• Applied Microscopy
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• 제27권4호
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• pp.403-416
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• 1997

In order to observe the localization of the specific antigenic protein in the tissue of Paragonimus westermani metacercaria, immunogoldlabeling method was applied using IgG of the dog which were infected with Paragonimus westermani metacercaria and IgG of rabbits which were immunized with purified 23 kDa protein from metacercaria of the Paragenimus westermani. The metacercaria worm tissues obtained from Cambaroides similis were embedded in Lowicryl HM20 medium, treated with infected and immunized IgG and protein A gold complex (particle size; 12 nm) and observed by electron microscope. In the tissue antigen of Paragonimus westermani metacercaria, the content of excretory bladder which was highly dense electron density was constituted in the excretory bladder of the parenchymal tissue. In the metacercaria tissues antigen reacted with IgG of infected dog. Labeled gold particles distributed on the interstitial matrix of parenchymal cells, fibrous granules of parenchymal tissue and the content of excretory bladder. High antigenicity was observed on content of excretory bladder. It was found to be specifically distributed at the tissue of Paragonimus westermani metacercaria. In the tissues antigen reacted with IgG of immunized rabbit. Labeled gold particles randomly distributed on the interstitial matrix and fibrous granules of parenchymal tissue but in the content of excretory bladder of Paragonimus westermani metacercaria, gold particles were richly labeled. Therefore, the 23 kDa protein contained with Paragonimus westermani metacercaria was found protein which was specifically constituted at the content of excretory bladder of Paragonimum westermani metacercaria. The 23 kDa protein was commonly contained from of Paragonimus westermani metacercaria to adult and showed strong antigenicity against the immunized and infected IgG.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제30권1호
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• pp.43-48
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• 1992

폐흡충(Paragonimus westermani) 피낭유충을 마우스에 감염시킨 후 in vitro상에서 비장 림프구에 폐흡충 항원, phytohemagglutinin(PHA) 및 혈청 첨가시 림프구 아세포화 반응을 관찰하였다. PHA로 자극시킨 감염 마우스의 비장 림프구는 비감염군에 비해 감염 1 주 후에 평균 53.6%의 유의한 증식 억제를 관찰하였고, 폐흡충 성충항원으로 자극시킨 경우 감염 마우스의 비장 림프구의 증식은 감염 1 주 후부터 6 주까지 비감염군에 비해 중가되었으며 특히 감염 1 주와 4 주 후에는 각각 평균 200.9% 및 280.2%의 유의한 수준으로 증가되었다. 또한 피낭유충 항원으로 감염 마우스의 비장 림프구를 자극시에도 비감염군의 림프구의 증식에 비해 전반적으로 증가되었으며 특히 감염 4 주 째에는 평균 180.5%의 유의한 수준으로 증가하였다. 폐홉충에 감염된 마우스의 감염 4 주 째 혈청을 PHA로 자극시킨 비감염 마우스 비장 림프구에 첨가하였을 때 유의한 수준의 증식의 억제를 관찰하였다. 이러한 결과들로 보아 폐흡충 감염 마우스에서 림프구가 세포 매개성 면역에 관여하며 감염 혈청이 PHA에 대한 T 림프구의 증식을 억제함을 알 수 있었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제55권3호
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• pp.347-350
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• 2017

An epidemiological study was performed to know the recent infection status of Paragonimus westermani metacercariae (PwMc) in freshwater crayfish, Cambaroides similis, from 2 streams in Jeollanam-do, Republic of Korea. Crayfish were collected from creeks in Bogil-do (Island), Wando-gun, and in a creek near Daeheung Temple in Haenam-gun. The infection rate of crayfish with PwMc in Bogil-do was 89.8%, and the metacercarial burden was 37 PwMc per the infected crayfish. Crayfish in a creek near Daeheung Temple were larger and twice heavier than those in Bogil-do. Of them, 96.5% were infected with PwMc. An average of 140 metacercariae was found in the infected crayfish, almost quadruple to those of Bogil-do. There was a strong correlation between the number of PwMc and body weight of the crayfish. These results suggest that P. westermani metacercariae are still prevalent in crayfish of the 2 regions in Jeollanam-do, Korea.

• 농촌의학ㆍ지역보건
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• 제7권1호
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• pp.66-73
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• 1982

Paragonimus westermani is one of the most popular endemic parasitic diseases in Korea. The nation-wide prevalence survey were carried out by Gobayashi (1921) with sputum examination and by Walton and Chyu (1959) with the intradermal skin test respectively. Recent studies showed the decline of positive rate in intradermal skin test of the local inhabitants and also showed the less distribution of intermediate host. The fact seemed that caused by economic improvement of village people, decrease of intermediate host by increasing use of pesticides, becoming lower water level at streams and rivers and better irrigation and finally by better community health education etc. Gangwha area of Gyeonggi-Do was found out as an endemic area of Paragonimus westermani through some studies in the past, however, in the vicinity area of Gangwha, the study in Kyodong island (myon) was carried out in 1965 by Yun et al. Therefore author carried out the intradermal skin test for 2,380 students of primary, middle and high school in Kyodong island and Samsan island. The results showed as follows : 1) The positive rate of intradermal test for paragonimus westermani infection showed positive in 152 among 1,845 students (8.2%) in Kyodong island, and 21 among 637 students (3.3%) in Samsan island respectively. 2) According to grade levels, 49 among 973 students (5.0%) in primary school, 62 among 962 students (6.4%) in middle school and 53 among 445 students (11.9%) in high school showed positive rate. This showed the higher grade the higher positive rate. 3) Among these total 164 positive cases in the intradermal skin test, only in 3 cases eggs were found in sputum. 4) Finding out the intermediate host, only 28 crayfishes from Kyodong island and 12 from Samsan island were collected and examined for metacercaria infection, however, none of metacercaria was found. 5) As a control group, 2 primary schools from the main island were selected. In these schools from the sixth grade students showed positive rate of 4.8% in Naega primary school and 0% in Hajeom Primary school respectively. Those results showed much decrease than studies carried out in the past. 6) The survey for food habit showed that 15 among 1,274 students (1.2%) had experiences of eating raw intermediate host(crayfish) and 266 among 988 students (27.0%) ate cooked.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제29권2호
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• pp.189-192
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• 1991

폐흡충증은 우리나라에서 아직도 중요한 기생충질환으로서 서울의 한 대학병원에서 지난 10년간 105례가 발견되는 등 감염이 계속 발생하고 있으며 이 환자중 시장에서 민물게를 구입하여 게장을 담궈 먹은 과거력이 54% 에서 증명되었다. 이 관습은 일부 가정에 남아 있으므로 폐홉충증은 가족단위로 발생하는 경향을 보이고 있다. 민물게장이 폐흡충증의 중요 원인임에도 불구하고 민물게의 퍼낭유충 감염상태에 대한 조사결과는 대단히 적다. 따라서 1990년 9월부터 12월까지 서울의 시장에서 동남참게 85마리를 구입하고 폐홉충 피낭유충 감염상태를 조사하였다. 그 결과는 다음과 같다. 1. 구입한 민물게는 분류상 모두 동남참게 (nriocheir iaponicus)이었고 참게(5. sinensis)는 없었다. 종별 분 포에 대한 현지조사가 필요하다고 생각한다 2. 참게를 파쇄(파수), 3회 세척 여과하고, 침전물을 해부현미경으로 관찰한 결과 감염율은 11.8%이었고 평균 감염 충체수는 2.1개이었다. 3. 참게 무게별 감염율은 509 이하 43마리중 11.6%, 51∼1009 31마리중 12.7%, 1019이상 11마리중 9. l%이었다. 전국 각지에서 서울로 모아 판매하는 참게는 아직도 사람의 폐흡충 감염원이라고 판단하였다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제25권2호
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• pp.129-140
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• 1987

The present study was undertaken to demonstrate the surface structure of Paragonimus westermani metacercaria in Korea with special reference to the distribution of sensory papillae. Metacercariae were isolated from crayfish, one of the second intermediate tost of P. westermani in Bogil island, Chollanam-do (Province), Korea, where has been known as an endemic area of human paragonimiasis. Isolated metacercariae were encysted and examined with light. scanning and transmission electron microscopes for morphological features. On the surface of iBetacercariae, three types of sensory FaFillae were identified. Large domed papillae ($3~5{\mu\textrm{m}}$), which were covered with wrinkled plasma n!embrane of the worm, were distributed on the oral and ventral suckers only. On the oral sucker, these large domed papillae were 12~13 in number. On the other hand large domed papillae on the ventral sucker were constantly 6 in number and hexagonal in distribution. Small domed papillae ($2~3{\mu\textrm{m}}$), of which surface was more smooth than those of large ones, were distributed symmetrically on the ventral (30~32 pairs) and dorsal surfaces (40~42 Pairs). Ciliated Papillae ($0.8~1.5{\mu\textrm{m}}$) were observed about 5~6 in number around the oral sucker and 3~5 pairs each on the ventral and dorsal surface of the body. Single Fcinted spines covered the entire surface of the body except around the excretory pore. Spines on the anterior fart of the body were 0.9~2.0${\mu\textrm{m}}$ in length and $45~55/100{\mu\textrm{m}}$2 in number, and were gradually reduced in length ($0.4~1.4{\mu\textrm{m}}$) and in nuns.her ($12~27/100{\mu\textrm{m}}$2) toward the posterior part. The body wall of p. westermoni metacercariae was consisted with anucleated syncytium layer, fibrous interstitial layer and musclar layer. In the anucleated syncytium, biconcave ($0.15~0.55{\mu\textrm{m}}$) and spherical ($0.08~0.16{\mu\textrm{m}}$) secretory granules, which were transferred from epidermal cells via protoplasmic tubules, mitochondria and rihoEorses, T-ere observed. Spines originated around the basement membrane protruded externally. Epidermal cells were consisted with a nucleus and a cytoplasm, and connected to syncytium with protoplasmic tubules. In the cytoplasm many secretory granules, mitochondria, Golgi complex, endoplasmic reticula, ribosomes and lipid droplets were observed.

• Applied Microscopy
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• 제30권1호
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• pp.101-111
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• 2000

기생충에서 세포 표면에 존재하는 당단백 말단 Glc-NAc(N-acetylglucosa-mine)와 NeuNAc (N-acetylneuraminic acid)가 숙주 면역계를 인식하고 영양물질 흡수와 막 투과성에 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌다. 이들 당단백 말단 GlcNAc와 NeuNAc의 폐흡충 피낭유충과 유약성충, 성충의 충체 조직세포에 분포를 확인하기 위하여 WGA 황금입자 복합체를 반응시켰다. WGA 황금입자 복합체에 반응시킨 폐흡충 발육 단계별 조직을 전자현미경으로 관찰한 결과 폐흡충 피낭유충의 표피합포체에는 황금입자가 고밀도로 표지된 것이 관찰되어 폐흡충 피낭유충 표피세포질에 lectin수용체들이 고밀도로 분포하는 것으로 관찰되었다. 유약성충과 성충의 맹관 막구조물에 WGA 황금입자가 고밀도로 표지되어 맹관의 상피세포 막 구조물에 WGA 수용체들이 고밀도로 분포하는 것으로 확인되었다. 폐흡충 피낭유충과 유약성충 그리고 성충의 배설관 상피의 막구조물에 WGA 황금입자가 표지되어 배설관상피의 막구조물에 WGA 수용체가 분포하는 것으로 확인되었다. 따라서 피낭유충의 표피합포체와 표피세포의 세포질에 분포하는 WGA 수용체인 GlcNAc와 NeuNAc는 숙주의 면역계와 세포인식에 관여하며 유약성충과 성충은 표피세포의 GlcNAc와 NeuNAc는 소멸되고 맹관과 배설관 상피에 GlcNAc와 NeuNAc가 분포하여 영양물질 흡수와 막수송에 의한 재흡수작용이 활발한 것이 확인되었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제26권2호
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• pp.73-86
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• 1988

간흡충(Clonorchis sinensis)의 조항원(WWA), 정제항원(ABA)의 민감도와 특이도를 비교해 보는 한편, 발육단계별로 충란 항원(EGA)-피낭유충 항원(MEA)-성충 항원(WWA)의 단백질 구성물질의 차이를 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)로 관찰하고 이들 항원의 유용성을 효소면역반응(enzyme-linked immunosorbent assay: ELISA)으로 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 간흡충의 조항원으로부터 정제된 항원(ABA)은 항체와 결합한 결합항원(affinity-purified antibody(IgG) binding antigen:ABA)으로서 Ouchterlony 반응으로 간흡충 감염 가토혈청과 4개의 침모대 (WWA는 7개)를 형성하였다. WWA의 major protein들은 분자량 16,300∼18,500 및 28,000∼29,000 dalton의 Polypeptide band였고, ABA는 분자량 18,000∼21,000 및 29,000∼31,000 dalton의 단백질로 다소의 차이를 보였다. ELISA시첩에서 ABA는 WWA에 비해 현저히 민감도가 낮았다. WWA와 ABA에 대한 폐흡충 감염 사람혈청의 ELISA 정사에서 WWA는 Ouchterlony 양성자 8예중 3예에서 교차반응을 나타내었으나 ABA는 교차반응을 나타내지 않았다. 간흡충의 발육단계별 항원 단백질의 분자량 범위는 WWA 11,000∼80,000, MEA 15,000∼100,000, EGA 15,000∼200,000 dalton이었다. 주류원 단백질의 분자량은 EGA는 각각 36,600 (band No. 22), 38,500(No. 20), 64,000(No. 9), 62,000(No. 10), 54,500(No. 11), 53,000(No. 12) dalton, MEA는 각각 65,600(No. 3), 44,700 (No.7), 43,900(No. 8) dalton, WWA는 각각 16,300∼18,500(No. 31-32), 28,000∼29,000(No. 25), 11,000w13,000 (No. 35) 및 31,000(No. 24) dalton이었다. 즉, MEA와 EGA가 WWA보다 고분자의 단백질로 구성되어 있었다. 각 발육단계별 항원의 항원성은 ELISA 반응으로 볼 때 WWA가 가장 높았고, MEA는 약한 항원성만을 나타내었으며 EGA는 음성이었다. WWA와 간흡충 감염 가토혈청은 감염 4∼6주에 OD>1.0, 12주 이후 항체가의 plateau를 나타내었으나 MEA는 Ouchterlony 반응에서 EGA와 함께 음성반응을 보였다. ELISA에서도 중감염군(12∼20주)에서만 OD>0.6으로 미약한 항원성이 인정되었으며 경감염군은 전감염기간중 OD<0.6를 나타내었다. 이상의 결과로 보아 성충 항원이 가장 강력한 함원성 물질을 포함하고 있음이 명백하다고 생각된다. 그러나 성충 조항원은 면역진단에 사용할 겹우 타흡충과의 빈번한 교차반응이 예상되므로 민감도 및 특이도가 높은 정제 항원물질을 분리하는 일이 중요하다고 생각된다.