이 연구는 P.E.B. 골조 시스템 공장 현장에서 가장 많이 사용하고 있는 훅 볼트 형상의 골조 가새의 사용현황을 조사하여 그 문제점을 파악하기 위하여, 다양한 형상의 가새 (예를 들면, 로드 바, 로드 슈, 앵글)에 대한 구조성능실험을 실시한다. 그 실험결과의 분석, 비교를 통해서, 훅 볼트 형 가새의 기술적 한계를 평가하고, P.E.B. 골조에 적합한 인장가새의 기술을 제안한다.
With the improvement of the quality of construction materials and the development of construction technologies, large-scale long-span steel frame buildings have been built recently. The P.E.B system using tapered members is being employed as an economically-efficient long-span structure owing to its advantage of being able to distribute stress appropriately depending on the size of sectional areas of members. However, in December 2005 and in February 2014, P.E.B buildings collapsed due to sudden loads such as snow loads and wind gusts. In this study, the design and construction of the P.E.B system in Korea were analyzed and its structural safety was evaluated using the finite element analysis program to suggest how to improve the P.E.B system in order to promote the efficient and rational application of the system.
Thermotoga maritima cellulose B 유전자의 The open reading frame (ORF)은 825 bp이고, cellulase B는 분자량이 약 31,732 kDa인 274개의 아미노산으로 구성되어 있다 이 중 N-말단의 17개 아미노산은 signal peptide로 추정된다. Signal peptide를 제외한 ORF를 pRSET 대장균 발현벡터에 삽입하여 pRBTmCelB를 제조하였다. 6-His tag을 포함하는 TmCelB 융합단백질의 cellulose 분해활성과 생화학적 특성을 분석하기 위해 pRBTmCelB를 대장균 BL21에서 과다발현하였고 순수분리하였다. TmCelB 융합단백질은 cellulose 분해활성을 나타내었고 이 있는 것으로 분석되었다. TmCelB 융합단백질은 약 95 ℃ 부근에서 가장 높은 효소 활성을 나타내었고, 100 ℃에서 최대 활성을 80% 이상 유지하는 것을 확인하였다. 또한 TmCelB 융합단백질은 약 pH 4.5 부근에서 최대 활성을 나타내었고, pH 4.0-6.0 범위에서 최대 활성을 60% 이상 유지하였다. TmCelB 융합단백질은 100 ℃에서 180분 후에도 효소활성을 80% 이상 유지하였다.
A carboxymethyl cellulase gene, cel5B, was cloned, sequenced, and expressed in Escherichia coli. pRCS20 in E. coli was identified from metagenomic cosmid library of cow rumen for cellulase activity on a carboxymethyl cellulose agar plates. Cosmid clone (RCS20) was partially digested with Sau3AI, ligated into BamHI site of pBluescript II SK+ vector, and transformed into E. coli $DH5{\alpha}$. The insert DNA of 1.3 kb was obtained, designated cel5B, which has the activity of hydrolyzation of CMC. The cel5B gene had an open reading frame (ORF) of 1,059 bp encoding 352 amino acids with a signal peptide of 48 amino acids and the conserved region, VIYEIYNEPL, belongs to the glycosyl hydrolase family 5. The molecular mass of Cel5B protein expressed from E. coli $DH5{\alpha}$ exhibited to be about 34 kDa by CMC-SDS-PAGE. The optimal pH was 8.0, and the optimal temperature was about $50^{\circ}C$ for its enzymatic activity.
WLAN 기술의 진보로 댁내 망에서 비디오 스트리밍 서비스 같은 멀티미디어 서비스의 사용이 증가하고 있다. 하지만 비디오 스트리밍 서비스의 QoS를 제공하기 위해서는 전송 지연 및 프레임 손실률을 감소시키는 기술 연구가 필요하다. 그러므로 본 논문에서는 이러한 문제를 해결하기 위하여 IEEE 802.11e EDCA에서 스트리밍 서비스의 QoS 보장을 위한 동적버퍼 관리기술을 제안한다. 제안하는 동적버퍼관리기술은 프레임의 중요도와 버퍼에 새롭게 도착한 프레임의 가상전송지연을 고려하여 버퍼 내 HoL(Head of Line)의 프레임을 제거한다. 시뮬레이션 결과, 제안하는 버퍼관리기술은 중요도가 높은 I, P 프레임의 손실률을 감소시키고 전송지연 시간을 안정화시키므로 비디오 스트리밍 서비스의 QoS를 보장할 수 있음을 살펴볼 수 있었다.
A tetracycline resistant Vibrio parahaemolyticus, capable of growing on TCBS medium containing tetracycline, was isolated from cultivated fishes. A gene responsible for the tetracycline resistance was cloned from chromosomal DNA of the V. parahaemolyticus strain using Escherichia coli KAM3, which lacks major multi-drug efflux pumps (${\Delta}acrB$) as host cells. The nucleotide sequence and homology analysis revealed an open reading frame (ORF) for tetracycline resistance protein (TetB). In order to characterize the antibiotic resistance of TetB originated from the V. parahaemolyticus strain, the gene was sub cloned into plasmid pSTV28. The resulting plasmid was designated as pSTVTetB and transformated into E. coli KAM3. E. coli KAM3 cells harboring the recombinant plasmid pSTVTetB are able to grow on plates containing tetracycline and oxytetracycline but not doxycycline, indicating that the tetB gene confers the tetracycline- and oxytetracycline-resistance to the host cell.
In order to secrete the Bacillus subtilis cytidine deaminase (CDase, cytidine/2'-deoxycytidine deaminase) encoded by the B. subtilis cdd gene in E. coli by the aid of signal sequences, the cdd gene was fused in-frame to either amyE or penP signal sequences and the gene expression and CDase localization were examined. For the penP signal sequence::cdd fusion, the cdd gene with 9 amino acids truncated from the 5'-terminus was fused in-frame to the signal sequence, then the $cdd^{+}$ colonies were not occurred from the minimal plate by cdd complementation. The result suggests that 9 amino acids on the $NH_2-terminal$ of CDase have an essential function in the enzyme activity. The hybrid protein obtained by fused gene amyE signal sequence::cdd structural gene gave $cdd^{+}$ phenotype and about half of the total CDase activity was found to be secreted in the periplasm of E. coli transformant JF611/pSO202. The periplasmic CDase activity of JF611 harboring pSO52 containing the intact cdd gene was considerablely lower than that of the cells harboring pSO202 carrying the hybrid cdd gene. This suggests that the CDase was secreted to the periplasm through the cytoplasmic membrane by the aid of the amyE signal sequence in the E. coli transformant.
Papain family중 하나인 cysteine protease는 근골격계 질환 치료를 위한target molecule로 인식 되어왔으며 Cathepsin B 는 단백질 분해의 초기과정에 관여하는 cysteine proteases 중 하나이다. 본 연구는 넙치의 cathepsin B 유전자의 발현 양상과 넙치 cathepsin B(PoCtB)의 클로닝, 발현 및 효소특성을 분석하였다. cDNA Library Screening을 이용하여 넙치의 cDNA를 클로닝하였다. 넙치의 동정된 cathepsin B 유전자는 993bp의 open reading frame과 330개의 아미노산으로 이루어져있다. Cathepsin B의 propeptide region 내에 GNFD motif와 occluding loop 가 존재함으로써 이것이 명백하게 cathepsin B group이라는 것을 보여주며, 계통 유전학적 분석 결과 다른 종의 cathepsin B에 비해 초창기에 분화되어 나온 것으로 사료된다. mature enzyme인 maPoCtB은 fusion protein인 glutathione S-transferase를 포함하는 pGEX-4T-1 vector에 삽입하여 E.coli 균주인 $DH5{\alpha}$ 내에 발현시켰다. 재조합 단백질인 PoCtB을 과발현 시킨 결과 53kDa의 분자량을 가진다. 넙치 cathepsin B 활성은 Z-Arg-Arg-AMC와 같은 fluorogenic 펩타이드 기질을 이용하여 측정되었고 적정 pH는 pH.7.5 이다.
본 연구대상인 화력발전소 석탄저장고는 우리나라 발전 산업 현장 중에서 원자력, 화력 등을 포함한 건축물 중 그 규모면에서 가장 크다. 이 옥내형 석탄저장고는 축구장 6개 크기의 평면에 높이가 73m인 mass volume이다. 또한 구조 및 기능적 요소가 미적요소보다 우선이므로 구조적 안전성과 기능적 석탄저장을 위해 중앙 옹벽과 부벽 합산이 $75,000m^3$에 달하는 콘크리트와 11,744ton의 PEB시스템을 이용한 철골을 사용하여 장대한 공간을 창출할 수 있게 설계되었다. 따라서 옥내형 석탄저장고에 적용된 옹벽과 철골구조에 대한 설계조건과 PEB 시스템의 특징 및 시공에 따른 주요 공정 특이사항을 조사하고, 아울러 이들 주요 공정상에 요구되는 시험 사항에 대해서 조사함으로써 이와 유사하게 지어질 옥내형 석탄저장고에 대한 설계조건과 기준 등을 제시하는 것이 본 연구의 목적이다.
A DNA fragment containing the gene for cell wall hydrolase of alkalophilic Bacillus subtilis BL-29 was cloned into E. coli JM109 using pUC18 as a vector. A recombinant plasmid, designated pCWL45B, was contained in the fragment originating from the alkalophilic B. subtilis BL-29 chromosomal DNA by Southern hybridization analysis. The nucleotide sequence of a 1.6-kb HindIII fragment containing a cell wall hydrolase-encoding gene was determined. The nucleotide sequence revealed an open reading frame (ORF) of 900 bp with a concensus ribosome-binding site located 6 nucleotide upstream from the ATG start codon. The primary amino acid sequence deduced from the nucleotide sequence revealed a putative protein of 299 amino acid residues with an M.W. of 33, 206. Based on comparison of the amino acid sequence of the ORF with amino acid sequences in the GenBank data, it showed significant homology to the sequence of cell wall amidase of the PBSX bacteriophage of B. subtilis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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