합성 등 다양한 연구결과가 보고된 바 있으나, 항산화 활성에 따른 파골세포의 증식 및 분화에 대한 연구는 미비한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 적송잎 추출물별 항산화 활성과 RAW 264.7 세포를 이용하여 적송잎 추출물이 파골세포의 증식과 TRAP 활성에 미치는 영향에 대해 검토하였다. 적송잎 추출물의 총 폴리페놀 함량을 측정한 결과, 열수에탄올 추출물이 140.54 mg/g으로 가장 높은 함량을 나타내었으며, 그 다음은 에탄올 추출물, 열수 추출물, 열수헥산 추출물, 헥산 추출물 순으로 나타났다. SOD 유사 활성을 검색한 결과, 열수, 에탄올 및 열수에탄올 추출물이 proanthocyanidin의 47.31%보다 높은 SOD 유사활성을 보였다. MTT assay에 의한 파골세포의 생존율을 측정한 결과, 에탄올 추출물 경우 $1{\mu}g$/mL의 농도에서 54.04%로 가장 낮은 생존율을 나타내었고 적송잎 헥산 추출물 또한 70% 이하의 생존율을 나타내어, 각 추출물 간의 생존 비율에 차이는 있으나 모든 적송잎 추출물에 있어 파골세포의 성장을 억제하는 결과가 나타났다. 적송잎 추출물의 파골세포 분화억제 효과를 알아보기 위해 TRAP staining 한 결과, 모든 추출물에서 대조군보다 낮은 TRAP 활성이 나타났다. 특히 열수 및 에탄올 추출물의 경우, $1{\mu}g$/mL의 낮은 농도에서 각각 67.8 및 66.3%로 파골세포 분화를 감소시켰으나, 헥산 추출물은 약 80%의 분화 감소율을 나타내었다. $100{\mu}g$/mL의 고농도 첨가군에서는 오히려 에탄올 추출물의 파골세포 분화 감소율이 낮게 나타나, 저농도에서의 효과가 우수한 것으로 나타났다. 따라서 항산화 활성을 가지는 적송잎 추출물이 파골세포의 증식과 분화를 억제하여 골흡수 억제에 효과를 준다는 것이 확인되었으며, 구체적인 기작 연구와 in vivo 연구가 병행된다면 노화 및 골다공증 예방과 관련된 기능성 천연소재로 개발이 가능하리라 사료된다.
To develope natural food preservatives of pine needle (Pinus densiflora Seib et Zucc.) extract, pine needle sap, ethanol and ether extracts were prepared for investigation of antimicrobial activities against food-related bacteria and yeasts. All extracts exhibited growth inhibiting activities for most of microorganisms tested. However, in general, growth inhibiting activities were higher in ethanol extract than in sap or ether extract. Minimum inhibitory concentrations (MIC) of ethanol extract for Lactobacillus casei, Pseudomonas aeruginosa or Escherchia coli were as low as 0.1 mg/ml, whereas MIC of sap or ether extract for most bacteria and yeasts were 0.25-0.8mg/ml, indicating that the ethanol extract showed the antimicrobial activity by 2.5 $\sim$8 times higher than the sap and ether extract. The antimicrobial activity of the ethanol extract was reduced by heating or alkali treatment. Moreover, growth of Pseudomonas aeruginosa was completely inhibited within 24 hours by the addition of at least 50ppm of ethanol extract. These findings suggest that pine needle, specially the ethanol extrat may play a role for natural food preservatives.
Formaldehyde (FA) is an important industrial chemical, but it can cause allergic reactions, sick building syndrome and so on. It has also been observed to cause cancer in scientific studies using laboratory animals, and it even causes cancer in humans. Natural products such as ginseng and pine needle containing complicated mixtures of organic chemicals are widely used in the world, because their effective components are responsible for some pharmacological activities including antioxidative effect, anticancer effect. We investigate the effect of Korean ginseng (GE), pine needle extract (PE) and combined GE and PE (cNPE) on mouse lung injury by FA exposure. GE, PE and cNPE was directly transported to pulmonary cells through respiratory organ by nebulizer inhalation. In the case of FA exposure, the pulmonary structure was damaged and its function became abnormal. However, cNPE-FA, GE-FA, and PE-FA treated groups showed similar with the control group compared with FA group. Among them, GE was proved to be more effective than any other extracts. These results demonstrate that natural product extracts could protect pulmonary structure and function against FA exposure.
병원 내 감염의 주된 원인균으로 알려진 황색포도상구균(S. aureus)과 항생제 내성 황색포도상구균(PRSA, MRSA)에 대해 항균활성이 우수한 천연 항균성 물질을 검색하기 위해 적송잎을 대상으로 열수-헥산(HWH), 열수-에탄올(HWE), 헥산, 에탄올 및 열수 등으로 획득된 추출물들로 항균활성을 조사하였다. 헥산, 에탄올, 열수-헥산, 열수-에탄올 추출물들은 그람양성 대표세균인 고초균(B. subtilis), 황색포도상구균 표준균주, 항생제 내성균주인 PRSA 및 MRSA에 대해서 항균활성을 나타내었으며, 특히 MRSA (ATCC 33591) 균주에 대해 다른 균주들 보다 높은 항균활성을 나타냈다. 열수 추출물은 황색포도상구균 표준균주 및 MRSA에서만 항균활성을 나타냈지만, 항균활성은 가장 높아 50 mg/ml의 농도에서 33 mm의 생육저해환을 나타냈다. 각 균주들에 대한 생장의 최소저해 농도(MIC)는 HWH 및 HWE 추출물이 모두 0.05 mg/ml의 농도로 가장 낮았고, 열수추출물이 0.5 mg/ml의 농도였으며, 에탄올 추출물은 5 mg/ml의 가장 높은 농도를 나타냈다. 모든 추출물들은 $121^{\circ}C$에서 20분간의 열처리 후에도 항균활성이 유지되었으므로 열에 대해 안정한 물질임을 알 수 있었다. 본 연구결과로 식품산업에서 솔잎 추출물을 천연 항균제로 사용할 수 있을 것으로 기대할 수 있다.
본 실험은 알코올 투여한 흰쥐를 대상으로 콩나물, 솔잎, 표고버섯과 오가피 추출물의 알코올 탈수소효소 활성과 항산화 효과를 비교하기 위해 수행되었다. 약 200g 정도의 Sprague-Dawley계 쥐들을 정상군, 알코올 단독투여군, 4가지 식물추출물 투여군으로 나우어서, 각 식물추출물을 알코올을 주입하기 전 8일 동안 200mg/kg b.w. 을 하루에 한번 경구투여하였다. 모든 동물은 알코올을 주입하고 90분 후에 도살시켰다. 콩나물과 솔잎추출물 투여군의 혈중 알코올 농도는 알코올 단독투여군, 표고버섯, 오가피군 보다 유의적으로 낮게 나타났다. 또한 콩나물과 솔잎 추출물 투여군의 알코올 탈수소효소활성은 알코올 단독투여군과 표고버섯, 오가파군보다 유의적인 증가를 보여주었다. Catalase 활성은 식물추출물 투여군이 알코올 단독투여군보다 다소 높게 나타났지만, 유의성 있는 차이는 보이지 않았다. 이러한 결과는 흰쥐에게 일회성으로 알코올을 다량 투여했을 때 알코올 탈수소효소가 catalase보다 우선적으로 알코올 대사에 반응함을 보여준다. 모든 식물추출물 투여군들의 지질과산화와 glutathione peroxidase 활성은 알코올 단독투여군보다 유의적으로 낮게 나타났다. 이 결과는 본 실험에 사용된 식물추출물들이 알코올의 산화에 대한 항산화 효과를 가진다는 것을 보여주며, 특히 콩나물과 솔잎 추출물 투여군이 알코올 탈수소효소의 활성증가오 항산화에 대한 효과가 높음을 보여주었다.
A study was carried out to evaluate the values of roughages available in Korea on feed intake and digestibility of Korean native goats and consequently to apply its results to the feeding system of Korean goats as a basic information. The results are as follows. 1. The protein contents in Alfalfa and Acacia leaf were 17.6 and 16.3% respectively 11.7 and 6.8% higher than orchardgrass and pine needle. Ether extract tom pine needle was about two times higher than other roughage sources which are 9.2%. 2. Dry matter intake per day in goats fed alfalfa, acacia leaf and orchardgrass was higher (P < 0.05) at 590.3, 543.8 and 496.58 respectively and 217.lg in pine needle. 3. Dry matter intake per basal weight (DM glkg of B$W^{0.75}$ and DM g/kg of BW%) was higher in goats fed acacia leaf at 68.5 and 3.5% respectively than any other treatments goats fed pine needle showed the lowest (P< 0.05) dry matter intake at 28.6 and 1.5% respectively. 4. Dry matter digestibility was highest (PcO.05) in alfalfa fed goats at 61.4%. Dry matter digestibilities in orchardgrass, pine needle and acacia leaf were 58.0, 46.8 and 46.6% respectively. 5. Total digestible nutrients were highest (P< 0.05) in Alfalfa fed goats at 59.5%. Total digestible nutrients in orchardgrass, pine needle and acacia leaf were 54.2, 50.7 and 47.7% respectively. 6. In conclusion, the value of orchardgrass as feed for goats was as excellent as alfalfa and although acacia leaf had a less value than alfalfa in goats, it is considered to be used as a protein supplement in diets for goats due to its high content of protein and excellent palatability. Intake of pine needle in Korean goats in this study was satisfactory and it indicates the possibility of its use as a supplement in diets for goats. However, fkther investigation will be necessary particularly on the deleterious effects of ether extracts of pine needle
Kim, Nam-Young;Jang, Min-Kyung;Lee, Dong-Geun;Yu, Ki-Hwan;Jang, Hye-Ji;Kim, Mi-Hyang;Kim, Sung-Gu;Yoo, Byung-Hong;Lee, Sang-Hyeon
Nutrition Research and Practice
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제4권1호
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pp.16-22
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2010
Flavonoids are known to be effective scavengers of free radicals. In particular, proanthocyanidins are flavonoids that possess cardiovascular protection, antioxidative activities, and immunomodulatory activities. Here, we evaluated proanthocyanidin contents in the total polyphenolic compounds of pine needle extracts prepared by hot water, ethanol, hexane, hot water-hexane (HWH), and hot water-ethanol (HWE). Analysis of each extract indicated that the ethanol extract contained the highest proanthocyanidin concentration. The HWH and hexane extracts also contained relatively high concentrations of proanthocyanidin. On the other hand, proanthocyanidin content analyses out of the total polyphenolic compounds indicated that the HWH extract contained the highest content. These results suggest that HWH extraction is a suitable method to obtain an extract with a high level of pure proanthocyanidins and a relatively high yield. The HWH extract possessed superior activity in diverse antioxidative analyses such as 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), ferrous ion chelating (FIC), and ferric-ion reducing power (FRAP) assays. In addition, upon assessing the effects of the pine needle extracts on macrophages (Raw 264.7 cell), the HWH extract exhibited the highest activity. In this study, we discerned an efficient extraction method to achieve relatively pure proanthocyanidins from pine needles and evaluated the biological functions of the resulting extract, which could potentially be used for its efficacious components in functional food products.
솔잎은 항산화력이 우수한 것으로 알려져 있으며, mouse calvaria 유래의 MC3T3-E1 osteoblastic cell은 골세포의 세포 활성과 관련된 연구에서 유용하게 이용되어왔다. 따라서 본 연구에서는 MC3T3-E1 세포를 이용하여 적송잎 용매별 추출물이 세포 증식에 미치는 영향과 ALP 활성 및 조골세포의 골 형성을 위한 필수 인자인 콜라겐 합성의 영향에 대해 검토하였다. 적송잎 추출물의 농도(1, 10 50, $100\;{\mu}g/ml$)에 따른 조골세포 성장에 미치는 영향을 MTT assay로 분석한 결과, proanthocyanidin의 경우 $50\;{\mu}g/ml$ 이상 첨가한 군에서 대조군보다 급격한 증식률을 나타내었다. 에탄올 추출물을 첨가하였을 때 유의적인 증식률이 나타나지 않은 반면, 적송잎 헥산 추출물 처리군에 있어서는 $10\;{\mu}g/ml$ 농도 이상에서 유의적으로 세포증식이 촉진되었다. 적송잎 추출물이 ALP 활성에 미치는 영향을 조사한 결과, 적송잎 추출물이 조골세포의 ALP의 활성을 증가시켜 조골세포의 분화에 영향을 줄 가능성이 제시 되었다. 또한 적송잎의 열수 및 에탄올 추출물보다 헥산 추출물에서 조골세포의 ALP 활성이 증가하여 적송잎의 ALP 활성에 영향을 주는 성분은 수용성 성분보다 지용성 성분인 것으로 추측되었다. 적송잎 추출물이 조골세포의 콜라겐 합성에 미치는 실험결과에서 헥산 추출물뿐만 아니라 열수 추출물에서도 높은 콜라겐 합성능력을 나타내었다. 따라서 단일성분에 의한 것보다 복합적 성분들의 상승작용에 의해 조골세포의 콜라겐 합성이 촉진된 것으로 추측할 수 있다. 적송잎 추출물이 조골세포의 증식, ALP 활성 및 콜라겐 합성을 촉진하여 골 생성에 영향을 줄 수 있는 것이 확인되었으며, 그에 대한 구체적인 기작 연구를 위하여 향후 분자생물학적인 차원에서의 in vitro 및 in vivo 실험을 통한 구체적인 연구가 수행되어야 할 것으로 사료된다.
Pinus densiflora belongs to the Pinaceae family which has been widely used for health promoting purposes as folk medicine or as a food. Various curative effects of different parts of the pine have been reported including as a remedy for carcinoma. We examined the effects of pine needle water extracts (PNE) on macrophage function using peritoneal macrophage, pre-osteoclast bone macrophage (Raw 264.7 cell) and brain macrophage (C6 microglia). When peritoneal macrophages were treated with various concentrations of PNE ($1{\sim}100{\mu}g/mL$) for 24 hours, phagocytic activity was significantly increased, whereas it had no effect on tumoricidal activity and NO production. However, the treatment of Raw 264.7 with PNE resulted in the enhancement of NO production at high concentration ($100{\mu}g/mL$). Furthermore, the treatment of C6 with PNE increased the production of NO in a concentration-dependent manner, whereas PNE suppressed NO production in $LPS/IFN-{\gamma}-stimulated$ microglia. These results suggest that PNE has differential immunomodulatory effects on macrophages.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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