• 생명과학회지
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• 제10권4호
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• pp.408-421
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• 2000

We tried to establish the culture method of the chondrocyte isolated from the epiphyseal cartilage and to investigate morphological changes of chondrocyte cultured with enzyme-digested costal cartilage, the perichondrium and experimentally damaged meniscus of rabbit. De novo chondrocyte pellets were prepared from epiphyseal plates by culturing isolated epiphyseal chondrocytes from 4 week. old rabbits. We morphologically assessed the cartilage formation of the chondrocyte culture with enzyme-digested costal carilage, the perichondrial culture, the cultured chondrocytes transplants into experimentally damaged meniscus of rabbits, the perichondrial culture, the cultured chondrocytes transplants into experimentally damaged meniscus of rabbit. In the 24 days, the epiphyseal chondrocytes maintained the typical phenotypes of the partial nodular cell formation. The 30 days cryopreserved chondrocytes showed abnormal and irregular shape. In the type II collagen added culture, the chondrocytes showed expanded rough endoplasmic reticulum and small and large round-like vesicles of processes. In the type IV collagen added culture, the chondrocytes showed large perinuclear vaculoes and abundant well-developed rough endoplasmic reticulum of processes. In the culture with enzyme- digested costal cartilage and the perichondrial culture, the chondrocytes showed a few swelling rough endoplasmic reticulum and vacuoles. The cultured epiphyseal chondrocytes maintained typical phenotype and the chondrocytes were grown faster and maintained more typical phenotype in the type II and IV collagen added culture. The transformed chondrocytes secreted abundant extracellular matrix in the type II collagen added culture, and showed processes in the type IV collagen added culture. The perichondrial chondrocytes were grown faster and their implants were able to transplant. The cultured chondrocytes transplanted into experimentally damaged meniscus were adapted between the meniscus tissues. And the immunocyto-chemical reaction of the type II collagen of the chondrocytes were found to be maintained. The chondrocytes cultured cartilage. The chondrocytes secreted abundantly. The cultured chondrocytes transplanted into experimentally damaged meniscus changed immature cells into enlarged mature cells with extracellular secretion.

• 한국임상수의학회지
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• 제28권5호
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• pp.486-496
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• 2011

조직공학적 인공연골재생에 대한 관심이 증가함에 따라 많은 연구들이 활발히 수행되고 있으나 임상적인 적용의 한계를 극복하기위한 고효능을 보유한 양질의 연골조직생산의 필요성이 증가되고 있다. 인공연골은 자연연골과는 달리 '연골막(perichondrium)'을 포함하고 있지 않기 때문에 장기간 생체 내에 삽입된 후에 서서히 흡수 또는 변형으로 임상적 활용에 한계가 있다고 있다. 이에 본 연구는 양질의 연골조직생산을 목적으로, 세포판 제작기법(cell sheet engineering technique) 을 기반으로 한 인체유래의 배양 연골막(cultured perichondrium)을 이용하여 만든 인공연골막 세포판(cultured perichondrial cell sheet)의 생체 내 특성을 비교 분석하고, 배양된 연골막을 피복하여 고효능화를 유도한 인공연골복합체의 생체내 재생효능 및 조직특성을 비교 평가하고자 하였다. 본 연구에서는 Athymic nude mouse의 피하이식모델(study 1, n = 12)을 이용하여 담체로 hydrogel을 이용한 배양연골막 복합체의 생체내 효능을 분석하였고, 중대형동물의 대량연골 결손시의 재생효능을 평가하기 위하여 개의 무릎연골에 $1{\times}2cm$의 대량연골 결손모델(study 2, n = 12)을 통하여 인공배양세포판을 이식하였다. 이식12주 후 이식편을 회수하여 생화학, 분자생물학 및 면역조직학 분석을 시행한 결과, 배양연골막 복합체의 생체내 효능이 단독이식군에 비해 변형이나 과증식 없이 우수한 결과를 나타내었다. 본 연구의 결과로 토대로 배양연골막을 피복한 인공연골막의 관절내 효과를 규명하여 실제 임상적용을 조기화하는 기반을 제공하고 인공연골의 문제점이었던 변형과 흡수를 줄인 고효능 인공연골 제작기법을 제공하는데 유용할 것으로 기대된다.