Cho, Sunghun;Lee, Jaemin;Lee, Yoon Kyoung;Chung, Mi Ja;Kwon, Ki Han;Lee, Sanghyun
Journal of Applied Biological Chemistry
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제59권2호
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pp.107-112
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2016
Pectolinarin was isolated from the ethyl acetate fraction of Cirsium setidens using open column chromatography and was analyzed using spectrometry. Pectolinarin content in Cirsium spp. was determined using HPLC/UV. Pectolinarin content in the aerial part of Cirsium spp. was higher than that in the root and pappus. Pectolinarin content was highest in the aerial part of C. chlorolepis (110.65mg/g extract). Consequently, the aerial part of C. chlorolepis has potential for use in new natural medicinal products, health supplements, and beverages.
생물전환에 의한 고려엉겅퀴 pectolinarin의 pectolinarigenin 전환 시 지표성분의 함량 및 표준화를 위한 분석법 검증을 실시하였다. 분석법 검증 결과 HPLC를 이용한 분석방법에서 표준용액의 retention time과 발효 고려엉겅퀴 추출물의 retention time이 일치하였으며 동일한 spectrum을 나타내는 것으로 특이성을 확인하였다. Pectolinarin 및 pectolinarigenin의 검량선은 상관계수 값이 모두 1로 나타나 높은 직선성을 보여주어 분석에 적합함을 알 수 있었다. Pectolinarin 및 pectolinarigenin의 검출한계는 각각 $4.25{\mu}g/mL$, $2.46{\mu}g/mL$였고, 정량한계는 $12.88{\mu}g/mL$, $7.46{\mu}g/mL$로 나타났다. Pectolinarin 및 pectolinarigenin의 함량을 확인한 결과 고려엉겅퀴 0시간, 5시간 발효물에서는 pectolinarin만 관찰되었으며, 19시간 발효물에서 생물전환에 의해 pectolinarin이 pectolinarigenin으로 전환되는 것을 확인할 수 있었다. 그 이후 28시간부터 72시간까지의 고려엉겅퀴 발효물에서는 pectolinarigenin만 관찰할 수 있었다. 정밀도 측정 결과 pectolinarin 및 pectolinarigenin은 일간 정밀도에서 각각 0.9%, 0.5%의 정밀도를 보여주었으며 일내 정밀도에서는 각각 0.5%, 0.2%로 높은 정밀성을 나타내었다. 또한 pectolinarin은 99.7~104.0%, pectolinarigenin은 99.7~102.4% 범위의 회수율을 보여주어 실험방법에 대한 정확성을 검증하였다. 본 연구 결과 고려엉겅퀴의 지표성분인 pectolinarin 및 pectolinarigenin의 HPLC를 이용한 동시분석방법이 적합한 분석방법임이 검증되었다.
A flavone glycoside was isolated from the aerial parts of Cirsium nipponicum Makino in good yield and identified as pectolinarigenin $7-O-{\alpha}-{_L}-rhamnopyranosyl(1{\longrightarrow}6)-{\beta}-{_D}-glucopyranoside$, pectolinarin, on the basis of chemical and spectroscopic evidence.
본 연구에서는 국내산 고려엉겅퀴를 건강기능식품 소재로 활용시 기초자료 제공하고자 주요 산지별 pectolinarin 함량, 총 플라보노이드 함량, DPPH라디칼 소거능 및 ORAC 지수 등을 분석하였다. 산지별 고려엉겅퀴의 pectolinarin 함량은 $3.95{\pm}0.05{\sim}7.29{\pm}0.07mg/g$로 강원도 D농장(GW-D)에서 가장 높은 함량을 보였다. 총 플라보노이드 함량은 산지별로 $40.42{\pm}0.91{\sim}76.70{\pm}2.24mg\;PNE/g$ 수준으로 전라남도 A농장(JN-A) 추출물에서 가장 높은 함량을 나타내었고 강원도 A농장(GW-A) 추출물에서($40.42{\pm}0.91mg\;PNE/g$)로 가장 낮은 함량을 보였다. DPPH 라디칼 소거능의 경우, 산지별로 31.25% ~ 81.93%의 활성을 보였고, ORAC 지수는 산지별로 $179.62{\sim}514.49{\mu}M\;TE/g$로 강원도 D농장(GW-D)과 강원도 E농장(GW-E)에서 각각 514.49, $501.73{\mu}M\;TE/g$ 으로 가장 높은 ORAC 수치를 나타내었다. 결론적으로 고려엉겅퀴 추출물은 pectolinarin과 유용성분을 함유하고 DPPH 라디칼 소거능 및 ORAC 활성 등의 항산화활성을 갖는 것으로 나타났다.
The aim of this study was to evaluate the basic data of Cirsium setidens Nakai fine powder (FPC), which will then be used in the development of functional fooditems. We measures and evaluated the level of pectolinarin content, phenol content, flavonoids content, antioxidants and anti-obesity properties of FPC. Our results from the study showed that the pectolinarin, phenol, and flavonoids contents of FPC measured at 10.95±0.1 5mg/g, 12.92±0.18 mg gallic acid equivalent (GAE)/g and 26.47±0.77 mg rutin equivalent (RE)/g, respectively. The exhibited antioxidant activity of FPC increased significantly depending on the dosage, and additionally. FPC did not show any cytotoxicity up to the dosage level of 500 μg/mL. During adipocyte differentiation, FPC significantly inhibited ROS production and lipid accumulation, compared with the control substance. These results suggest that FPC could be considered a promising resource of natural antioxidants and could serve a variety of health-improving roles in the production of functional food ingredients.
본 연구에서는 생물전환 발효고려엉겅퀴 주정추출물을 온도별(4, 25 및 $50^{\circ}C$), pH별(4.0, 7.0, 및 10.0)로 21일간 저장하면서 7일 간격으로 pectolinarin과 pectolinarigenin 함량, 총 페놀 함량, DPPH 라디칼 소거능 및 FRAP를 측정하여 안정성을 평가하였다. 발효고려엉겅퀴 추출물인 pectolinarin과 pectolinarigenin 함량은 저장기간이 증가함에 따라 감소하는 경향을 보였으며, 온도에 의한 영향보다 pH에 의한 영향이 큰 것으로 나타났다. pH 10.0에서 pectolinarin의 함량 변화는 초기 $2.13{\pm}0.05mg/g$에서 $1.60{\pm}0.01mg/g$으로, pectolinarigenin 함량 변화는 $24.96{\pm}0.07mg/g$에서 $0.45{\pm}0.02mg/g$으로 크게 감소하였다. 총 페놀 함량도 저장기간이 따라 같이 감소하는 경향을 보였으며, $50^{\circ}C$와 pH 10.0에서 큰 감소치를 보였다. 항산화 안정성은 온도별 저장조건에서는 DPPH 라디칼 소거능은 큰 차이를 보이지 않았고, pH 10.0에서는 크게 감소하는 경향을 보였으나, FRAP은 온도별, pH별 저장조건에 따른 큰 변화를 보이지 않았다. 이상의 저장 온도별, pH별 결과를 종합해 볼 때, 생물전환 발효고려엉겅퀴 주정 추출물은 저온($4^{\circ}C$)에서 산성(pH 4.0)과 중성(pH 7.0) 상태에서 안정하였다.
본 연구에서는 고려엉겅퀴 추출물에 대한 열안정성, pH 안정성을 조사하고자 고려엉겅퀴 주정추출물은 온도별(4, 25 및 $50^{\circ}C$), pH별(4.0, 7.0, 및 10.0)로 저장하면서 추출물의 pectolinarin 함량, 총 페놀 함량, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼 소거능 및 FRAP assay를 분석하였다. 고려엉겅퀴 추출물의 pectolinarin 함량은 저장기간이 증가함에 따라 다소 감소하는 경향을 보였으며, 온도에 의한 영향보다 pH에 의한 영향이 큰 것으로 나타났다. 총 페놀 함량도 pectolinarin 함량과 저장기간이 증가함에 따라 같이 감소하는 경향을 보였으며 저온($4^{\circ}C$)에서 보다 높은 온도인 $25^{\circ}C$와 $50^{\circ}C$에서 큰 감소치를 보였고 산성(pH 4.0)과 중성(pH 7.0)에서는 비교적 변화가 적었다. 항산화 활성은 저장기간이 증가함에 따라 DPPH 라디칼 소거능은 감소하는 경향을 보였으나 FRAP은 온도별, pH별 저장조건에 따른 큰 변화를 보이지 않았다. 이상의 결과를 고려해 볼 때, 고려엉겅퀴 주정 추출물은 산성(pH 4.0)과 중성(pH 7.0)조건에서 저온($4^{\circ}C$) 저장 시 추출물의 안정성을 최적화 할 수 있을 것으로 판단되었다.
This study was performed to determine the composition of phenolic substances contained in the leaves of Cirsium setidens (Compositae), validate the high-performance liquid chromatography (HPLC) method, and determine the in vivo sedative effect of the main component pectolinarin. Six phenolic compounds isolated from C. setidens were spectroscopically identified as chlorogenic acid (1), hyperoside (2), 3,4-di-O-caffeoylquinic acid (3), caffeic acid methyl ester (4), linarin (5), and pectolinarin (6) and then used as standard compounds for HPLC analysis. HPLC proved to be precise, accurate, and sensitive for the simultaneous analysis of the phenolic substances. In particular, six compounds showed good regression ($R^2$ > 0.999) within test ranges and recovery was in the range of 95.4 - 104.8%. The content of pectolinarin was considerably higher (156.48 mg/g) than those of other phenolic substances including the other flavone glycoside, linarin (18.99 mg/g). The contents of other phenolic substances, in order, were chlorogenic acid (8.41 mg/g), 3,4-di-O-caffeoylquinic acid (5.74 mg/g), hyperoside (4.33 mg/g), and caffeic acid methyl ester (0.51 mg/g). Oral administration with compound 6 (10 and 20 mg/kg) enhanced the sleeping time induced by pentobarbital in mice, indicating that it has a sedative effect.
This study identified the formula of the antioxidant substance separated from the ethyl acetate and the butanol extract and tested the antioxidant properties with the electron donating ability(EDA). Each phase with the fractionated methanol extract from mulberry leaf was screened in advance for the antioxidant substance with EDA. As the result, activity appeared in the ethyl acetate and butanol phase and the antioxidant component was separated. As the consequence, 2 components from the ethyl acetate phase and 1 from the butanol phase were separated, among which the structures of the components from ethyl acetate were determined by wogonin and linarin, whereas the structure of the component from the butanol phase was determined by pectolinarin. In the screening of antioxidant activity by the scavenging effect of the DPPH radical, the wogonin and linarin components from ethyl acetate phase showed more powerful antioxidant property than the component from butanol. The results from this study indicate that the chemical compound separated from the ethyl acetate extract has more powerful antioxidant property than the one separated from the butanol extract. The components separated from the ethyl acetate extract were wogonin and linarin, which are flavonoids, whereas the component from butanol was pectolinarin. Therefore, this study suggested that the feasibility of mulberry leaf as a functional food additive and its value as a natural antioxidant is very high.
The herb of Melampyrum roseum var. hirsutum Beauv. was extracted with methanol and the extract was fractionated with n-hexane, chloroform, ethylacetate and n-buthanol. Repeated column chromatography of silica gel, Sephadex LH-20 and Lobar-A lichroprep Si 60 led to the isolation of five compounds from n-hexane layer and ethylacetate layer. These compounds were identified as apigenin, linarin, pectolinarin, wogonin and mussaenoside, respectively, by the physicochemical and spectral properties.
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