The reaction of N,N-diethyl carbamates of 1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyridin-1-ol (4-HOAt) 7, 3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyridin-3-ol (7-HOAt) 8, 1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-ol (HOBt) 9, 6-chloro-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-ol (Cl-HOBt) 10, 6-(trifluoromethyl)-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-ol ($CF_3$-HOBt) 11, and 6-nitro-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-ol ($NO_2$-HOBt) 12 with morpholine and piperidine in $CH_3CN$ underwent acyl nucleophilic substitution to give the corresponding carboxamide derivatives. The reactants and products were identified by elemental analysis, IR and NMR. We measured the kinetics of these reactions spectrophotometrically in $CH_3CN$ at a range of temperatures. The rates of morpholinolysis and piperidinolysis were found to fit the Hammett equation and correlated with $\sigma$-Hammett values. The values were 1.44 - 1.21 for morpholinolysis and 1.95 - 1.72 for piperidinolysis depending on the temperature. The $Br{\phi}$nsted-type plot was linear with a $\beta_lg = -0.49 \pm 0.02$ and $-0.67 \pm 0.03$. The kinetic data and structure-reactivity relationships indicate that the reaction of 9-12 with amines proceeds by a concerted mechanism. The deviation from linearity of the correlation ${\Delta}H^#$ vs. ${\Delta}S^#$ and plot of $logk_{pip}$ vs. $logk_{morph}$ and $Br{\phi}$nsted-type correlation indicate that the reactions of amines with carbamates 7 and 8 is attributed to the electronic nature of their leaving groups.
미꾸라지 (mudloach, Misgunus mizolepis)의 간으로부터 클로닝한 phosphoinositide-specific phospholipase C$\delta$ (ML-PLC$\delta$)를 대장균 (E. coli)에서 과발현시켜 만든 재조합 ML-PLC$\delta$와 미꾸라지 간 조직으로부터 직접 정제한 ML-PLC$\delta$의 생화학적 특성을 비교분석하였다. 우선, pET28a vector (Novagen)를 이용하여 E. coli BL21(DE3)에서 과발현된 재조합 ML-PLC$\delta$은 $Ni^{2+}$-NTA affinity 크로마토그래피 및 gel filtration 칼럼에 의해서 정제되었다. 미꾸라지 간 조직으로 ML-PLC$\delta$는 open heparin 칼럼 및 분석용 heparin 칼럼등을 통하여 부분 정제하였다. 두개의 재조합 및 wild ML-PLC$\delta$는 phosphatidylinositol 4,5-bis-phosphate ($PIP_2$)에 대한 농도 의존적 PLC 활성을 보여주었고, 그 활성은 포유류 PLC$\delta$ 효소와 유사하게 칼슘 농도에 의존적인 활성을 나타내었다. 재조합 및 wild ML-PLC$\delta$는 각각 pH 7.0 및 7.5에서 가장 큰 PI-가수분해 활성을 나타낸다는 사실을 알 수 있었다. 게다가, 재조합 및 wild ML-PLC$\delta$는 sodium doecylcholate (SDC) 및 phosphatidylethanolamine (PE), phosphatidylcholine (PC)와 같은 지질류에 대하여 농도의존적인 활성을 나타내나, spermine과 같은 polyamine류의 존재하에서는 농도 의존적으로 PLC 활성이 감소됨을 알 수 있었다. 미꾸라지 각 기관들의 ML-PLC$\delta$의 발현양상 및 양등을 측정하여 보았을 때 ML-PLC$\delta$는 포유류 PLC$\delta$와 마찬가지로 다양한 형태의 PLC$\delta$가 존재함을 알 수 있었다. 이와 같은 결과들로 미루어서 미꾸라지로부터 얻은 ML-PLC$\delta$는 포유류의 PLC$\delta$ isozymes과 유사한 형태의 생화학적 특성을 가지나, 포유류 PLC$\delta$1과 PLC$\delta$3 isozyme의 생화학적 특성을 함께 가짐을 알 수 있었다.
Two piperazine-templated metal sulfate complexes, $(C_4N_2H_{12})[Ni(H_2O)_6](SO_4)_2$, I and ($C_4N_2H_{12}$) $[Co(H_2O)_6](SO_4)_2$, II, have been synthesized by hydro/solvothermal reactions and their crystal structures analyzed by single crystal X-ray diffraction methods. Complex I crystallizes in the monoclinic system, $P2_1/n$ space group, a=12.920(3), b=10.616(2), $c=13.303(2){\AA}$, ${\beta}=114.09(1)^{\circ}$, Z=4, $R_1=0.030$ for 3683 reflections; II: monoclinic $P2_1/n$, a=12.906(3), b=10.711(2), $c=13.303(2){\AA}$, ${\beta}=114.10(2)^{\circ}$, Z=4, $R_1=0.032$ for 4010 reflections. The crystal structures of the piperazine-templated metal(II) sulfates demonstrate zero-dimensional compound constituted by diprotonated piperazine cations, metal(II) cations and sulfate anions. The structures of complex I and II are substantially isostructural to that of the previously reported our piperazine-templated copper(II) sulfate complex $(C_4N_2H_{12})[Cu(H_2O)_6](SO_4)_2$. The central metal(II) atoms are coordinated by six water molecules in the octahedral geometry. The crystal structures are stabilized by three-dimensional networks of the $O_{water}-H{\cdots}O_{sulfate}$ and $N_{pip}-H{\cdots}O_{sulfate}$ hydrogen bonds between the water molecules and sulfate anions and protonated piperazine cations. Based on the results of thermal analysis, the thermal decomposition reactions of the complex I was analyzed to have three distinctive stages whereas the complex II proceed through several stages.
최대 1800W의 열부하를 발생하는 전력반도체를 냉각하는 히트파이프 히트싱크를 설계하고 제작하였다. 히으파이프 냉각장치는 4개의 외경 22.23mm 인 FC-72 히트파이프, 알루미늄 블록 (130${\times}$160${\times}$35mm) 및 126개의 알루미늄핀 (250${\times}$58${\times}$0.8mm)으로 구성되어 있다. 성능 실험결과 총열저항은 1~2kW의 열부하일때 2~3m/s의 풍속에 풍속의 증가에 따라 0.02~0.018$^{\circ}C$/W 를 나타냈다. 이 결과는 3 m/s의 풍속에서 1800W의 열부하가 주어질 때 $40^{\circ}C$미만의 온도상승을 나타내는 것으로 설계 목표를 잘 만족하였다. 이 외로 대류 및 히트파이프의 열저항의 실험값은 몇가지 상관식에 의한 예측값과 비교적 잘 일치하였다.
To understand the function of phospholipids and their fatty acid composition on the morphological changes in the amp 1-4 mutant of Arabidopsis, the mutant was compared to the wild-type Arabidopsis by TLC, HPTLC, phosphorous assay, HPLC, and GC. In the mutant, phosphatidylethanolamine (PE) was increased 5-fold and phosphatidylglycerol (PG) was decreased 1.2-fold (nmol phosphorous/g tissue). Inositol phospholipids showed a generally increased trend ranging from 1.4-to 3.0-fold (nmol inositol/g tissue). When fatty acid composition of the mutant was compared to the wild-type, linoleic (18:2) and linolenic (18:3) acids of phosphatidylcholine (PC) and PG were decreased but palmitoleic acid (16:1) and oleic acid (18:1) of PC was increased 2.5- and 2.1-fold (mol%), respectively. In galactolipids, myristic acid (14:0) of monogalactosyl-diacylglycerol (MGDG) were increased 5.8-fold (mol%). Among the inositol phospholipids, lysophosphatidylinositol (L-PI) and phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate ($PIP_2$) showed 4-and 1.9-fold (mol%) increase of 16:1, respectively. These results suggest that the increase of PE, the decrease of PG, the increase of inositol phospholipids, and the altered fatty acid composition are related to the phenotypic changes affecting the morphological features, and might cause different physiological changes in the amp 1-4 mutant compared to wild-type Arabidopsis.
Purpose: To report the clinical results of the use of arterialized venous free flaps in reconstruction in soft tissue defects of the finger and to extend indications for the use of such flaps based on the clinical experiences of the authors. Materials and Methods: Eighteen patients who underwent arterialized venous free flaps for finger reconstruction, between May 2007 and July 2009 were reviewed retrospectively. The mean flap size was 4.7${\times}3.2$ cm. The donor site was the ipsilateral volar aspect of the distal forearm in all cases. There were 8 cases of venous skin flaps, 5 cases of neurocutaneous flaps, 4 cases of tendocutaneous flaps, 1 case of innervated tendocutaneous flap. The vascuality of recipient beds was good except in 4 cases (partial devascuality in 2, more than 50% avascuality (bone cement) in 2). Results: All flaps were survived. The mean number of included veins was 2.27 per flap. Mean static two-point discrimination was 10.5 mm in neurocutaneous flaps. In 3 of 5 cases where tendocutaneous flaps were used, active ROM at the PIP joint was 60 degrees, 30 degrees at the DIP joint and 40 degrees at the IP joint of thumb. There were no specific complications except partial necrosis in 3 cases. Conclusions: An arterialized venous free flap is a useful procedure for single-stage reconstruction in soft tissue or combined defect of the finger; we consider that this technique could be applied to fingers despite avascular recipient beds if the periphery of recipient bed vascularity is good.
연구배경: 활성산소종은 기계환기로 인한 폐손상 (ventilator-induced lung injury, VILI)에서 주요한 역할을 한다. Poly (ADP-ribose) polymerase-1 (PARP1)은 DNA 손상 감시 기능을 하는 단백질로서, DNA 파열을 신호하고 복구에 관여한다. 그러나 활성산소종에 의한 것과 같은 심한 유전자 손상을 받게 되면, 과활성화되어 ${\beta}$-nicotinamide adenine dinucleotide ($NAD^+$)의 결핍을 통한 세포의 사멸을 초래하여, 염증 반응을 일으킨다. 본 연구에서는 VILI의 기전에 있어서 PARP1의 역할 및 그 억제제의 효과를 고찰하고자 하였다. 방법: 48마리의 수컷 C57BL/6 생쥐를 겉보기 수술군 (Sham군), 폐보호적 환기군(lung protective ventilation group, LPV군), 기계환기기로 인한 폐손상군 (ventilator-induced lung injury group, VILI군) 및 PARP1 억제제인 PJ34 전처치 후 기계환기로 인한 폐손상군 (PJ34+VILI군)으로 나누어 실험하였다. LPV군에 대한 기계환기는 $PIP\;15cmH_2O$ + $PEEP\;3cmH_2O$ + RR 90/min. 조건으로, VILI 및 PJ34+VILI군에 대해서는 $PIP\;40cmH_2O$ + $PEEP\;0cmH_2O$ + RR 90/min.의 조건으로 2시간 동안 시행하였다. PJ34+VILI군에서 PARP1 억제제로는, PJ34 20 mg/Kg을 기계환기 2시간 전에 복강 내로 주사하였다. VILI의 정도는 습건중량비 및 급성폐손상 지수로 측정하였고, PARP1의 활성은 biotinylated NAD를 이용한 면역조직화학적 방법을 이용하였다. 또한 기관지폐포세척액 (bronchoalveolar lavage fluid, BALF) 내에서 myeloperoxidase (MPO) 활성 및 tumor necrosis factor-${\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ ($IL-1{\beta}$), IL-6 등의 염증성 시토카인의 농도를 측정하였다. 결과: PJ34+VILI군에서 VILI군과 비교하여, PJ34 전처치로 인하여 폐손상의 정도가 현저히 감소하였다 (p<0.05). 5개의 고배율 시야에서 관찰한 PARP1의 활성을 보이는 세포의 수는 VILI군에서 유의하게 증가하였고, PJ34+VILI군에서 현저히 감소하였다 (p=0.001). BALF 내에서 측정한 MPO 활성 및 $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, IL-6의 농도 역시 PJ34+VILI군에서 의미 있게 감소하였다 (p<0.05). 결론: VILI의 기전에 있어서 PARP1의 과활성이 주요한 역할을 하고, PARP1 억제제가 MPO 활성 및 염증성 시토카인의 감소와 함께 VILI의 발생을 억제한다.
The title compound, $\{H_2NCH_2CH_2NH_2CH_2CH_2\}\{Cu(H_2O)_6\}(SO_4)_2$, I, has been synthesized under solvo/hydrothermal conditions and their crystal structure analyzed by X-ray single crystallography. Compound I crystallizes in the monoclinic system, $P2_1/n$ space group with a = 6.852(1), b = 10.160(2), $c=11.893(1){\AA}$, ${\beta}=92.928(8)^{\circ}$, $V=826.9(2){\AA}^3$, Z = 2, $D_x=1.815g/cm^3$, $R_1=0.031$ and ${\omega}R_2=0.084$. The crystal structure of the piperazine templated Cu(II)-sulfate demonstrate zero-dimensional compound constituted by doubly protonated piperazine cations, hexahydrated copper cations and sulfate anions. The central Cu atom has a elongated octahedral coordination geometry. The crystal structure is stabilized by three-dimensional networks of the intermolecular $O_{water}-H{\cdots}O_{sulfate}$ and $N_{pip}-H{\cdots}O_{sulfate}$ hydrogen bonds between the water molecules and sulfate anions and protonated piperazine cations. Based on the results of thermal analysis, the thermal decomposition reaction of compound I was analyzed to have three distinctive stages.
한국응용약물학회 1998년도 Proceedings of UNESCO-internetwork Cooperative Regional Seminar and Workshop on Bioassay Guided Isolation of Bioactive Substances from Natural Products and Microbial Products
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pp.197-197
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1998
Chronic electroconvulsive shock(ECS) was shown to Increase phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate(PIP$_2$) breakdown and the activity of PLC with the accumulation of inositol-1,4,5-triphosphate(IP3). The purpose of the present study was to determine the effect of ECS on the expression of phospholipase C(PLC) isotypes in rat brain. Two groups of animals were prepared: sham and ECS treated groups. Rats in ECS treated groups received maximal ECS(70mA, 0.5second, 60㎐) by constant current stimulator through ear-clip to induce tonic extension seizures for 12 consecutive days. The expression of PLC isotypes in rat brain was determined by immunohistochemical procedure using sagital section of rat brain. The immunoreactivity of PLC${\beta}$1 was observed in corpus striatum, hippocampus, thalamus and that of PLC${\gamma}$1 in corpus striatum, hippocampus, thalamus, frontal cortex, parietooccipital cortex, limbic forebrain, pons, medulla, superior colliculus, inferior colliculus, rest of midbrain. The amount of PLC was analyzed by Western blot using antibodies against PLC${\beta}$1 and PLC${\gamma}$1. Chronic ECS reduced the immunoreactivity of PLC${\beta}$1 in corpus striatum, hippocampus, thalamus but had little effect on PLC${\gamma}$1. To quantify this change, quantitative Western blot using antibodies against PLC${\beta}$1 and PLC${\gamma}$1 was conducted. The immunoreactivity of PLC${\beta}$1 in ECS treated rat whole brain was decreased by 40 % in cytosolic fraction and 26 % in membrane fraction. This different effect of ECS on PLC isotypes may results from the difference of their activation mechanisms and the different effects of ECS on them. The results from the present study suggest that chronic ECS primalily affects neurotransmitter receptors related IP$_3$ signaling in rat brain.
배경: Phospholipase C(PLC)는 세포의 성장, 분화, 변형(transformation)과 관련된 세포내 신호 전달과정에 중추적인 역할을 하는 효소이다. 이들 중 PLC-$\gamma$는 tyrosine kinase의 인산화에 의해 주로 활성화되는 데, 최근에 phosphatidic acid(PA), phosphatidy-linositol 3, 4, 5-trisphosphate($PIP_3$), tau 단백에 의한 활성화 기전이 밝혀진 바 있다. 특히 tau 단백은 bovine brain에서 arachidonic acid와 함께 PLC-$\gamma$를 활성화시키는 것으로 알려져 PLC-$\gamma$와 $PLA_2$ 사이의 cross-talk이 이루어질 가능성이 제시되고 있다. 최근 보고에 의하면 tau 단백과 같은 기전으로 PLC-${\gamma}1$ 활성화시키는 단백이 bovine lung에서 발견되었고, 이 활성화 단백을 정제 및 클론하여 AHNAK 단백임이 확인된 바 있다. 또한 PLC-${\gamma}1$이 유방암, 대장암, 위암 등에서 증가되어 있어 발암 과정과 연관되어 있음이 보고되어 왔으나 PLC-${\gamma}1$의 활성화 단백인 AHNAK 단백에 대해서는 질병과 관련되어 연구된 것이 아직 없는 실정이며 저자 등은 폐암 조직과 정상 폐조직에서 AHNAK 단백의 발현 양상을 연구하여 폐암의 발암과정에 AHNAK 단백이 관여함을 밝히고자 하였다. 대상 및 방법: 아주대학교 병원에 내원하여 폐암으로 수술을 받은 환자의 폐암 조직과 동일 환자의 정상 폐조직에서 AHNAK 단백의 발현양상을 western blot 분석과 면역조직화학적 염색방법을 통하여 조사하였다. 결과: 14예의 편평상피암 세포조직 중 8예 (57.1 %)와 14예의 선암 세포조직 모두에서 정상 대조군에 비해 AHNAK 단백의 발현이 증가하였고, 70 kDa~200kDa의 여러가지 분자량을 가지는 띠모양으로 나타났다. 면역조직화학적 염색에서도 정상 폐조직보다 폐암 조직내에서 강한 발색반응을 보였다. 결론: PLC-${\gamma}1$의 활성화 단백인 AHNAK 단백이 폐암 조직에서 정상 조직보다 과발현된 것은, AHNAK 단백이 PLC-${\gamma}1$을 활성화시켜 폐암의 발생 기전에 관여할 수 있음을 뒷받침한다고 하겠다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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