The native connective tissue attachment of the periodontium is known to be a complex consisting of gingival fibroblasts, periodontal ligament cells, gingival epithelial cells, cementum, alveolar bone and extensive extracellular matrix (collagen, glycoprotein and proteoglycans). The purpose of this study was to evaluate the effects of natural extracts on DNA, collagen and protein synthesis and inhibition of cytokine production in the gingival and periodontal ligament fibroblasts and gingival epithelial cells. Healthy gingival tissue was obtained from orthodontic treatment patients, and gingival epithelial cells, gingival fibroblasts and periodontal ligament cells were isolated and cultured from the samples. After treated with Ginseng protein, Pluronic F-68, Scutellariae Radix, centella asiatica, PDGF, IGF, DNA synthesis, total protein and collagen synthesis, and cytokine production of gingival epithelial cell, gingival fibroblast and periodontal ligamentcells were measured. MTT method for DNA synthesis, Peterkofsky and Dingerman method for total protein and collagen synthesis, and IL-1 ELISA kit for cytokine production were used. The proliferation of epithelial cells was enhanced in Centella asiatica, Ginseng protein, Pluronic F-68 and Scutellariae Radix. The activities of PDL cells were increased in PDGF, IGF, and Pluronic F-68. Higher collagen synthesis was observed in Scutellariae Radix and total protein synthesis was increased in Scutellariae Radix and PDGF. The inhibitory effects on IL-1, IL-6, $TNF-{\alpha}$ were observed in all exrracts.
Kim, Hyun-Soo;Chung, Hyun-Ju;Kim, Young-Joon;Kim, Ok-Su
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.34
no.2
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pp.367-375
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2004
As the periodontal ligament cells show similar phenotype with osteoblasts, periodontal ligament cells are thought to play an important role in alveolar bone remodeling. According to recent studies, receptor activation of nuclear factor $^{\kappa}B$ ligand (RANKL) and osteoprotegerin (OPG) are expressed in periodontal ligament cells during tooth movement. Also periodontal ligament cells is known to play an important role in the progression of periodontal disease. This study was designed how the expression of RANKL and OPG in periodontal ligament cells was regulated by IL-1 ${\beta}in$ the concentration of $0.01{\sim}10$ ng/ml. The results are as follows; 1. Periodontal ligament cells which stimulated by 1L-1 ${\beta}$ increased soluble RANKL synthesis by dose-dependent pattern in the concentration of $0.01{\sim}10$ ng/ml. 2. 1L-1 ${\beta}$ induced mRANKL expression in dose-dependent manner in the concentration of $0.01{\sim}5$ ng/ml. 3. mOPG expression was not to be influenced by 1L-1 ${\beta}$. These results suggested that rat periodontal ligament cells could regulate osteoclastogenesis by stimulation of production of RANKL.
The hormonally active vitamin D metabolite, 1,25-dihydroxy vitamin $D_3[1.25-(OH)_2D_3]$ is one of the several humoral factors that may regulate osteoblast differentiation. The purpose of this study was to evaluate the effects of $1,25-(OH)_2D_3$ on the PDL cells. Human PDL cells were prepared from the first premolar tooth extracted for the orthodontic treatment and they were incubated in the environment of $37^{\circ}C,\;5\%\;CO_2\;and\;95\%$ humidity. $[{^3}H]$-thymidine incorporation as a measure of proliferation potential and alkaline phosphatase activity were evaluated at 10nM, 100nM $1,25-(OH)_2D_3$. The observed results were as follows. 1. $1,25-(OH)_2D_3$ was significantly enhanced $[{^3}H]$-thymidine incorporation at 100nM, But did not affect by 10nM. 2. $1,25-(OH)_2D_3$ was significantly increased alkaline phosphatase activity at 1 day and 6 days in a dose-dependent manner.
Craniofacial sutures absorb the stress transferred to skull. It was reported the cells of craniofacial sutures respond to exogenetic factors to be involved in growth control mechanism. In this study, we constructed a finite element model composed of cortical bone, cancellous bone, suture, PDL, and teeth by using CT images of a growing patient, simulating maxillary expansion to evaluate the effects of the thickness of sutures and type of maxillary expansion appliance on stress distribution in circummaxillary sutures.
Purpose: Avulsed tooth can be completely recovered, if sound periodontal ligament (PDL) of tooth is maintained. Although a lot of storage solutions have been explored for the better storage of avulsed tooth, there is a shortcoming that the preservation time is much short. On the other hand, there has been studies that (-)-epigallocatechin-3-gallate (EGCG), the most abundant polyphenol in green tea, which is related to the anti inflammatory, antioxygenic, and antibacterial effects, allows the successful preservations of tissues and cells. This study evaluated the effect of EGCG on avulsed-teeth preservation of Beagle dogs for a period of time. Methods: The atraumatically extracted teeth of Beagle dogs were washed and preserved with 0/10/$100\;{\mu}M$ of EGCG at the time of immediate, period 1 (4 days in EGCG-contained media and additional 1 day in EGCG-free media), period 2 (8 days in EGCG-contained media and additional 2 days in EGCG-free media) and period 3 (12 days in EGCG-contained media and additional 2 days in EGCG-free media). Then, the cell viabilities of preserved teeth was calculated by dividing optical density (OD) of 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay with OD of eosin assay to eliminate the measurement errors caused by the different tissue volumes. Results: From the results, the immediately analyzed group presented the highest cell viability, and the rate of living cells on teeth surface decreased dependent on the preservation period. However, the $100\;{\mu}M$ of EGCG-treated group showed statistically significant positive cell activity than EGCG-free groups throughout preservation periods. Conclusions: Our findings showed that $100\;{\mu}M$ EGCG could maintain PDL cell viability of extracted tooth. These results suggest that although EGCG could not be a perfect additive for tooth preservation, it is able to postpone the period of tooth storage. However, further in-depth studies are required for more plausible use of EGCG.
This experiment was designed to study possible roles of $interleukin-1\beta$, interleukin-6 and tumor necrosis $factor-\alpha$ in bone remodeling by measuring their effects on $PGE_2,\; LTB_4$ and collagenase production when they were administered to human periodontal ligament fibroblasts. Human periodontal ligament fibroblasts were collected from first premolars extracted for orthodontic treatment. They were incubated in the environment of $37^{\circ}C,\;5\%\;Co^2,\;and\;100\%$ humidity. They were treated with $0.25\%$ trypsin-EDTA solution and centrifuged. PDL cells in the fifth to seventh passage were used for the experiment. Cells were seeded onto the culture dishes and when they were successfully attached, human recombinant $interleukin-1\beta$, interleukin-6, and tumor necrosis $factor-\alpha$ were administered, alone or in combination. They were incubated for 4, 8 and 24 hours and the levels of $PGE_2,\;LTB_4$ and collagenase released into the culture media were assessed by enzymeimmunoassay and collagenase activity assay. The conclusions are as follows: 1. $IL-1\beta\;and\;TNF-\alpha$ were very active in stimulating the production of $PGE_2$ and collagenase by human periodontal ligament fibroblasts, while IL-6 increased $LTB_4$ production. 2. $IL-1\beta$ significantly increased $PGE_2$, but $LTB_4$ Production was not increased. $IL-1\beta$ is thought to act mainly via the cyclooxygenase pathway of arachidonic acid metabolism. 3. IL-6 tended to inhibit $IL-1\beta$ in the production of $PGE_2$ and collagense whereas IL-6 and $TNF-\alpha$ showed auditive effect in the level of $PGE_2$. The above cytokines increased the release of at least one of $PGE_2,\;LTB_4$ and collagenase. It suggests that cytokines are involved in bone remodeling process by stimulating PDL fibroblasts to produce various bone-resorptive agents. The roles of cytokines in bone remodeling as a whole would need further study.
Purpose: The aim of this study was to investigate the effects of EMD on demineralized root surface using human periodontal ligament cells and compare the effects of root conditioning materials(tetracycline(TCN), EDTA). Material and Methods: Dentin slices were prepared from the extracted teeth and demineralized with TCN and EDTA. Demineralized dentin slices were incubated at culture plate with 25, 50 and $100{\mu}g/ml$ concentration of EMD. Cell attachment, alkaline phosphatase activity test, protein synthesis assay and scanning electronic microscopic examination were done. Results: Cells were attached significantly higher in EMD treated group at 7 and 14 days. Cell numbers were significantly higher in EMD treated group. Alkaline phosphatase activity was significantly higher in EMD treated group at 7 and 14 days. Protein synthesis was significantly higher in EMD treated group at 7 and 14 days. Conclusion: Enamel matrix derivatives enhance the biologic activities of human periodontal ligament cells on demineralized root surface and its effects are dependent on the concentration of EMD.
The most important object of periodontal treatment is the perfect regeneration of destructed periodontal tissue. The healing of periodontal lesion is affected by several cells & factors, which result in formation of long juntional epithelium, root resorption, bony ankylosis or connective tissue attachment. And ideal healing is enhanced by epithilial exclusion or periodontal ligament cell activation. In this investigation, I studied the effect of Zizyphus Fructus extract which enhances biologic activity& collagen synthesis, on the chemotaxis & cell nature. The cells were obtained from interdental area & middle third area of the freshly extracted teeth for the orthodontic purpose. And they were fully incubated in${\alpha}-MEM$ solution containing $100{\mu]g/ml$ penicillin & $100{\mu]g/ml$ streptomycin followed by 6 generation incubation. The test cells were collected by trypsin-EDTA & centrifuge in the fully incubated cells, counted by Hernacyotmeter, incbated $5{\times}10^5/ml$ cells for 24 hours, re-incubated 24 hours in media containing natural extract and photographed. The cells were incubated for 4 hours in 48 well microchemotaxis chamber bisecting upper & lower chamber by 8ug/m pore polycarbonate membrane coating 5mg/ml gelatin solution. The migrated cells in microscope were counted, which meaned cell chemotaxis activity. The study had shown that the morphology of cell was spindle-shaped as the control group, and the subextract test groups were not significantly different. In gingival fibroblasts, the chemotaxis effect of PDGF was statistically significant compared to control group. The Zizyphus Fructus extract was more or less enhanced chemotaxis effect and in $1{\mu}g/ml$ concentration the chemotaxis effect was slightly elevated compared with $10{\mu}g/ml$ concentration. But, among the subextracts, it was not significantly defferent. In PDL cells, the chemotaxis effect of PDGF in statistically significant, and the zizyphus Fructus extract had shown the enhanced effect. The effect was slightly higher in $1{\mu}g/ml$ concentration than 10g/ml concentration,and no significance among the subextracts.
Ku, Seung-Jun;Chang, Young-Il;Chae, Chang-Hoon;Kim, Seong-Gon;Park, Young-Wook;Jung, Youn-Kwan;Choi, Je-Yong
BMB Reports
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v.42
no.7
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pp.427-432
/
2009
Orthodontic tooth movement results from the combinational process of both bone resorption and formation in the compressive and tension sides, respectively. However, the genes responsible for new bone formation in tension sides have not been determined. In this study, we used DNA microarray and real-time RT-PCR to identify genes in human periodontal ligament (PDL) cells that undergo significant changes in expression in response to static tensional forces (2 or 12 hours). The genes found were alkaline phospatase (ALP), matrix metalloproteinases (MMPs), vascular endothelial growth factor (VEGF), and several collagen genes. Furthermore, an ELISA evaluating the expression of VEGF, type IV collagen and MMP-2 found levels significantly increased after 24 and 72 hours (P < 0.05). ALP activity was also increased after 24 hours (P < 0.05). Collectively, we found the genes up-regulated in our study by the static tensional force are related to osteogenic processes such as matrix synthesis and angiogenesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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