The presence of sialoglycoproteins (SGPs) in the membranes from goat (Capra aegagrus hircus), buffalo (Bubalus bubalis bubalis) and pig (Sus scrofa domestica) erythrocytes was investigated by partial purification with a chloroform-methanol extraction method followed by Sodium dodecyl sulphate - Polyacrylamide gel electrophoresis in comparison to human (Homo sapiens) erythrocytes. The results show that mammalian erythrocytes possess clear differences in the SGPs numbers and molecular weights although all animals studied in this experiment are from the same class i.e. mammalia. The SGPs number in human, goat, buffalo and pig are four (PAS-1 to PAS-4), ten (PAS-GI to PAS-GX), seven (PAS-BI to PAS-BVII) and four (PAS-PI to PAS-IV) respectively as indicated by staining the polyacrylamide gel with sialoglycoprotein-specific Periodic acid-Schiff's (PAS) stain. The new SGPs could be observed only after the partial purification of membrane fractions named as PAS-HI with molecular weight (Mr) 190 kDa and PAS-HII 150 kDa in human, PAS-BIA in buffalo and PAS-PIA and PAS-PIVA in pig. The gels were also stained with Coomassie brilliant blue (CBB) and Silver stain to check the contamination of other membrane proteins in the purified fractions. The quantitative distribution of SGPs was also determined by densitometry. Present study indicates that there are some basic differences in mammalian erythrocyte membrane SGPs, especially with respect to their number and molecular weights indicating major structural variations.
각종 균주중 Aspergillus spp.와 Peninillium spp.로 인공약미를 제조, 균주의 분포에 의한 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. Aspergillus spp.와 Peninillium spp.는 모두 외층에서 많은 균주를 발견 할 수 있었다. 2.염색방법으로서는 PAS염색보다는 GRAM염색방법이 균주를 감별하는데 용이하여 PAS염색방법보다 양호하였다. 3.균주를 발견할 수 없는 점등을 생각할 때 충분한 양정은 최소한 균주의 오염만은 피할 수 있을 것으로 사료된다.
A 7-year-old, female snow goose (Anser caerulescens hyperboreus) with history of decreased activity for 2 month died in Daejeon Zoo Land in September 2006. At necropsy, granulomatous pneumonia and hepatomegaly with multiple cysts were observed. Small masses were found in the spleen. Microscopically, fibrinous pneumonia distributed in most of the lung lobe with pulmonary edema and congestion. Especially, granulomatous inflammation with numerous multinucleated giant cells was observed around the dilated bronchi. To confirm the diagnosis, acid-fast (Ziehl-Neelsen method) and periodic acid-Schiff (PAS) staining was performed. Acid-fast staining showed red bacterial colony indicating tuberculosis. PAS staining was also positive enough to diagnose aspergillus spp. co-infection that was an opportunistic fungi occurring in immuno-compromised animals. Based on the above results, we confirmed that the case submitted was diagnosed as avian tuberculosis.
In an effort to obtain basic data of carbohydrate metabolism during spermiogenesis of the sexually-matured Jindo dog, the glycogen distribution in the testis was investigated by light and transmission electron microscopy. Periodic acid thiocarbohydrazide silver proteinate physical development(PA-TCH-SP-PD) staining method provided better results in the detection of glycogen granules from Sertoli cells and germ cells than the periodic acid schiff(PAS) staining method did. Pre-treatment of the tissue sections with ${\alpha}$-amylase elicited a significant decrease in PA-TCH-SP-PD stained granules, which suggested that the stained granules were of glycogen origin. High concentration of the glycogen granules were observed in the Sertoli cells, especially in its column, sheet-like processes, club-like processes, and tubular processes. The glycogen granules were unevenly distributed in some Sertoli cell columns. These results strongly indicated that the Sertoli cells of Jindo dogs showed vigorous activity of carbohydrate metabolism.
Min-A Je;Haneul Lee;Heechul Park;Dong Hyeok Kim;Yeongdon Ju;Jaewon Lim;Sunghyun Kim;Jungho Kim
대한의생명과학회지
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제29권1호
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pp.48-52
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2023
Formaldehyde use is associated with serious health risks, which can affect medical personnel and technicians. Therefore, we investigated the efficacy of an alternative fixative, with respect to two types of formalin fixatives, by hematoxylin and eosin (H&E) staining, periodic acid Schiff (PAS) staining, immunohistochemical (IHC) staining, and RNA extraction. For H&E staining, the circular nucleus was stained dark blue by the basic dye hematoxylin and the cytoplasm was stained red by the acid dye eosin in all three fixative samples. No difference was found in the Duksan General Science (DGS), Sigma-Aldrich, and Core-Fix fixative samples (Corebiotech) used to fix kidney tissue, after PAS staining. IHC staining showed that CD4 was significantly increased in the lippolysaccharide (LPS)-treated group compared to the control group (vehicle), confirming the changes in specific molecules. The quantity and quality of RNA from tissues fixed in the three types of fixatives were evaluated. The average concentration of RNA was 106 ng/µL and average purity at A 260/280 ratio was 1.7~2.0, regardless of fixative used. For quality of protein, glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) protein was confirmed by Western blotting. In conclusion, Core-Fix can be used as a fixative for pathological tissues, in histological and molecular diagnoses.
After single fraction of 2, 5, 10 Gy irradiation on submandibular gland of 40 male rats, weighing 150gm, respectively, these animal were sacrificed two hours after 0.1㎎/g bromodeoxyuridine (Sigma) peritoneal injection in 1, 3, 7, 15 hours, 1, 3, 7 days after irradiation. And excised submandibular gland were fixed in Carnoy's and Bouin's solution for 2 hours. Paraffin sections were stained with H&E, and PAS for the observation of the change of salivary gland tissue, and with Feulgen for the study of the DNA distribution, and immunohistochemically stained with anti-bromodeoxyuridine (Sanbyo Co.) for detection of DNA synthetic cells in order to study the distribution of DNA synthetic cells of salivary gland tissue and endothelium after irradiation in 5 different sites of 6 slides on X 200 high power field. The results were as followings. 1. In PAS staining 3 days after 5Gy irradiation, decreased mucine secretion of serous cells were found, and 7 days after l0Gy irradiation, decreased mucine secretion of mucous cells were found. 2. In histopathologic features, degeneration of serous cells were found in 3 days after 2 Gy irradiation and there was little change in mucous cells and excretory duct cells. 3. In Feugen staining, 3 days after 2 Gy, 5 Gy irradiation, more high percentage of DNA synthetic cells were found in intercalated duct cells, striated duct cells and excretory duct cells than in BrdU staining. 4. In immunohistochemical features, DNA synethsis of serous cells and granular convoluted tubular cells abruptly decreased in early period after irradiation and showed no recovery in 7 days after irradiation but there was an increase in DNA synthesis of intercalated duct cells, striated duct cells and excretory duct cells, which have less S-phase cells comparatively, in 7 days after 2 Gy, 5 Gy irradiation. 5. In immunohistochemical features, the DNA synthesis of endothelial cells was continuously decreased after irradiation but showed slight increase in 7 days after 2 Gy and S Gy irradiation.
Lee, Jong Hoon;Lee, Kuk Han;Kim, Min Ho;Kim, Jun Pyo;Lee, Seung Jae;Yoon, Jinah
Archives of Plastic Surgery
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제39권6호
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pp.593-599
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2012
Background This study aimed to investigate the possibility of isolating mesenchymal stem cells (MSCs) from human thigh adipose tissue and the ability of human thigh adipose stem cells (HTASCs) to differentiate into hepatocytes. Methods The adipose-derived stem cells (ADSCs) were isolated from thigh adipose tissue. Growth factors, cytokines, and hormones were added to the collagen coated dishes to induce the undifferentiated HTASCs to differentiate into hepatocyte-like cells. To confirm the experimental results, the expression of hepatocyte-specific markers on undifferentiated and differentiated HTASCs was analyzed using reverse transcription polymerase chain reaction and immunocytochemical staining. Differentiation efficiency was evaluated using functional tests such as periodic acid schiff (PAS) staining and detection of the albumin secretion level using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results The majority of the undifferentiated HTASCs were changed into a more polygonal shape showing tight interactions between the cells. The differentiated HTASCs up-regulated mRNA of hepatocyte markers. Immunocytochemical analysis showed that they were intensely stained with anti-albumin antibody compared with undifferentiated HTASCs. PAS staining showed that HTASCs submitted to the hepatocyte differentiation protocol were able to more specifically store glycogen than undifferentiated HTASCs, displaying a purple color in the cytoplasm of the differentiated HTASCs. ELISA analyses showed that differentiated HTASCs could secrete albumin, which is one of the hepatocyte markers. Conclusions MSCs were islolated from human thigh adipose tissue differentiate to heapatocytes. The source of ADSCs is not only abundant abdominal adipose tissue, but also thigh adipose tissue for cell therapy in liver regeneration and tissue regeneration.
The purpose of the study was to investigate the effects of the single and fractionated irradiation on the microvascular structure of the submandibular gland in rats. For this study, 90 Sprague-Dawley strain rats were irradiated to their neck region with equal split doses of 9Gy for a 4 hours interval and 15Gy single dose by 6MV X-irradiation and sacrificed on the 1st, 3rd, 7th, 14th and 27th day after irradiation. The author observed histological changes at Hematoxylin and Eosin staining and PAS staining under a light microscope, and also observed distribution and structural changes of the microvasculature in rat submandibular gland using a scanning electron microscope by forming vascular resin casting. The results were as follows: 1. In the light microscopic examination, the microvasculature was slightly dilated and decreased in number on the 1st day after irradiation, and increase in number of microvasculature was observed on the 3rd day after irradiation. And then distribution of microvasculature was markedly increased on the 7th day after iradiation, but decreased on th 14th day after irradiation again. Such changes were greater in the single irradiated group than in the fractionated irradiated group. 2. The reaction to PAS staining on glandular cell was decreased on the 1st and the 3rd day after irradiation, and recovered on the 7th day after irradiation. The reaction was decreased on the 14th day after irradiation again, and recovered on the 28th day after irradiation. Changes were more apparent in the single irradiated group. 3. In the scanning electron microscopic examination, early changes of microvasculature were decreased capillary density, dilation of conduits and meandering. Increased capillary dentsity or anastomosis due to vascular reproduction and smooth curved running were observed on the 7th and 14th day after irradiation. Decreased capillary and smooth running tendency were observed on the 28th day after irradiation again. Such changes were greater in the single irradiated group than in the fractionated irradiated group.
An experimental study was performed to study the tissue reactions to tissue conditioners in rabbits. Thirty rabbits were divided into three groups, 10, Hydro-cast group, 10, Coe-comfort group, and 10, heat-cured resin group. Tissue conditioners and heat-cured resin were embedded in the oral mucosa of rabbits. The tissue specimens were removed on 3rd, 7th, 14h, 21st and 28th day after embedding and examined under microscope after staining them with H-E stain, Van Gieson's stain, Masson's trichrome stain and PAS reaction. The results were as follows :
1. Tissue reactions to tissue conditioners were somewhat different from each other in the early stage, but, with the increase of the embedding period, the fibrous capsule was thickened in both. These tissue reactions were similar to those to heat-cured resin.
2. Newly formd fibrous components were stained deep-red with Van Gieson's stain and dark-green with Masson's trichrome stain. But their stainability was decreased as collagenous fibers became matured.
3. Newly formed fibrous components showed intense PAS reactivity, but PAS reactivity was reduced as the connective tissue capsule became completed.
The healing response may very with the tissue, the site and the degree of wound. the author observed histochemically the epithelial regeneration in the har palate wound of healthy male albino rats, varying in age from 120 to 150 days, and weighing about 100 gm. The deep wounds were made antero-posterior linealy by surgical knife to the depth of bone level. They were sacrified by ether anesthesia on 1, 2, 4, 7, 10 and 14 days after wounding. the staining methods used were Mcmanus' PAS reaction, Mowry's modification of the Hale reaction employing Muller's colloidal iron reagent, alloxan-Schiff reaction and hematoxylin-eosin stain.
The results were as follows :
1. In the wound healing of hard palate, the epithelium had marked PAS positive reaction in the granular and the prickle cell layers on the from 2nd to 7th day.
2. Alloxan-Schiff reactions of regenerated epithelium were slightly increased on 7th day.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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