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Biosynthesis of Polymyxins B, E, and P Using Genetically Engineered Polymyxin Synthetases in the Surrogate Host Bacillus subtilis

  • Kim, Se-Yu;Park, Soo-Young;Choi, Soo-Keun;Park, Seung-Hwan
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제25권7호
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    • pp.1015-1025
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    • 2015
  • The development of diverse polymyxin derivatives is needed to solve the toxicity and resistance problems of polymyxins. However, no platform has generated polymyxin derivatives by genetically engineering a polymyxin synthetase, which is a nonribosomal peptide synthetase. In this study, we present a two-step approach for the construction of engineered polymyxin synthetases by substituting the adenylation (A) domains of polymyxin A synthetase, which is encoded by the pmxABCDE gene cluster of Paenibacillus polymyxa E681. First, the seventh L-threonine-specific A-domain region in pmxA was substituted with the L-leucine-specific A-domain region obtained from P. polymyxa ATCC21830 to make polymyxin E synthetase, and then the sixth D-leucine-specific A-domain region (A6-D-Leu-domain) was substituted with the D-phenylalanine-specific A-domain region (A6-D-Phe-domain) obtained from P. polymyxa F4 to make polymyxin B synthetase. This step was performed in Escherichia coli on a pmxA-containing fosmid, using the lambda Red recombination system and the sacB gene as a counter-selectable marker. Next, the modified pmxA gene was fused to pmxBCDE on the chromosome of Bacillus subtilis BSK4dA, and the resulting recombinant strains BSK4-PB and BSK4-PE were confirmed to produce polymyxins B and E, respectively. We also succeeded in constructing the B. subtilis BSK4-PP strain, which produces polymyxin P, by singly substituting the A6-D-Leu-domain with the A6-D-Phe-domain. This is the first report in which polymyxin derivatives were generated by genetically engineering polymyxin synthetases. The two recombinant B. subtilis strains will be useful for improving the commercial production of polymyxins B and E, and they will facilitate the generation of novel polymyxin derivatives.

운동요법과 이완요법이 직장근로자의 ACTH와 Cortisol 호르몬에 미치는 영향 (Effects of Relaxation Therapy and Exercise Therapy on the ACTH and Cortisol Hormone Level in Workers)

  • 김인홍
    • 기본간호학회지
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    • 제8권3호
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    • pp.293-301
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    • 2001
  • Purpose: The purpose of this study was to investigate the effect of exercise therapy and relaxation therapy on the level of ACTH and cortisol in workers and to determine, from this information, the effectiveness of applied exercise therapy and relaxation therapy as a nursing intervention method for workers experiencing stress. Method: The subjects were divided into an exercise therapy group. a relaxation therapy group, and a control group. The research design was a nonequivalent control group pretest-posttest design (exercise therapy : n=12. relaxation therapy: n=12, control group, the group without exercise or relaxation therapy: n= 12). The subjects in the exercise therapy group were given a particular intensity for each kp over 30 min, bicycle ergometer which uses the LX PE training system before and after four weeks of training. The subjects did 60-70% exercise intensity exercise therapy for eight weeks The relaxation therapy subjects were trained using a modified Jacobson's relaxation technique for eight weeks. The exercise and relaxation therapy groups were trained at the following intensity for eight weeks (3 times/week, 30 min/day). Changes in the levels of ACTH and cortisol were identified. Two-way ANOVA and multiple range test (SNK: Student Newman Keul) were used to examine the effects of exercise therapy and relaxation therapy at four and eight weeks. Result: 1. Changes in the level of ACTH in the relaxation therapy group were statistically significant at .05 level, and were better than that of the exercise therapy group after eight weeks. But there was no significant difference between the exercise therapy group and the control group. 2. Change in the level of cortisol in the relaxation therapy group were statistically significant at .05 level as compared to the exercise therapy group and the control group after four weeks, but not after eight weeks. Also, the relaxation therapy was statistically significant at .05 level after four weeks compared to before treatment, but there was a tendency toward increased cortisol after eight weeks. Conclusion: Relaxation therapy was found to be more effective in stress treatment than exercise therapy and as such is a desirable nursing intervention method for stress hormone reduction in workers.

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잎상치의 MA 포장 (Modified Atmosphere Packaging of Leaf Lettuce)

  • 홍석인;김윤지;박노현
    • 한국식품과학회지
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    • 제25권3호
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    • pp.270-276
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    • 1993
  • 잎상치를 $20{\mu}m$ LDPE(perforated), $20{\mu}m$ LDPE, $30{\mu}m$ HDPE, $40{\mu}m$ LDPE 필름으로 포장하여 $4^{\circ}C,\;10^{\circ}C$$20^{\circ}C$에서 저장 중 품질변화를 관찰하였다. 상치의 저장수명에 가장 크게 영향을 미치는 인자는 온도로서 저장온도 $4^{\circ}C$에서 상치 품질이 가장 양호하게 보존되었으며, 무포장구와 비교하여 필름 포장구의 저장수명이 $10{\sim}15$배 가량 더 연장되었다. 포장재질별로는 $20{\mu}m$ LDPE(perforated)와 $20{\mu}m$ LDPE 포장구에서 부패 및 변색이 발생하여 상치의 상품적 가치가 비교적 단기간에 저하되었다. 이에 반해 $30{\mu}m$ HDPE와 $40{\mu}m$ LDPE 포장구에서는 중량감소, 변색, 고형분 함량, 조직감, 부패 등 모든 상치의 품질면에서 우수한 결과를 나타내었으며, 특히 $40{\mu}m$ LDPE 포장구에서 더 우수한 결과를 나타내었다.

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지역 가중치 적용 퍼지 클러스터링을 이용한 효과적인 이미지 분할 (Effective Image Segmentation using a Locally Weighted Fuzzy C-Means Clustering)

  • 나이마 알람저;김종면
    • 한국컴퓨터정보학회논문지
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    • 제17권12호
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    • pp.83-93
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    • 2012
  • 본 논문에서는 기존의 퍼지 클러스터링 기반 이미지 분할의 성능과 계산 효율을 개선하기 위해 퍼지 클러스터링의 목적 함수를 수정하는 이미지 분할 프레임워크를 제안한다. 제안하는 이미지 분할 프레임워크는 주변 픽셀들에 가중치를 부여함으로써 현재 센터 픽셀 연산을 위해 주변 픽셀들의 중요성을 고려하는 지역 가중치 적용 퍼지 클러스터링 기법을 포함한다. 이러한 가중치들은 각 멤버쉽들의 중요성을 표시하기 위해 현재 픽셀과 대응되는 각 주변 픽셀들 사이의 거리차에 의해 결정되어 지며, 이러한 프로세서는 향상된 클러스터링 성능을 보장한다. 제안하는 방법의 성능을 평가하기 위해 분할 계수, 분할 엔트로피, Xie-Bdni 함수, Fukuyzma-Sugeno 함수와 같은 네 가지 클러스터 유효성 함수를 이용하여 분석하였다. 모의실험 결과, 제안한 방법은 기존의 다른 퍼지 클러스터링 기법들보다 클러스터 유효성 함수들뿐만 아니라 분할과 조밀도 측면에서 우수한 성능을 보였다.

Development and application analysis of high-energy neutron radiation shielding materials from tungsten boron polyethylene

  • Qiankun Shao;Qingjun Zhu;Yuling Wang;Shaobao Kuang;Jie Bao;Songlin Liu
    • Nuclear Engineering and Technology
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    • 제56권6호
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    • pp.2153-2162
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    • 2024
  • The purpose of this study is to develop a high-energy neutron shielding material applied in proton therapy environment. Composite shielding material consisting of 10.00 wt% boron carbide particles (B4C), 13.64 wt% surface-modified cross-linked polyethylene (PE), and 76.36 wt% tungsten particles were fabricated by hot-pressure sintering method, where the optimal ratio of the composite is determined by the shielding effect under the neutron field generated in typical proton therapy environment. The results of Differential Scanning Calorimetry measurements (DSC) and tensile experiment show that the composite has good thermal and mechanical properties. In addition, the high energy-neutron shielding performance of the developed material was evaluated using cyclotron proton accelerator with 100 MeV proton. The simulation shows a 99.99% decrease in fast neutron injection after 44 cm shielding, and the experiment result show a 99.70% decrease. Finally, the shielding effect of replacing part of the shielding material of the proton therapy hall with the developed material was simulated, and the results showed that the total neutron injection decreased to 0.99‰ and the neutron dose reduced to 1.10‰ before the enhanced shielding. In summary, the developed material is expected to serve as a shielding enhancement material in the proton therapy environment.

다영역 모델 방정식의 유한차분계가 갖는 일관성과 정화성 분석 (Analysis of Consistency and Accuracy for the Finite Difference Scheme of a Multi-Region Model Equation)

  • 이덕주
    • 한국토양환경학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.3-12
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    • 2000
  • 다영역 모델은 Preferential 흐름에 대한 해석을 위하여 토양을 여러개의 공극군으로 나누고 각 토양의 수리학적 특성을 이용하여 토양내의 흐름을 표현한 방정식이다. 이 모델을 유한차분법을 이용하여 수치적으로 풀이할 때 해의 정확도와 일관성을 분석하기위해 수정등가편미분방정식(MEPDE)을 구하고, 안정성을 분석하기위해 Von Neumann법을 이용한다. 수정등가편미분방정식을 이용하여 얻은 유한차분계에 대한 평가는 모델방정식에 대하여 일관성이 있는 것으로 나타났고 모델방정식에 대한 유한차분법은 2차의 정확도를 얻었다. 모델방정식의 안정성 해석은 Von Neumann방법을 이용하여 진폭도와 위상지연을 구하고 이를 분석하였다. 유한차분계의 진폭비는 Peclet수의 변화에 관계없이 비분산적이었으며 Peclet수가 1.0일때 가장 큰 값을 나타냈고, 위상지연은 참값에 대한 빈도요소보다 더 느리게 파동함을 나타냈다. 모델방정식의 안정성 해석 결과, 모델의 영역분해는 보다 정확한 결과를 얻기 위해서 Peclet수는 1.0보다 작고 Courant수는 3.0보다 작은 범위 안에서 분해하는 것이 좋은 것으로 분석된다.

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천공필름을 이용한 방울 토마토의 저장 수명 연장에 관한 연구 (Prolongation of Cherry Tomato Shelf-life Using Perforated Film Packaging)

  • 최원석;황권택;김기명
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.139-146
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    • 2009
  • 본 연구에서는 사용이 증가되고 있는 천공포장재 필름을 방울 토마토 저장에 이용하여 방울 토마토의 품질변화를 조사하였으며, 또한 세척 및 꼭지 제거의 최소가공 처리유무가 방울 토마토의 저장성에 미치는 영향 및 최적 천공포장 조건을 살펴보았다. 에틸렌 가스 및 이산화탄소는 천공필름 중 투과성이 가장 낮은 LF05 및 OPP/PE 필름구에서 상대적으로 투과성이 높은 LF10, LF20, LF40에 비해 높은 값을 보였고, 산소 분압의 경우 LF05에서 낮은 분압을 나타내었다. 조직감은 LF05 필름에 저장된 방울토마토에서 경도의 급격한 감소가 일어났으며, 색도의 경우 포장재차이에 의한 일정한 경향 없이 L값과 a값 각각 다소 감소하거나 증가하는 듯 보였으며, b값의 경우 저장기간이 길어질수록 뚜렷이 감소하는 경향을 나타내었다. 당도 및 산도변화를 관찰한 결과 투과성이 낮은 LF05, LF10, LF20필름에 저장된 방울 토마토의 당도는 저장기간이 길수록 감소되고 산도는 일정수준을 유지한 반면에, 투과성이 높은 PET 용기에 보존한 방울 토마토와, LF40필름에 넣어 보존한 것은 당도가 천천히 떨어지거나 비슷한 수준으로 유지되고, 산도는 증가하는 변화를 나타냈다. 천공포장재 별 미생물 균총의 경우, 꼭지를 제거한 경우와 제거하지 않은 경우 차이가 있어 방울 토마토의 주요한 균은 꼭지부분에서 유래되는 것으로 보인다. PET 박스 포장의 경우 표피에 심한 주름과 수축을 보이는 등 저장성이 좋지 않았다. 천공포장재 필름 중 LF 40 은 내부의 공기의 조성을 변화시켜 줄 수 있는 정도의 투과성을 보유하고 있어, 다른 LF 종류 필름에 비해 방울 토마토의 저장성에 긍정적인 결과를 보여주었다.

봄배추의 전처리 및 포장방법이 저온저장 중 선도유지에 미치는 효과 (Effect of Pre-treatment and Packaging Method on Freshness Prolongation of Spring Kimchi Cabbage during Low Temperature Storage)

  • 박세진;김지영;;김병삼
    • 한국포장학회지
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    • 제29권2호
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    • pp.119-128
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    • 2023
  • 봄배추 저장을 위한 최적의 전처리 및 저장 조건을 확립하고자 봄배추의 적입방향과 예건/예냉 처리 및 HDPE / PVC 필름을 이용한 파렛트 단위의 modified MAP 처리하여 봄배추를 저온저장고에 저장하면서 중량감모율, 정선손실율, 수분함량, 경도, 색도, 가용성고형물함량, 관능검사 등을 비교 분석하였다. 대조구와 비교 시 예건/예냉 및 MA 포장재 처리는 중량감모와 정선손실을 억제시켰는데 이는 전처리 및 포장 처리가 신선도 유지와 탈습 억제에 적절한 영향을 미치는 것으로 생각되었다. 관능검사 결과 대조구의 경우 6주까지 판매가능한 marketable 상태를 유지하나 처리구의 경우 9주까지 5점 이상으로 장기저장이 가능한 것으로 나타났다. 배추 저장 시 선도유지 효과와 작업성 및 경제성을 동시에 고려할 경우 품질에서 미세한 차이가 나타났지만, 적입 방식 측면에서는 정방향으로 적입하는 것이 효율적인 것으로 검토되었다.

모의수출조건에서 유황패드와 MAP 복합처리가 '캠벨얼리' 포도의 품질에 미치는 영향 (Effects of combination treatment with sulfur dioxide generating pad and modified atmosphere packaging (MAP) on the quality of 'Campbell Early'grape under simulated export conditions)

  • 최미희;이진수;임병선
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제24권6호
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    • pp.734-745
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    • 2017
  • 장기 해상운송 시 포도과실의 신선도 유지 및 수입국에서의 유통기간 연장을 통한 수출국 다변화 및 수출경쟁력 향상을 위해, 모의수출조건 및 실제 수출 시 유황패드와 MA포장 복합처리에 따른 포도과실의 선도유지 효과를 검토하였다. 캠벨얼리 포도는 경기도 화성지역에서 재배되었으며 2016년 8월 말에 수확하여, 예냉은 $0^{\circ}C$, 선별 및 포장은 $10^{\circ}C$에서 실시하였고 $0^{\circ}C$에 30일간 저장하였다. 시험처리는 관행 수출포장(대조구), 유황패드처리, 유황패드+MA 복합처리의 3가지로 하였다. 모의수출 조건인 $0^{\circ}C$, 30일 저장 시 포도상자 내부의 온도와 상대습도는 처리에 따라 약간의 차이가 있기는 했으나 각각 $0.6-2^{\circ}C$, 94-100% 범위 내에서 안정적으로 유지되었다. 무처리와 유황패드 단독처리의 경우 저장기간이 경과할수록 경도의 감소, 과경의 갈변, brush 길이의 감소, 탈립률의 증가 등에서 유황패드+MA 복합처리와 유의적인 차이를 보였다. 유황패드+MA 복합처리의 경우 MA포장에 의한 선도유지 효과와 더불어 PE필름으로 인해 저장 30일 후에도 포장 내부에 2.9 ppm 정도의 $SO_2$ 농도가 유지되면서 장기 저장 및 운송 시 포도의 품질을 가장 잘 유지시켜 주는 것으로 나타났으며, 이러한 효과는 $15^{\circ}C$, 7일 저장의 모의유통조건에서도 동일하게 나타났다. 또한 수확 후 11일간의 해상운송을 거쳐 미국 현지 소매점에 유통될 때까지 30일이 소요된 대미수출 포도의 경우에도 모의수출 조건에서 수행된 것과 동일한 결과를 보였다. 미국 현지에서 품질 조사 수행 결과, 유황패드+MA 복합처리에서만 4.0 ppm의 $SO_2$가 측정되었으며 신선도 유지를 통한 상품성 보존이나 현지에서의 유통기한 연장 효과도 가장 우수한 것으로 나타났다. 결과적으로 장기 해상운송에 의한 캠벨얼리 포도 수출 시 유황패드+MA 복합처리는 상품성 및 유통기간 연장에 매우 효과적인 방법이라고 판단된다.

사무직 근로자에 대한 운동요법과 이완요법이 스트레스 반응으로 카테콜라민과 심박수에 미치는 영향 (Streets of Relaxation Therapy and Exercise Therapy on Catecholamine and Heart Rate Response for Job Stress of White Color Workers)

  • 김인흥
    • 기본간호학회지
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    • 제6권2호
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    • pp.240-254
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    • 1999
  • The purpose of this study was to investigate the effect of exercise therapy and relaxation therapy on catecholamine and heart rate in people in white color jobs and to determine this information the effectiveness of applied exercise therapy and relaxation therapy as a nursing intervention method for stress patients. The subjects were divided into an exercise therapy group, a relaxation therapy group, and control group and the research design was a nonequivalent control group pretest-post test design(exercise therapy : n= 12, relaxation therapy : n=12, control group, the group without any treatment in exercise on relaxation therapy : n=12), The subjects in the exercise therapy group were given a particular intensity for each kp during 30min, bicycle ergometer which is using an LX PE training system before & after 4weeks of training. The exercise therapy that was used was Astrard load method which tested absolute exercise load of heart rate before & after four weeks, and resting heart rate was tested for exercise and relaxation therapy before, after four weeks, and at eight weeks. The results of each kp & absolute exercise load were calculated with the target rate formula(maximal heart rate-rest heart rate) x exercise intensity(%) + rest heart rate so the subjects could continue 60-70% exercise intensity for exercise therapy over eight weeks. The relaxation therapy subjects were trained using a modified Jacobson's relaxation technique for eight weeks. The exercise and relaxation therapy were trained at the following intensity for eight weeks(3times/week, 30min/day) to see changes in catecholamine & heart rates. After eight weeks, statistical analysis of exercise & relaxation therapy were carried out Two-way ANOVA and multiple range test(SNK : Student Newman Keul) were used. The results are as follows : 1. The change of epinephrine & norepinephrine in the exercise therapy, relaxation therapy, and control group was statistically significant at the .05 level after four weeks & eight weeks. Also, exercise therapy was statistically significant at .05 level over that of the control group after 4weeks. 2. The change of heart rate in relaxation therapy was statistically significant at the .05 level, and was statistically significant at the .05 level over that of the exercise therapy and control group. In conclusion, it is obvious that exercise therapy and relaxation therapy should be one of the most effective stress treatment and desirable nursing interventions methods for job stress in people in white color jobs.

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