Pleurotus ostreatus, the oyster mushroom, is one of the most widely cultivated and important edible mushrooms in the world. In order to study the developmental process of P. ostreatus and its regulatory mechanism, a new culturing method needs to be established for inducing the fruiting body and sporulation in the laboratory. In this study, we have examined whether the fruiting body of P. ostreatus can be formed on the plastic petri dish which are commonly used for cell culture in the laboratory. The strain was cultured on $60{\times}15mm$ plastic petri dish with potato dextrose agar media at $28^{\circ}C$ for mycelial growth and then at $18^{\circ}C$ for the formation of primordia and fruiting bodies within plant growth chamber. The development of primordia into fruiting bodies was achieved on cultured dishes under air ventilation. At the primordia stage, the normal formation of fruiting body was blocked by sealing the plastic dish with parafilm. The periods requiring for the formation of primordia and fruiting bodies were examined on the dish culture. About 96% and 76% of cultured samples formed primordia and fruiting bodies under the optimal conditions during ten weeks of culture, respectively. These culturing periods, however, were changed by the mechanical injury treatment to mycelia. As other factors affecting the fruiting body formation, the effects of light and cold shock have been tested. No fruiting formation was observed on the cultured dishes under the dark. The cold shock treatment by storing cultured dishes for one day at $4^{\circ}C$ did not have any significant effects in the fruiting body formation. Spores of fruiting bodies acquired from the petri dishes could be germinated on culture media at $28^{\circ}C$. These results suggest that the fruiting bodies of P. ostreatus can be formed on the experimental petri dish and this dish-culturing method is useful for understanding of the developmental process of P. ostreatus in the laboratory. Furthermore, the dish-culturing method is able to shorten the life cycle of P. ostreatus without requiring large area and expensive device.
Effects of various kinds of sawdusts, supplements and culture conditions on activities of several enzymes such as protease, phenoloxidase and cellulase produced from mycelium of P. ostreatus grown on sawdust medium were studied and the results are as follows; Higher specific activity of these enzymes was observed when oak tree sawdust and poplar tree sawdust were supplemented with rice bran or wheat bran at rate of 30%, 20% and 10% in total volume respectively. Higher total activities of protease, phenoloxidase and cellulase were observed at 70% of the moisture contents of culture media, while lower activity of these enzymes was observed with 40% moisture contents of sawdust culture medium. The pH 4 and 9 of the sawdust media appeared to be optimum pH for the. production of protease while pH 5 and 7 were optimal for the production of phenoloxidase. The pH 6 of the sawdust medium was optimal for the production of cellulase. The optimum incubating temperature for the production of protease, phenoloxidase and cellulase was $25^{\circ}C$. Higher total activities of protease and phenoloxidase were observed when culture medium was added with wood vinegar at the control, and 0.5% for cellulase.
This study was carried out to identify the phylogenetic relationship among several isolates of Pleurotus species by comparing ITS II region of ribosomal DNA(rDNA) repeat unit. Two primers from ribosomal DNA sequences were chosen to amplify the specific internal transcribed spacer (ITS) II region of Pleurotus spp. The exact ITS II region with an unique band from six species of Pleurotus genus could be amplified using the two primers taken from at the 3'-end of 5.8S rDNA and 5'-end of 28S rDNA. Six representative species of the Pleurotus genus were easily characterized according to the length differences of ITS II region. Furthermore, within P. ostreatus species, different sizes of ITS II region could be observed in the isolates of ASI 2025 and ASI 2095 although they were classified as P. ostreatus by the conventional observation. The nucleotide sequence analyses of PCR-amplified ITS II region indicated that the isolates ASI 2025 and ASI 2095 were different from other Pleurotus spp. When the nucleotide sequences of six Pleurotus species were compared, three typical ITS II regions were highly variable especially at both ends of this region. The phylogenetic tree obtained by the Neighbor program of Felsenstein PHYLIP package with all the nucleotide sequence of Pleurotus spp. indicated that P. ostreatus, P. florida, P. sajor-caju and P. eryngii were closely related to one phylogenetic branch and P. cystidious was related to other branch with P. cornucopiae. The isolates ASI 2025 and 2038, however, were not closely related to any other Pleurotus spp. and formed their own individual branches.
Mushroom cultivation has gained increased attention in recent years. Currently, only four types of spawn, including sawdust spawn, grain spawn, liquid spawn, and stick spawn, are commonly available for mushroom cultivation. This limited spawn diversity has led to difficulty in selecting suitable inoculum materials in some cultivation. In this study, three small blocks of lignocellulosic agro-wastes and one block of a synthetic matrix were prepared as support for growing Pleurotus ostreatus in liquid medium. Mycelium-adsorbed blocks were then evaluated for their potential as block spawn for fructification. Our results indicated that the edible fungus was adsorbed and abundantly grew internally and externally on loofah sponge and synthetic polyurethane foam (PUF) supports and also has the ability to attach and grow on the surface of sugarcane bagasse and corncob supports. The mycelia of P. ostreatus adhered on corncob exhibited the highest metabolic activity, while those on the PUF showed the least activity. Mycelial extension rates of block spawns made of agro-waste materials were comparable to that of sawdust spawn, but the block spawn of PUF showed a significantly lower rate. No significant differences in cropping time and yield were observed among cultivations between experimental block spawns and sawdust spawns. Moreover, the corncob block spawn maintained its fruiting potential during an examined period of 6-month storage. The developed block spawn could be practically applied in mushroom cultivation.
Extracellular laccase secreted from Pleurotus ostreatus was activated by $Cu^{2+}$ and $Cu^{+}$ . The enzyme was strongly inactivated by 8-hydroxyquinoline, potassium cyanide, sodium azide, sodium bisulfite and 2-mercaptoethanol. The two ionogenic groups, which have pKa values of 5.60-5.70 and 6.70-6.85 respectively, were found to relate with the active site of this enzyme. The oxidation reactions were brought about by initial single electron transfer process on the active site. The enzyme was found to be a metalloprotein which had about 3.9 cupric ions per molecule of protein as a prosthetic group. The enzyme showed a strong peak at 605 nm and a weak shoulder at 330 nm in UV-Visible absorption spectrum. Both signals disappeated upon treatment of the enzyme with 4 electron equivalent ascorbate. These results indicate that type I Cu peak and type III Cu shoulder are present in laccase.
Some factors affecting mycelial growth of Pleurotus sajor-caju and P. ostreatus. were investigated. The optimal temperature and pH of the medium for mycelial growth of both the species were $25^{\circ}C$ to $30^{\circ}C$, and 5 to 6, respectively. The effect of carbon and nitrogen sources on mycelial growth of the species was studied using modified Waksman's special medium as the basal medium. Generally, the disaccharides and polysaccharides showed good effect for mycelial growth of P. sajor-caju, and the polysaccharides were superior to the other classes of carbon sources for mycelial growth of P. ostreatus. Generally the organic nitrogen compounds showed good mycelial growth of both the species. The mycelial growth of the species were favored by the ammonium nitrogen more than by the nitrate nitrogen source. Asparagine was superior to the other kinds of amino acid. Six percentage of glucose and 0.6% ammonium tartarate was optimum for mycelial growth of P. sajor-caju whereas the optimum concentration for the P. ostreatut was 4% glucose and 0.4% ammonium tatarate.
Sodium hypochlorite alkaline was tested against Pseudomonas tolaasii causing bacterial blotch on cultivated oyster mushroom (Pleurotus ostreatus). The minimum inhibitory concentration of sodium hypochlorite against P. tolaasii contained active chlorine (AC) at 1.4 mg/l on plate assay. The highest cultivation yield was obtained from the treatment of AC 5.7 mg/l. Treatment of sodium hypochlorite at the rate of higher than AC 11.4 mg/l resulted in reduced yields at the harvest. However, the population of total bacteria on the bed surface treated with AC 5.7 mg/l of sodium hypochlorite was maintained to some extent. Inhibitory concentration against total bacteria on the bed surface was over AC 22.8 mg/l. Mushroom mycelium was damaged and its growth strongly inhibited at the concentration of AC 200 mg/l. Mushroom caps showed yellowish symptom by chemical injury by treatments of AC 74.1 mg/l or higher. Sporocarps infected by P. tolaasii were irrevocable at any concentration of sodium hypochlorite. Routine watering with AC 5.7 mg/l from mushroom initiation to the end of picking resulted in reduced bacterial blotch incidence of 40% and 86% at two mushroom farms. The treatment resulted in higher quality mushroom production compared to that conventionally watered with tap water alone.
The ginseng residue, a by-product of ginseng tea manufacture, was used as growth promoting substance in the submerged cultivation of Basidiomycetes for its effective utilization. Ginseng residue contained about 46% of total sugar, 14% of crude protein, 12% of ash, and 0.16% of crude saponin. Among inorganic substances in ginseng residue, amount of Mg, Na, K and Ca were much more than other inorganic substances. All ginsenosides existed in red ginseng residue. Ganoderma lucidum and Pleurotus ostreatus could be excellently cultured in potato dextrose broth. Most effective additional concentration of residue extract for growth of these fungi was shown to be 0.2%, and the contents of crude protein and amino acid in mycelium were increased when 0.5% of residue extract were added to the medium.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.1
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pp.85-92
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2000
This study was carried out to storage of Pleurotus ostreatus packed in various trays made by different matrials-expanded polystyrene (EPS), rice straw pulp(RP), and RP trays coated with starch, carboxyl methyl cellulose (CMC), polyacrylamide (PAM), alkylketen dimer (AKD), rosin size (RS) and polyethylene glycol (PEG) at 8~1$0^{\circ}C$ and 70~80% relative hymidity for 6 days. At 6 days storage, weight increase of RP and CMC tray was lower (p<0.05) than those of others and the weight of oyster mushroom packed in RP, CMC and AKD tray decreased lower(p<0.05) than those of others. Carbon dioxide contents in trays were increased from 0.5% to 5.5%~8.6% within 1 day storage. Oxygen contents in trays were sharply decreased from 20% to 0.8%~8.2% within 1 day storage. Lightness of oyster mushroom increased all trays. Off flavor appeared stronly in oyster mushroom packed in EPS, AKD and PEG during storage, but was not detected in mushroom packed in starch and CMC until 4 days storage.
Ascorbate oxidizing enzyme from the crude extract of Pleurotus ostreatus was purified by ammonium sulfate precipitation, preparative polyacrylamide gel electrophoresis, DEAE Sepharose CL-6B ion exchange chromatography and Sephadex G-150 gel filtration chromatography. The molecular weight of the enzyme estimated by Sephadex G-150 gel filtration chromatography was 140,000 and that of its subunit by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis 66,000. The optimum pH for the maximum activity of the enzyme was 5.2 and the isoelectric point of the enzyme was 6.0 Km values for L-ascorbic acid and D-isoascorbic acid were both 2.2.$\mu$M, which indicates that the enzyme has the asme affinity towards both substrates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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