The exportation of cultured olive flounder (Paralichthys olivaceus) in Korea has been recently decreasing due to the infections with a myxozoan parasite Kudoa septempunctata, and there is a strong demand for strict food safety management because the food poisoning associated with consumption of raw olive flounder harbouring K. septempunctata has been frequently reported in Japan. The life cycle and infection dynamics of K. septempunctata in aquatic environment are currently unknown, which hamper establishment of effective control methods. We investigated sea water and marine invertebrates collected from olive flounder farms for detecting K. septempunctata by DNA-based analysis, to elucidate infection dynamics of K. septempunctata in aquaculture farms. In addition, live marine polychaetes were collected and maintained in well plates to find any possible actinosporean state of K. septempunctata. The level of K. septempunctata DNA in rearing water fluctuated during the sampling period but the DNA was not detected in summer (June-July in farm A and August in farm B). K. septempunctata DNA was also detected in the polychaetes Naineris laevigata intestinal samples, showing decreased pattern of 40 to 0%. No actinosporean stage of K. septempunctata was observed in the polychaetes by microscopy. The absence of K. septempunctata DNA in rearing water of fish farm and the polychaetes N. laevigata intestinal samples during late spring and early summer indicate that the infection may not occur during this period. N. laevigata was suspected as the possible alternate invertebrate host of K. septempunctata, but the actinosporean stage was not found by well plate method and further studies will be necessary. This research provides important baseline information for understanding the infection dynamics of K. septempunctata in olive flounder farms and further establishment of control strategies.
The presence of pathogens in wild fish is a potential threat to the fish being raised nearby fish farm. Surveillance of these pathogens in the wild is, thus, highly important to keep fish in the farm safe from serious communicable diseases. Fish and crustacean were sampled 4 times at Soyang Lake in 2016. Pathogens for five reportable communicable diseases including KHVD (koi herpesvirus disease), SVC (spring viraemia of carp), EUS (epizootic ulcerative syndrome) and WSD (white spot disease), and parasites were investigated. In Soyang Lake, pale chub Zacco platypus was the most abundant. Forty seven pale chub, 8 Korea piscivorous chub Opsarichthys uncirostris, 3 oily shiner Sarcocheilichthys variegatus wakiyae and 2 crucian carp Cyprinus carassius were investigated for detection of target diseases of fish. Seventeen Caridina denticulata denticulata, 12 Oriental river prawn Macrobrachium nipponense and 1 Chinese mitten crab Eriocheir sinensis were used for detection of WSD. As the result, reportable communicable diseases were not detected in all the freshwater animals. Dactylogyrus was detected in Korea piscivorous chub. Copepoda was also detected in pale chub and Korea piscivorous chub. Metacercaria was detected in the pale chub sampled in September and October. Those were not metacercaria of liver fluke Clonorchis sinensis.
A preservation test of Toxoplasma gondii tachyzoites for considerable time was tried to obtain simple and economical methods using various suspending media at $4^{\circ}C$ rather than serial passage of the parasite in mice. The preservation period was a term that the tachyzoites were detected from the peritoneal fluid of mice after inoculation of 2$\times$$10^5$ organisms preserved according to the lapse of time. The numbers of tachyzoite per 1\textrm{mm}^3$ of the peritoneal fluid with 2$m\ell$ of the saline solution taken in 4days after inoculation were presented as percentage in proportion to the control. The numbers. of tachyzoite per 1\textrm{mm}^3$ of the peritoneal fluid of the control were consisted of the average number of the tachyzoites of 10 mice inoculated with 2$\times$$10^5$ organisms by serial mouse passage. The tachyzoites could be preserved for 26 days in the suspending medium of saline solution at $4^{\circ}C$ Ringer's solution for 18 days, Hank's solution for 28 days, and egg-glycerine solution for 50 days.
오이 흰가루병균의 생물적 방제제로 선발한 중복기생균 Ampelomyces quisqualis 94013의 오이 흰가루병 균에 대한 기생력을 온도와 습도에 대하여, 그리고 mineral oil 등 10종의 전착제와 혼용하였을 때 기생력 증진효과를 검토하였다. 또한 A. quisqualis 94013균주의 기주범위에 대하여 오이, 호박, 참외, 멜론, 수박, 박, 딸기, 가지, 토마토, 콩, 팥, 장미에 기생하는 흰가루병균 Sphaerotheca속 6종, Erysiphe속 1종에 대하여 조사하였다. 오이 흰가루병균에 대하여 A. quisqualis 94013의 기생이 가능한 온도 범위는 $12\~30^{\circ}C$이고, 기생 최적온도는 $20\~28^{\circ}C$이였다. A. quisqualis 94013균주는 $20\~35\%$의 저습도에서 오이흰가루병균에 대하여 기생력이 저조하였다. 또한, A. quisqualis 94013의 기주범위조사에서 오이, 멜론, 수박, 참외, 박, 딸기, 토마토, 가지, 장미 등 12종의 작물을 침해하는 흰가루병균 Sphaerotheca속 6종, Erysiphe속 1종에 대하여 기생성이 있어 기주특이성이 없는 것으로 나타났다.
Kaatano, Godfrey M.;Min, Duk-Young;Siza, Julius E.;Yong, Tai-Soon;Chai, Jong-Yil;Ko, Yunsuk;Chang, Su-Young;Changalucha, John M.;Eom, Keeseon S.;Rim, Han-Jong
Parasites, Hosts and Diseases
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제53권5호
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pp.545-551
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2015
Schistosomiasis is one of the important neglected tropical diseases (NTDs) in Tanzania, particularly in Lake Victoria zone. This baseline survey was a part of the main study of integrated control of schistosomiasis and soil-transmitted helminths (STHs) aimed at describing morbidity patterns due to intestinal schistosomiasis among adults living on Kome Island, Sengerema District, Tanzania. Total 388 adults from Kome Islands (about 50 people from each village) aged between 12 and 85 years, were examined by abdominal ultrasound according to the Niamey protocol. Liver image patterns (LIPs) A and B were considered normal, and C-F as distinct periportal fibrosis (PPF). The overall prevalence of PPF was 42.2%; much higher in males than in females (47.0% in male vs 34.4% in females, P=0.007). Abnormal increase of segmental branch wall thickness (SBWT) and dilated portal vein diameter (PVD) were also more common in males than in females. Hepatosplenomegaly was frequently encountered; 68.1% had left liver lobe hepatomegaly and 55.2% had splenomegaly. Schistosoma mansoni-related morbidity is quite high among adults in this community justifying the implementation of integrated control strategies through mass drug administration, improved water supply (pumped wells), and health education that had already started in the study area.
Mendoza-Oliveros, Tahali;Arana-Argaez, Victor;Alvarez-Sanchez, Leidi C.;Lara-Riegos, Julio;Alvarez-Sanchez, Maria Elizbeth;Torres-Romero, Julio C.
Parasites, Hosts and Diseases
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제57권1호
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pp.33-38
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2019
Trichomoniasis is a common sexually transmitted infection caused by Trichomonas vaginalis, which actually does not exist a vaccine for control or prevention. Thus, the identification of new and potent immunogens in T. vaginalis, which can contribute to the development of a vaccine against this parasite, is necessary. Therefore, the aim of this work was to evaluate the potential of a recombinant Transient Receptor Potential-like channel of T. vaginalis (TvTRPV), as a promising immunogen in BALB/c mice. First, TvTRPV was cloned and expressed as a recombinant protein in Escherichia coli BL21 cells and purified by nickel affinity. Next, BALB/c mice were immunized and the antibody levels in mice serum and cytokines from the supernatant of macrophages and from co-culture systems were evaluated. Recombinant TvTRPV triggered high levels of specific total IgG in sera from the immunized mice. Also, a statistically significant increase of cytokines: $IL-1{\beta}$, IL-6, and $TNF-{\alpha}$ after stimulation with the corresponding antigens in vitro, was identified. Moreover, co-cultures using $CD4^+$ T cells from immunized mice were able to identify higher levels of IL-10 and $IFN-{\gamma}$. These results were useful to validate the immunogenicity of TvTRPV in BALB/c mice, where IL-10-$IFN-{\gamma}$-secreting cells could play a role in infection control, supporting the potential of TvTRPV as a promising target for vaccine against T. vaginalis.
Ahmadpour, Ehsan;Ebrahimzadeh, Mohammad Ali;Sharif, Mehdi;Edalatian, Sara;Sarvi, Shahabeddin;Montazeri, Mahbobeh;Mehrzadi, Saeed;Akbari, Mohammad;Rahimi, Mohammad Taghi;Daryani, Ahmad
대한약침학회지
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제22권3호
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pp.154-159
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2019
Objectives: Toxoplasmosis is a worldwide health problem that caused by intracellular apicomplexan parasite, Toxoplasma gondii (T. gondii). Considering that the available drugs for toxoplasmosis have serious host toxicity, the aim of the current study was to survey the in vitro and in vivo anti-Toxoplasma activity of Zea mays (Z. mays) and Eryngium caucasicum (E. caucasicum) extracts. Methods: Four concentrations (5, 10, 25, and $50mg\;mL^{-1}$) of Z. mays and E. caucasicum methanolic extracts for 30, 60, 120, and 180 min were incubated with infected macrophages and then the viability of RH strain of T. gondii tachyzoites was evaluated by trypan blue staining method. Also, we evaluated the survival rate of acutely infected mice with the extracts (100 and $200mg\;kg^{-1}\;day^{-1}$) intraperitoneally for 5 days after infection with $2{\times}104$ tachyzoites of T. gondii. Results: The anti-Toxoplasma effect of the methanolic extracts were extremely significant compared to the negative control group in all exposure times (P < 0.05). The Z. mays (10, 25 and $50mg\;mL^{-1}$) killed 100% of the parasites after 180 and 120 min exposure, respectively. Also, high toxoplasmacidal activity was observed with E. caucasicum extract. Furthermore, treatment of experimentally infected mice with the Z. mays (100, $200mg\;kg^{-1}\;day^{-1}$) and E. caucasicum ($100mg\;kg^{-1}\;day^{-1}$) significantly increased their survival rate compared to untreated infected control (P < 0.05). Conclusion: These extracts are promising candidates for further medicine development on toxoplasmosis. However, further investigations are necessary to clarify effective fractions of the Z. mays and E. caucasicum extracts and the mechanisms of action.
This study aimed to develop a new multiplex real-time PCR detection method for 3 species of waterborne protozoan parasites (Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, and Cyclospora cayetanensis) identified as major causes of traveler's diarrhea. Three target genes were specifically and simultaneously detected by the TaqMan probe method for multiple parasitic infection cases, including Cryptosporidium oocyst wall protein for C. parvum, glutamate dehydrogenase for G. lamblia, and internal transcribed spacer 1 for C. cayetanensis. Gene product 21 for bacteriophage T4 was used as an internal control DNA target for monitoring human stool DNA amplification. TaqMan probes were prepared using 4 fluorescent dyes, $FAM^{TM}$, $HEX^{TM}$, $Cy5^{TM}$, and CAL Fluor $Red^{(R)}$ 610 on C. parvum, G. lamblia, C. cayetanensis, and bacteriophage T4, respectively. We developed a novel primer-probe set for each parasite, a primer-probe cocktail (a mixture of primers and probes for the parasites and the internal control) for multiplex real-time PCR analysis, and a protocol for this detection method. Multiplex real-time PCR with the primer-probe cocktail successfully and specifically detected the target genes of C. parvum, G. lamblia, and C. cayetanensis in the mixed spiked human stool sample. The limit of detection for our assay was $2{\times}10$ copies for C. parvum and for C. cayetanensis, while it was $2{\times}10^3$ copies for G. lamblia. We propose that the multiplex real-time PCR detection method developed here is a useful method for simultaneously diagnosing the most common causative protozoa in traveler's diarrhea.
닭의 맹장 상피세포에 기생하여 출혈, 설사 등을 일으키는 구충류(구충류. Coccidia인 Eimerin tenella는 감염 초기에 상피 내 림프구(intraepithelial Lymphocyte; IEL)와 같은 면역계 세포로 먼저 침입하는 것이 잘 알려져 있다. 이 연구는 E. tenella가 면역계 세포 내로 들어가는 것이 추후 충체 생존 및 발육에 도움이 되는 과정인지를 알아보고자 한 것으로, 분리하기 쉬운 닭의 비장 세포를 면역계 세포로 이용하고 MDBK(Madin-Darby bovine kidney) 세포를 시험관 내(in nitre) 숙주세포로 하여 E. tenella의 생존 및 발육 능력을 정량적으로 측정한 것이다. 실험 과정은 3단계로 나누어 첫째 MDBK 세포가 숙주세포로 적합한지 우선 형태학적으로 관찰한 후, 둘째 E. tvnella sporozoites의 발육, 중식 상황을 3H-uracil 동위원내 흡수시험으로 정량화할 수 있는지 알아보고, 셋째 이 방법을 이용하여 sporozoites를 비장세포와 혼합배양한 후에는그 발육, 중식 능력이 어떻게 변화하는지 관찰하였다. MDBK 세포에 탈낭 직후의 정상 sporozoites를 직접 감염시켜 발육상황을 형태학적으로 관찰한 바 감염 3∼4일에 영양형 및 분열체(schizonts)가 완성되고 merosoites가 터져 나와 다른 세포로 침입하는 분열증식(schizogony)이 활발히 영위되고 있는 것이 확인되었다. 또 3H-uracil 흡수는 감염 12시간부터 뚜렷이 나타났고 48∼60시간에 peak에 달한 다음 서서히 감소하였다. 3H-uracil 흡수량은 sporozoites 감염 농도에 따라서도 변화하였으나 탈낭 후 MDBK 세포 감염까지의 시간 경과 에 따라 현저히 감소하였다. 그러나 sporozoites를 비장세포와 함께 4∼12시간 시험관 내에서 먼저 혼합배양한 다음 MDB노 세포에 감염시켰을 때 3H-uracil 흡수량은 sporozoites만을 태양한 대조군 에 비해 항상 높아 비장세포와의 혼합배양 후 발육증식이 더욱 활발해지는 것으로 나타났다. 이상의 결과로 보아 E. tenella의 sporosoites가 생체 내에서 IEL과 같은 면역계 세포에 침입하는 것이 충체 생존이나 발육에 있어서 비록 필수적인 것은 아니지만 자신의 생존이나 발육능력을 보존 또는 항진시키는데에 도움을 주는 과정의 하나로 판단되었다.
Infections of Toxoplasma gondii and Babesia microti are reported in many wild animals worldwide, but information on their incidence and molecular detection in Korean wild fields is limited. In this study, the prevalence of T. gondii and B. microti infection in blood samples of 5 animal species (37 Chinese water deer, 23 raccoon dogs, 6 roe deer, 1 wild boar, and 3 Eurasian badgers) was examined during 2008-2009 in Gangwon-do (Province), the Republic of Korea (=Korea) by using serological and molecular tests. The overall seropositivity of T. gondii was 8.6% (6/70); 10.8% in Chinese water deer, 4.3% in raccoon dogs, and 16.7% in roe deer. PCR revealed only 1 case of T. gondii infection in Chinese water deer, and phylogenic analysis showed that the positive isolate was practically identical to the highly pathogenetic strain type I. In B. microti PCR, the positive rate was 5.7% (4/70), including 2 Chinese water deer and 2 Eurasian badgers. Phylogenetic analysis results of 18S rRNA and the ${\beta}$-tubulin gene showed that all positive isolates were US-type B. microti. To our knowledge, this is the first report of B. microti detected in Chinese water deer and Eurasian badger from Korea. These results indicate a potentially high prevalence of T. gondii and B. microti in wild animals of Gangwon-do, Korea. Furthermore, Chinese water deer might act as a reservoir for parasite infections of domestic animals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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