Here, we reported a novel secreted protein elicitor PeBL2 from Brevibacillus laterosporus A60, which can induce hypersensitive response in tobacco (Nicotiana benthamiana). The ion-exchange chromatography, high-performance liquid chromatography (HPLC) and mass spectrometry were performed for identification of protein elicitor. The 471 bp PeBL2 gene produces a 17.22 kDa protein with 156 amino acids containing an 84-residue signal peptide. Consistent with endogenous protein, the recombinant protein expressed in Escherichia coli induced the typical hypersensitive response (HR) and necrosis in tobacco leaves. Additionally, PeBL2 also triggered early defensive response of generation of reactive oxygen species ($H_2O_2$ and $O_2{^-}$) and systemic resistance against of B. cinerea. Our findings shed new light on a novel strategy for biocontrol using B. laterosporus A60.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.12
no.2
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pp.51-56
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2006
Use of products containing phytoecdysteroid (PE) as active principle has become popular in prominent sericultural areas of India for hastening larval maturation events and synchronizing cocoon spinning activities as an obvious advantage is assured. At times, the present recommendation of administering PE at the onset of spinning results in peak labour requirement at odd hrs. To enable making recommendation for the use of PE on $multi{\times}bivoltine$ silkworm hybrids based on the climatic conditions prevailing in different areas especially with regard to temperature, the experiment was taken up to determine proper treatment times so that the induced spinning will be more orderly and the labour can be leveraged more efficiently. Different brackets of low ($18-22^{\circ}C$), medium ($24-28^{\circ}C$) and high ($29-32^{\circ}C$) temperature were simulated during the latter half of V larval instar and cocoon spinning. PE was administered to $multi{\times}bivoltine$ silkworm ($BL67{\times}CSR101$) hybrid batches as per the recommended dose at three different times viz., 10 am, 4 pm and 10 pm. Three replicates of 100 larvae were maintained for each treatment. Absolute controls were also maintained in each temperature range to compare the results. Cumulative maturation percentage was recorded at 6 hrs interval to ascertain peak mounting span. The influence of the treatment on the cocoon traits also was studied. Based on the peak mounting span, it was evident that in low temperature 10 pm treatment would be better. In medium and high temperature, treatment at 4 pm proved to be a better option. The influence of the treatment times at different temperature range on labour management is discussed.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.18
no.1
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pp.109-114
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1989
Bound lipids(BL) of naked barley(Hordeum vulgare L.) were extracted by different methods and the composition of BL was determined by the procedures of column chromatography, thin layer chromatography and gas chromatography. For the extraction, after free lipids were removed from barley flour by petroleum ether(PE) extraction and then BL were extracted from PE treated flour by the solvent systems of water-saturated butanol(WSB) at $25^{\circ}C$(WSB-LT) and at $95^{\circ}C$ (WSB-HT). BL were extracted by WSB-HT with higher extraction yield as 1.5% as dry basis of flour. The contents of neutral lipids(NL), glycolipids(GL) and phospholipid(PL) in BL were $20.7{\sim}35.5%$, $28.7{\sim}32.4%$, $32.1{\sim}50.6%$, respectively with particularly higher content of PL in WSB-HT as 50.6%. Digalactosyl-diglycerides $(40.2{\sim}44.8%)$, monogalactosyl-diglycerides $(20.3{\sim}31.1%)$, sterly glycerides$(11.2{\sim}15.2%)$ and cereb rosides$(11.6{\sim}12.9%)$ were observed in GL. Of the PL in BL, lysophosphatidyl choline, phosphatidyl choline and phosphatidyl serine, and phosphatidyl ethanolamine were the major components. The predominent fatty acids of NL, GL and PL were linoleic and palmitic acids, however, no significant difference was observed in the composition of fatty acids between two extraction methods.
Kaempferol 3-O-galactoside (Trifolin), a member of the flavonol group, has been reported to have anticancer effects against promyelocytic leukemia, histocytic lymphoma, skin melanoma and lung cancer. Trifolin has been extracted and used from several plants, but the extraction process is complicated and the final yield is low. Biotransformation is an alternative tool to produce high value-added chemicals from inexpensive compounds. To synthesis trifolin from naringenin, three genes (PeFLS and OsUGE-PhUGT) were introduced into Escherichia coli, respectively. In order to synthesis trifolin from naringenin, a co-culture fermentation system was established by optimizing the cell concentration, biotransformation temperature and medium, isopropyl-β-D-thiogalactoside (IPTG) concentration, substrate supply concentration, and recombinant protein induction time. The established optimal conditions for trifolin production were a 3:1 ratio of BL-UGTE to BL-FLS, induction of recombinant protein at 25 ℃ for 4 h after addition of 2.0 mM IPTG, biotransformation at 30 ℃, and supply of 300 μM naringenin. Through the optimized co-culture fermentation system, trifolin was biosynthesized up to 67.3 mg/L.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.9
no.1
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pp.41-46
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2004
A breeding programme was initiated by utilizing a robust bivoltine breed CSR$_{18}$ and a polyvoltine breed Cambodge with the main objective of developing robust polyvoltine silkworm breeds/hybrids. At F$_1$ and F$_2$, parthenogenetic development was induced following warm water treatment of eggs at 46$^{\circ}C$ for 18 min followed by two backcrosses with Bl$_{67}$, an evolved polyvoltine breed. The newly developed breed was subjected for hybrid study using eight hybrid combinations in the laboratory at F$_{8}$ generation. F$_1$ hybrids between newly developed breed Bl$_{67}$ (Pg) and promising bivoltine breeds exhibited their superiority by expressing significant hybrid vigour for several economic characters like cocoon yield/10,000 larvae, cocoon weight, cocoon shell weight, cocoon shell ratio and denier. Study on cocoon shape variability revealed that cocoons of all the F$_1$ hybrids except BL$_{67}$ (Pg)${\times}$NB$_4$D$_2$ were found comparatively uniform in shape.pe.
The composition of lipid class and fatty acid of free lipids(FL) as non-starch lipid and bound lipids(BL) as starch-lipid extracted from starch In naked barley(Hordeum vulgare L.) was investigated with the chromatographic procedures. FL were extracted from barley starch by petroleum ether(PE) and then BL were reextracted from PE extracted starch by the solvent systems of water-saturated butanol (WSB) at $25^{\circ}C$ and at $95^{\circ}C$ respectively. The contents of neutral lipid(NL), glycolipids(GL) and phospholipids(PL) in FL were 69.9%, 27.3%, and 2.8%, on the other hand those of BL were 34.9-54.6%, 30-45.5% and 15.4-19.6%, respectively. The identified components of NL in starch-lipid were triglycerides (70.4-82.4%), free fatty acid (8.4-26.2%), esterified sterols and free sterols, and also the major GL in starch-lipid was monogalactos-yldiglycerides(87.2-91.1%). Of the PL in FL and BL, diphosphatidyl glycerols, lysophosphatidyl choline, phosphatidyl choline & phosphatidyl serine were the major components. The predominent fatty acids found in NL, GL and PL of barley starch were palmitic acid and linoleic acid, and also myristic, stearic, oleic, linolenic acids were determined.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Oxidative stress is caused by an imbalance between harmful free radicals and antioxidants. Long-term oxidative stress can lead to an "exhausted" status of antioxidant defense system triggering development of metabolic syndrome and chronic inflammation. Green perilla (Perilla frutescens) is commonly used in Asian cuisines and traditional medicine in southeast Asia. Green perilla possesses numerous beneficial effects including anti-inflammatory and antioxidant functions. To investigate the potentials of green perilla leaf extract (PE) on oxidative stress, we induced oxidative stress by high-fat diet (HFD) in aging mice. MATERIALS/METHODS: C57BL/6J male mice were fed HFD continuously for 53 weeks. Then, mice were divided into three groups for 12 weeks: a normal diet fed reference group (NDcon), high-fat diet fed group (HDcon), and high-fat diet PE treated group (HDPE, 400 mg/kg of body weight). Biochemical analyses of serum and liver tissues were performed to assess metabolic and inflammatory damage and oxidative status. Hepatic gene expression of oxidative stress and inflammation related enzymes were evaluated by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). RESULTS: PE improved hepatopathology. PE also improved the lipid profiles and antioxidant enzymes, including hepatic glutathione peroxidase (GPx) and superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) in serum and liver. Hepatic gene expressions of antioxidant and anti-inflammatory related enzymes, such as SOD-1, CAT, interleukin 4 (IL-4) and nuclear factor erythroid 2-related factor (Nrf2) were significantly enhanced by PE. PE also reduced the levels of hydrogen peroxide (H2O2) and malondialdehyde (MDA) in the serum and liver; moreover, PE suppressed hepatic gene expression involved in pro-inflammatory response; Cyclooxygenase-2 (COX-2), nitric oxide synthase (NOS), interleukin 1 beta (IL-1β), and interleukin 6 (IL-6). CONCLUSIONS: This research opens opportunities for further investigations of PE as a functional food and possible anti-aging agent due to its attenuative effects against oxidative stress, resulting from HFD and aging in the future.
Seo, Jung-Soo;Lim, Sang-Uk;Kim, Na-Young;Lee, Sang-Hwan;Oh, Hyun-Suk;Lee, Hyung-Ho;Chung, Joon-Ki
Journal of fish pathology
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v.18
no.1
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pp.67-80
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2005
Phosphoinositide-specific phospholipase $C\delta$$PLC\delta$) plays an important role in many cellular responses and is involved in the production of second messenger. The present study was conducted to obtain the biochemical characteristics of the expressed recombinant $PLC\delta$ in E. coli cloned from Misgurnus mizolepis and partially purified $PLC\delta$ enzymes from liver tissues of M. mizolepis (wild ML-$PLC\delta$). The ML $PLC\delta$ gene was cloned and expressed under the previous report (Kim et al., 2004), and purified the recombinant protein by successive chromatography using $Ni^{2+}$-NTA affinity column and gel iltration FPLC column. The wild ML-$PLC\delta$ protein was solublized with 2 M KCI and purified by successive chromatography on open heparin-Sephagel and analytical TSKgel heparin-5PW. Both the recombinant and wild ML-$PLC\delta$ form of protein showed a concentration-dependent PLC activity to phosphatidylinositol 4,5-bis-phosphate (PIP$_2$) or phosphatidylinositol (PI). Its activity was absolutely $Ca^{2+}$- dependant, which was similar to mammalian $PLC\delta$ isozymes. Maximal PI-hydrolytic activations of recombinant and wild ML- TEX>$PLC\delta$ was at pH 7.0 and pH 7.5, respectively. In addition, the enzymatic activities of recombinant and wild ML-$PLC\delta$ were increased in concentration-dependent manner by detergent, such as sodium deoxycholate SDC), phosphatidylethanolamine (PE) and phosphatidylcholine (PC). The activities decreased in contrast by a polyamine, such as spermine. Western blotting showed that several types of $PLC\delta$ isozymes exist in various organs. Taken together our results, it suggested that the biochemical characteristics of ML-$PLC\delta$ are similar with those of mammalian $PLC\delta1$ and ${\delta}3$ isozymes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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