Over half of all biologically active peptide and peptide hormones are $\alpha$-amidated at their C-terminus, which is essential for their full biological activities. Amidation is accomplished through the sequential reaction of the two enzymes encoded by the single bifunctional, peptidyl-glycine $\alpha$-amidating monooxygenase (PAM or an $\alpha$-amidating enzyme). PAM catalyze the forma - tion of a peptide amide from peptide precursors that include a C-terminal glycine, and requires copper molecular oxygen and ascorbate. PAM is the only enzyme that produces peptide amides in vivo. However various strategies utilizing PAM, carboxypeptidase-Y enzymes, and chemical syn-thesis have been developed for producing peptide amides in vitro. The growing need and impor-tance of peptide amide drugs has highlighted the necessity for a efficient in vitro amidating sys-tem for industrial application for the production of peptide hormones, like calcitonin and oxytocin. This review presents the current situation regarding amidation with a special emphasis on the in-dustrial production or peptide hormones.
Incretin hormones such as glucagon-like peptide-1 (GLP-1) and glucose-dependent insulinotropic polypeptide delay gastric emptying, increasing satiety, and enhance insulin secretion. Two new classes of treatments related to incretin hormones for the management of type 2 diabetes mellitus have emerged: GLP-1 receptor agonists (e.g., exenatide, liraglutide) and the dipeptidyl peptidase-4 (DPP-4) inhibitors (e.g., sitagliptin, saxagliptin, vildagliptin, alogliptin), which prevent the degradation of GLP-1. A MEDLINE search was conducted in order to evaluate the efficacy and safety of incretin-based therapies and publications were reviewed. Data from clinical trials indicated incretin-based treatment showed clinically significant reductions in hemoglobin A1c with low risk of hypoglycemia. Weight reductions were observed with GLP-1 receptor agonists where as DPP-4 inhibitors are weight neutral.
Insulin-like growth factors (IGFs) are mitogenic peptide hormones that regulate embryonic development, postnatal growth and cellular differentiation in vertebrates IGFs are initially translated as pre-pro-peptides and then proteolytically processed to yield the mature IGFs and E-peptides. Like the C-peptide of pro-insulin, the E-peptides of pro-IGFs are generally believed to possess little or no biological activity other than their potential roles in the biosynthesis of the mature IGFs. Like human IGF-1, previous studies in our laboratory showed that the recombinant trout Ea4-peptide of pro-IGF-1 exhibited a dose-dependent mitegenic activity in cultured BALB/3T3 fibroblasts and other non-oncogenic transformed cells (Tian et al., 1999) We have also shown by in vitro and in vivo studies that Ea4-peptide possessed novel anti-tumor activities (Chen et al., 2002, Kuo and Chen, 2002; Kuo and Chen 2003). Recent results of studies conducted in chorionicallantoic membrane of developing chicken embryos revealed that Ea4-peptide of trout pro-IGF-1 also possesses a dose-dependent antiangiogenic activity. Together these results raised the question whether Ea4-peptide of trout pro-IGF-1 may affect heart and blood vessel development and hematopoiesis in fish embryos. (중략)
Kim, Hee-Jin;Shin, Chan-Young;Sang Bong lee;Ko, Kwang-Ho
Biomolecules & Therapeutics
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제2권4호
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pp.303-309
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1994
The analysis of membrane receptors for hormones and neurotransmitters has progressed considerably by pharmacological and biochemical means and more recently through the use of specific antibodies. Two kinds of antibodies could be produced, one is from synthetic peptides and the other from proteins such as purified receptor. Anti-peptide antibodies gave some advantages; epitope is evident and also receptor purification in quantity is not prerequisite. It can be also applied to the study of receptor structure-activity relationship. The purpose of the present study was 1) to produce and characterize a polyclonal antibody against a synthetic $\beta$2-adrenergic receptor peptide(Phe-Gly-Asn-Phe-Trp-Cys-Phe-Trp-Thr-Ser-Ile-Asp-Val-Leu) and 2) to determine the effects of this antibody on the $\beta$-adrenergic receptor ligand interaction. The peptide sequence contains an amino acid residue such as Asp-113 which was identified as one of important component for receptor-ligand interaction in site-directed mutagenesis studies. Production of antibody was performed by immunization of rabbits through popliteal lymph node with the peptide coupled with Keyhole Limpet Hemocyanin (KLH). The titer of antibody against this peptide was 1 : 1000. The anti-peptide antibody was able to detect a 67 kDa protein band in western blot corresponding to the molecular weight of the $\beta$-adrenergic receptor in partially purified receptor fraction derived from guinea pig lung. The antisera inhibited the specific binding of [$^3$H]dihydroalprenolol to $\beta$-adrenergic receptor in a concentration-dependent manner. The results from this study suggest that the peptide sequence selected in the present study is important for the receptor ligand interaction.
Signal transduction through G protein-coupled receptors comprises three functional components, a receptor, a G protcin and a effector protein. Work over the last sevcral ycars has led to the characterization or virtually all of the components or these systems. what has come out or those studies is that these mechanisms of signal transduction are pervasive in nature being found in mammalian and avian species, as well as lower organisms such as yeast and slime mold. It is known that G protein-coupled receptors mediate the action of such diverse molecules such as small hormones and neurotransmitters, small peptide molecules as well as glycoprotein hormones and various sensory perceptions such as light, olfaction and most likely taste.
Maintaining internal homeostasis and regulating innate behaviors are essential for animal survival. In various animal species, a highly conserved neuroendocrine system integrates sensory inputs and regulates physiological responses to environmental and internal changes. Diuretic hormones 44 and 31, which are homologs of mammalian corticotropin-releasing factor (CRF) and calcitonin gene-related peptide (CGRP), respectively, control body fluid secretion in Drosophila. These neuropeptides and their receptors have multiple physiological roles, including the regulation of body-fluid secretion, sleep:wake cycle, internal nutrient-sensing, and CO2-dependent response. This review discusses the physiological and behavioral roles of DH44 and DH31 signaling pathways, consisting of neuroendocrine cells that secrete DH44 or DH31 peptides and their receptor-expressing organs. Further research is needed to understand the regulatory mechanisms of the behavioral processes mediated by these neuroendocrine systems.
Objectives The aim of this study was to investigate clinical factors of SQD syndrome by tracking plasma gut hormone (active ghrelin, active Glucagon-like peptide-1(GLP-1), pancreatic polypeptide(PP), total peptide YY(PYY)) profiling of pre-post prandial standard meal between SQD group and normal group. Methods A total of 24 adult participants were consecutively recruited on April 2014. They were diagnosed as either by SQD syndrome or normal by Spleen Qi Deficiency Questionnaire (SQDQ). On the experimental day, blood samplings of 2 ml were repeatedly collected at 6 points from 2 groups for measuring plasma levels of gut hormones. At every point, subjective appetite sensations were self-registered. Results & Conclusions 1. There were significantly lower subjective 'Appetite' (p=0.012) and higher 'Satiety' (p=0.012) in SQD group. At each time point, subjective 'Appetite' was significantly lower at 60 min after breakfast (p=0.034) and 'Satiety' were significantly higher at 15 min (p=0.020) and 120 min (p=0.044) after breakfast in SQD group. 2. There were no significant differences in plasma levels of gut hormones (active ghrelin, active GLP-1, PP, total PYY) between SQD and normal group. Also at each time point, there were no significant differences of plasma levels of gut hormones between SQD and normal group. 3. Changes in plasma levels of gut hormones compared to baseline were not significantly different at each time point between SQD and normal group. Plasma PYY levels compared to baseline increased in SQD group following 15 min and 30 min after breakfast but decreased in normal group. 4. Further investigation is needed to construct gut hormone profiling and in this perspective, we can approach evaluation tool on variable appetite in Traditional Korean Medicine (TKM) syndrome in the future.
Kim, Hee-Jin;Shin, Chan-Young;Noh, Min-Su;Ko, Kwang-Ho
한국응용약물학회:학술대회논문집
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한국응용약물학회 1995년도 춘계학술대회
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pp.86-86
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1995
The analysis of membrane receptors for hormones and neurotransmitters has progressed considerably by pharmacological and biochemical means and more recently by the use of specific anti-receptor antibodies. A 14-mer peptide (from Phe102 to Leu115 of ${\beta}$2-adrenergic receptor) was synthesized and this peptide was coupled to carrier protein Keyhole Limpet Hemocyanin(KLH) by glutaraldehyde method. A 0.5mg of KLH-coupled peptide was emulsified with equal volume of complete Freund's adjuvant and injected via popliteal lymph node to each of the three Newzealnd White rabbits. Booster injections were repeated at 4 weeks interval for three times with incomplete Freund's adjuvants. One week after the final injection, serum was prepared from ear artery. Nonspecific immunoglobulins were removed by passing the serum through KLH-Sepharose 6B affinity matrix and further by incubation with bovine lung aceton powder. The titer of the antibody for synthetic peptide which was determined by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) was about l/l,000. The antibody produced in this study revealed 67kDa protein band in the western blot of partially purified guinea pig lung ${\beta}$-adrenergic receptor preparation. The antibody inhibited ${\beta}$-adrenergic antaginist [3H] Dihydroalprenolol binding to soluble ${\beta}$-adrenergic receptor by 25% while control sera did not show any inhibitory effects, The result of this study suggests that the peptide sequence selected in this study may play some important roles in adrenergic receptor-ligand interaction.
Purpose: This study aimed to examine the early postprandial changes in gastrointestinal (GI) hormones and hemodynamics in terms of early dumping syndrome after gastrectomy for gastric cancer. Materials and Methods: Forty patients who underwent gastrectomy for gastric cancer and 18 controls without previous abdominal surgery were enrolled. Before and 20 minutes after liquid meal ingestion, blood glucose, glucagon-like peptide-1 (GLP-1), and GLP-2 concentrations and superior mesenteric artery (SMA) and renal blood flow were measured. The patients' heart rates were recorded at 5-minute intervals. All subjects were examined for dumping syndrome using a questionnaire based on Sigstad's clinical diagnostic index. Results: The postprandial increases in blood glucose, GLP-1, and GLP-2 levels as well as SMA blood flow and heart rate were greater in patients who underwent gastrectomy than in controls (all P<0.010). Patients who underwent gastrectomy showed a significantly decreased renal blood flow (P<0.001). Among patients who underwent gastrectomy, distal gastrectomy was a significant clinical factor associated with a lower risk of early dumping syndrome than total gastrectomy (hazard ratio, 0.092; 95% confidence interval, 0.013-0.649; P=0.017). Patients who underwent total gastrectomy showed a greater postprandial increase in blood glucose (P<0.001), GLP-1 (P=0.030), and GLP-2 (P=0.002) levels as well as and heart rate (P=0.013) compared to those who underwent distal gastrectomy. Conclusions: Early postprandial changes in GI hormones and hemodynamics were greater in patients who underwent gastrectomy than in controls, especially after total gastrectomy, suggesting that these changes play a crucial role in the pathophysiology of early dumping syndrome.
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