About 450 phytopathogenic fungal cultures were stored in sterile distilled water ar room temperature by the sterile water storage method, which has been known as a simple, convenient, and long-term storage method of microorganisms. After 12 months, viability and pathogenicity of the stored isolates were tested. Among 205 tested, 175 isolates (84.5%) survived. Of these, Rhizoctonia solani, Botrytis cinerea, Pyricularia oryzae, Phytophthora infestans, and Sclerotinia sclerotiorum showed relatively lower survival rate; 92%, 74.1%, 62.5%, 45.8%, and 30%, respectively. Twenty seven isolates belonging to seven important phytopathogenic fungi were tested for pathogenicity, and all isolates tested maintained pathogenicity until at least 12 months after storage.
Serratia marcescens co-cultured with various phytopathogenic fungi, including Rhizopus stolonifer, Helminthosporium allii, Pyricularia oryzae, Fusarium oxysporium and Collectothricom cassiicola, in an LB- agar medium containing 1.5% swollen chitin, significantly inhibitied fungal growth. Fungal hyphae grew rapidly outward from the culture dish center, but the hyphal extensions of the pathogenic fungi were significantly inhibited in a perimetric contact area with S. marcescens. This was especially evident in pathogenic fungi which have a high chitin content in their cell walls. The extracellular chitinase activities of S. marcescens were increased seven fold by the addition of 1.5% swollen chitin to the LB-broth, compared to chitinase activities in a culture medium without chitin. The type of induction was dependent on the various forms of chitin used. When the culture supernatant of S. marcescens or the chitinases of Streptomyces griceus purchased from Sigma Chemical Co., were incubated with the mycelium of F. oxysporium, the mycelium gradually burst as cultivation time progressed and completely lysed after incubation for 2 days. On the other hand, E. coli extract did not hydrolyze the F. oxysporium mycelium at all. These data showed that the chitinolytic activities of S. marcescens play important roles in the biochemical control of phytopathogenic fungi.
Lim, Seong Mi;Yoon, Mi-Young;Choi, Gyung Ja;Choi, Yong Ho;Jang, Kyoung Soo;Shin, Teak Soo;Park, Hae Woong;Yu, Nan Hee;Kim, Young Ho;Kim, Jin-Cheol
The Plant Pathology Journal
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제33권5호
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pp.488-498
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2017
The aim of this study was to identify volatile and agardiffusible antifungal metabolites produced by Bacillus sp. G341 with strong antifungal activity against various phytopathogenic fungi. Strain G341 isolated from four-year-old roots of Korean ginseng with rot symptoms was identified as Bacillus velezensis based on 16S rDNA and gyrA sequences. Strain G341 inhibited mycelial growth of all phytopathogenic fungi tested. In vivo experiment results revealed that n-butanol extract of fermentation broth effectively controlled the development of rice sheath blight, tomato gray mold, tomato late blight, wheat leaf rust, barley powdery mildew, and red pepper anthracnose. Two antifungal compounds were isolated from strain G341 and identified as bacillomycin L and fengycin A by MS/MS analysis. Moreover, volatile compounds emitted from strain G341 were found to be able to inhibit mycelial growth of various phytopathogenic fungi. Based on volatile compound profiles of strain G341 obtained through headspace collection and analysis on GC-MS, dimethylsulfoxide, 1-butanol, and 3-hydroxy-2-butanone (acetoin) were identified. Taken together, these results suggest that B. valezensis G341 can be used as a biocontrol agent for various plant diseases caused by phytopathogenic fungi.
본 연구에서 부산, 창원, 제주도 일대에서 채취한 토양으로부터 분리한 균주를 이용하여 식물 병원성 곰팡이에 대해서 길항작용을 나타내는 것을 확인하였으며, 또한 분리 균주의 경우 세균성 균주에 대해서도 길항작용을 나타내는 것을 확인하였다. 이러한 길항작용은 Bacillus 속이 생산하는 2차 대사산물인 siderophore, 항생물질, 세포 외 효소 활성 등에 의해서 식물 병원성 곰팡이에 대한 길항작용을 나타내는 것으로 보이며, 특히 분리 균주로부터 생산되는 세포 외 효소는 식물 병원성 곰팡이의 세포벽에 용균작용 일으킴에 따라 세포벽을 분해하여 식물 병원성 곰팡이의 생장을 저해할 것으로 생각된다. 또한 질소 고정능 및 IAA 생성능을 통해 식물 생장 촉진 및 식물 병원성 곰팡이 성장을 억제시킬 수 있는 생물학적 제제로서 식물재배에 도움을 줄 것으로 기대된다. 최종 선별된 Bacillus subtilis ANGa5, Bacillus aerius ANGa25, Bacillus methylotrophicus ANGa27를 이용하여 식물 병원성 곰팡이 방제 및 식물 생장촉진활성을 가지는 새로운 생물학적 제제로서 이용 가능성을 제시한다.
본 연구에서는 시중에 판매되고 있는 3종의 농용 항생제를 대상으로 Pectobacterium carotovorum, Pseudomonas syringae pv. actinidiae, Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis, C. michiganensis subsp. capsici 및 Xanthomonas arboricola pv. pruni를 포함하는 식물병원세균 91 균주에 대한 저항성을 평가하였으며 다양한 농도의 발리다마이신에이 단독성분에 의한 흡광도 측정을 통해 분광학적으로 균주 생장을 확인하였다. 주성분으로 옥시테트라사이클린과 스트렙토마이신이 합제된 농용 항생제의 경우 안전사용기준 농도의 100배에서도 모든 균주가 생장하지 않았다. 그러나 스트렙토마이신이 주성분인 농용 항생제의 경우 안전사용농도와 그 10배의 농도에서 91개 균주 중 각각 4%와 2%에서 생장하는 것으로 나타났다. 또한 발리다마이신에이의 경우에는 안전사용농도와 그 10배, 100배의 농도에서 각각 97%, 93%, 73%의 균주가 저항성을 가지는 것으로 확인되었으며 그 중에서도 특히 P. carotovorum이 발리다마이신에이에 가장 높은 저항성을 가지는 것으로 나타났다. 발리다마이신에이 단독성분을 통한 저항성을 확인한 결과, 농용 항생제 발리다마이신에이에 저항성을 가지는 균주와 가지지 않는 균주 간의 경향성은 보이지 않는 것으로 나타났다. 그러므로, 식물병원세균에서 항생제 저항성 발달을 이해하기 위한 추가적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.
Fungicide treatment is the most important method for the control of plant diseases caused by phytopathogenic fungi. But fungicide resistant strains have appeared in many phytopathogenic fungi. Until now, molecular mechanisms of fungicide resistance such as mutation of target protein, overproduction of target enzyme and detoxification of fungicide have been designated. Recently, it was demonstrated that active efflux of fungicides mediated by ATP-binding cassette (ABC) transporters also contributes to fungicide resistance in several filamentous fungi, such as Aspergillus nidulans, Penicillium digitatum and Botrytis cinerea.(중략)
Methanol extracts from 51 fruits were tested for their fungicidal activities against six phytopathogenic fungi in a greenhouse. The efficacy varied with both the plant pathogen and fruit species used. At 10 and 5 mg/pot, methanol extracts of Poncirus trifoliata peel and seed gave over 80% control values against Pyricularia grisea, and strong fungicidal activities against Rhizoctonia solani were showed from the extracts of Citrus paradisi peel and Punica granatum leaf. In a test with Botrytis cinerea at 5 mg/pot, the extracts of C. sinensis seed and D. kaki leaf produced potent fungicidal activities, and the extracts of C. crenata peel and leaf, Ch. sinensis seed, P. trifoliata peel, and Z. jujuba leaf had strong fungicidal activities. At 5 mg/pot, strong fungicidal activities were produced in the extracts of P. trifoliata peel and seed against Phytophthora infestans and in the extracts of P. ussriensis var. macrostipes fruit and seed, C. crenata peel, C. crenata leaf, C. paradisi peel, P. trifoliata peel, P. granatum peel, and Z. jujuba leaf against Puccinia recondita. In a test with E. graminis, potent activities at 10 mg/pot were produced from the extracts of Ch. sinensis seed, C. sinensis seed, P. trifoliata leaf, P. ussriensis var. macrostipes fruit and seed, and Vitis vinifera seed. In the control effect of seven extracts against B. cinerea strains resistant to carbendazim, procymidone, and diethofencarb, extracts of C. crenata peel and leaf, Ch. sinensis seed, and P. trifoliata peel were highly effective against all strains of B. cinerea. Furthermore, potent fungicidal activities were produced from the extracts of C. sinensis seed and D. kaki leaf against the SSR, SRR, and RRS, and Z. jujuba leaf against the SSR and RRS strains. As a naturally occurring fungicide, these fruit-derived materials could be useful as new fungicidal products against phytopathogenic fungi.
살충성진균 Metarhizium anisopliae가 시들음병을 일으키는 Fusarium oxysporum, 잿빛곰팡이 병을 일으키는 Botrytis cinerea, 겹둥근무늬병을 일으키는 Alternaria solani 등에 대하여 항진균활성을 갖는지 알아보았다. 그 결과 Plate상에서 균사생장저해 실험과 inhibition rate실험을 했을 때 항진균활성이 검정되었으며 또한 YPD배지에서 배양된 M. anisopliae로부터 얻은 배양여액을 식물병원균에 30%농도로 첨가했을 때 이들의 포자발아율은 B. cinerea, F. oxysporum에서 각각 21.5%(control: 88.2%), 53.0%(control: 78.6%)로 감소하였으며 발아개시 시간도 8시간 정도 지연되었다. 또한 현미경을 통한 미세구조관찰에서는 10% 배양여액을 첨가했을 때 F. oxysporum의 균사로부터 후막포자가 생성되고 생장저해가 일어나는 것이 확인되었다. 이상의 결과로부터 M. anisopliae의 항진균활성은 fungistatic effect를 나타냄을 알 수 있었다.
118 종 국내산 식물체의 에탄올 추출물을 대상으로 기주식물상의 온실실험조건에서 6 종의 주요 식물병원균에 대해 방제효과를 조사한 결과 살균효과는 식물의 종류 및 채집부위에 따라 커다란 차이를 보였다. 118 종 207 샘플을 2,000ppm 농도로 처리하였을 때 두 종 이상의 병원균에 90% 이상의 방제효과를 나타 낸 식물체는 측백나무 잎, 육계나무 잎, 비목나무 수피 및 잎, 잣나무 목부, 헛개나무 목부, 모감주나무 수피, 때죽나무 목부, 동백나무 잎, 그리고 빗죽이나무 잎이었다. 특히 헛개나무 목부 추출물은 여러 식물병원 균에 대하여 강함 살균효과를 나타내어 방제에 크게 이용할 수 있을 것으로 기대되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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