To optimize the immunological efficacy of CFC-101, an outer-membrane protein vaccine purified from relatively less pathogenic 4 different Pseudomonas aeruginosa strains, we investigated to establish its dose, administration route, interval and frequency of vaccination in mice. As expected, the 4 CFC-101 producing strains were less pathogenic than the challenging organism, P. aeruginosa GN11189. CFC-101 completely protected the death caused by P. aeruginosa at above 0.05 mg/kg vaccinized by 3 times with 7-day intervals. At the optimally effective dose of 0.2 mg/kg of CFC-101, at least 3 immunizations were necessary for complete protection against P. aeruginosa-induced death. If immunized 3 times, the immunization interval could be shortened up to 2 days to acquire the best protection against P. aeruginosa. CFC-101 was effective either by intraperitoneal, subcutaneous or intramuscular but not by oral administration. The present results show that the newly developed Pseudomonas vaccine, CFC-101, is highly effective for the protection from death caused by pseudomonal infections.
This study was performed to examine the pseudomonas aeruginosa, antibacterial effect of a soft contact lens multi-purpose solution (MPS). Pseudomonas aeruginosa was incubated in the Muller Hinton Broth culture, and treated with 5 MPSs. TO investigate the antibacterial efficiency of MPSs, UV spectrometer was used for measuring optical density of pseudomonas aeruginosa. The antibacterial effect of 4 MPSs was significant except for one MPS. This result suggested that the antibacterial effect of MPSs is dependant on their components, pH. Therefore they had antibacterial effect of the pseudomonas aeruginosa.
This study presents a fluorescent mechanism for two-step amplification by combining two widely used techniques, exponential amplification reaction (EXPAR) and catalytic hairpin assembly (CHA). Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) engaged in competition with the complementary DNA in order to attach to the aptamer that had been fixed on the magnetic beads. The unbound complementary strand in the liquid above was utilized as a trigger sequence to initiate the protective-EXPAR (p-EXPAR) process, resulting in the generation of a substantial quantity of short single-stranded DNA (ssDNA). The amplified ssDNA can initiate the second CHA amplification process, resulting in the generation of many double-stranded DNA (dsDNA) products. The CHA reaction was initiated by the target/trigger DNA, resulting in the release of G-quadruplex sequences. These sequences have the ability to bond with the fluorescent amyloid dye thioflavin T (ThT), generating fluorescence signals. The method employed in this study demonstrated a detection limit of 16 CFU/ml and exhibited a strong linear correlation within the concentration range of 50 CFU/ml to 105 CFU/ml. This method of signal amplification has been effectively utilized to create a fluorescent sensing platform without the need for labels, enabling the detection of P. aeruginosa with high sensitivity.
Among total 176 strains with antialgal effects isolated from So-ok stream in Korea, Pseudomonas aeruginosa AJ1 showed the highest removal efficiency for an algal species Microcystis aeruginosa (clear zone of diameter 50.0 mm on algal lawn after 20 days). The algal growth was suppressed even when the supernatant of AJ1 culture was applied, suggesting that extracellular substances are responsible for its antialgal activity. The removal activity of AJ1 was optimal under the following condition: pH 8, $30^{\circ}C$, and mannitol as a carbon source. The antialgal activity of AJ1 appeared to be dependent of the growth phase of M. aeruginosa, i.e., the highest at the early phase, but not its own phase. As expected, the algicidal effect was improved as the amount of the treated supernatant was increased; the highest removal efficiency (80.3%) was achieved when 40 ml/L of the supernatant was used. Interestingly, however, the removal rate was opposite. The highest removal rate ($8.2{\mu}g$ chl-a/ml supernatant/day) was achieved when low concentration (10 ml/L) was applied. These results suggest that P. aeruginosa AJ1 is a promising biological agent to control the problematic algal bloom.
A bacterial strain capable of synthesizing polyhydroxyalkanoates (PHAs) with an unusual pattern of monomer units was isolated from activated sludge using the enrichment culture technique. The organism, identified as Pseudomonas aeruginosa P-5, produced polyesters consisting of 3-hydroxyvalerate and medium-chain-length (MCL) 3-hydroxyalkanoate monomer units when $C_{-odd}$ alkanoic acids such as nonanoic acid and heptanoic acid were fed as the sole carbon source. Solvent fractionation experiments using chloroform and hexane revealed that the 3-hydroxyalkanoate monomer units in these polyesters were copolymerized. The molar concentration of 3-hydroxyvalerate in the polyesters produced were significantly elevated up to 26 mol% by adding 1.0 g/L valeric acid as the cosubstrate. These copolyesters were sticky with low degrees of crystallinity. The PHA synthase genes were cloned, and the deduced amino acid sequences were determined. P. aeruginosa P-5 possessed genes encoding MCL-PHA synthases (PhaC1 and PhaC2) but lacked the short-chain-length PHA synthase gene, suggesting that the MCL-PHA synthases from P. aeruginosa P-5 are uniquely active for polymerizing (R)-3-hydroxyvaleryl-CoA as well as MCL (R)-3-hydroxyacyl-CoAs.
This study was to evaluate microcystin production by two strains of cyanobacteria (Microcystis aeruginosa and Planktothrix agardhii) in response to three different levels of direct (0,4,8 inds.) or indirect (0,25, 50% of zooplankton culture media filtrate) exposures to zooplankton (Daphnia magna and Moina macrocopa). The cell biomass and intracellular microcystin (MC) were measured everyday. The survival rates of zooplankton were evaluated for daily intervals for the direct exposure. The intracellular MC produced peaked on the day 3 or 4, and then decreased over the both exposure experiment. In the direct experiment, the MC values were significantly different among the control and zooplankton treatments (ZT; repeated measures-ANOVA: P< 0.039). The MC contents of P. agardhii strain (No.204) were significantly higher (Tukey test, P< 0.082) in ZT2 (8 inds.) than in ZT2 (4 inds.). On the peak day, the intracellular MC exposed to both zooplanktons was significantly higher than the control (One-way ANOVA, P< 0.021). Higher zooplankton survivals were observed in the M. aeruginosa strain (No. 111) rather than in high toxic P. agardhii strain. In the indirect experiment, the intracellular MC of the M. aeruginosa strain was significantly different among the control and zooplankton culture media filtrate (ZCMF)treatments (rm-ANOVA: P<0.004), The MC exposed ZCMF2 (50%) were significantly higher than in ZCMFI (25%: Tukey test, P< 0.025) for both strains. This study strongly supports the induced-defensive MC production of potentially toxic cyanobacteria in response to the presence of zooplankton.
Lipoxygenase (LOX) is an industrial enzyme with wide applications in food and pharmaceutical industries. The available structure information indicates that eukaryotic LOXs consist of N terminus β-barrel and C terminus catalytic domains. However, the latest crystal structure of Pseudomonas aeruginosa LOX shows it is significantly different from those of eukaryotic LOXs, including the N-terminal helix domain. In this paper, the functions of this N-terminal helix domain in the soluble expression and catalysis of P. aeruginosa LOX were analyzed. Genetic truncation of this helix domain resulted in an insoluble P. aeruginosa LOX mutant. The active C-terminal domain was obtained by dispase digestion of the P. aeruginosa LOX derivative containing the genetically introduced dispase recognition sites. This functional C-terminal domain showed raised substrate affinity but reduced catalytic activity and thermostability. Crystal structure analyses demonstrate that the broken polar contacts connecting the two domains and the exposed hydrophobic substrate binding pocket may contribute to the insoluble expression of the C terminus domain and the changes in the enzyme properties. Our data suggest that the N terminus domain of P. aeruginosa LOX is required for its soluble expression in E. coli, which is different from that of the eukaryotic LOXs. Besides this, this N-terminal domain is not necessary for catalysis but shows positive effects on the enzyme properties. The results presented here provide new and valuable information on the functions of the N terminus helix domain of P. aeruginosa LOX and further improvement of its enzyme properties by molecular modification.
Recently, there is growing interest in ultraviolet (UV) irradiation as a disinfection technic in drinking water production due to its effectiveness to inactivate microorganisms such as Crytosporidium parvum without forming disinfection byproducts. However, UV disinfection is known for its drawback such as photoreactivation. Despite many works concerning the photoreactivation, most of works were focused on indicator or non pathogenic microorganisms. The objective of this study is to examine the photoreactivation of Pseudomonas aeruginosa which is an opportunistic pathogen as UV radiation by LP and MP UV lamp was applied. The result showed that P. aeruginosa had high photo repair efficiency regardless of the type of UV irradiation. Both of the effective log repair values of LP and MP UV irradiation were found approximately 2.6 log. In addition, photo repaired P. aeruginosa was not significantly different in forming biofilm in comparison with non treated P. aeruginosa.
Microcystis aeruginosa (M. aeruginosa) is a cyanobacterium species that can form harmful algal blooms in freshwater bodies worldwide. The use of Artemisia asiatica extracts to control M. aeruginosa inhibition will be environmentally friendly and promising. Artemisia asiatica extracts removed successfully upto 88% of M. aeruginosa pH 8 at $25^{\circ}C$ of temperature. These results was indicated that the amount of 2.24 g/L Artemisia asiatica extracts was removed 1g dryweight/L of M. aeruginosa. The kinetic data showed substrate inhibition kinetics and maximum growth rate was obtained when the M. aeruginosa was grown in medium containing 2.5 g/L of initial concentration of Artemisia asiatica extracts. In the various growth control models, Luong model showed the highest correlation coefficient of 0.9916. Therefore, the Luong model was the most suitable control model for the growth control of M. aruginosa using Artemisia asiatica extracts. In conclusion, the growth control of M. aruginosa using Artemisia asiatica extracts can be applied in the field without controlling the temperature and pH of rivers and streams, and it is possible to control the growth of M. aruginosa efficiently in a short time. The natural extract, Artemisia asiatica extracts, can be a promising inhibition due to its high efficiency and low dose requirements.
Temperature and pH conditions were studied for an effective biosurfactant production by Pseudomonas aeruginosa YPJ-80. Efficient methods of biosurfactant separation were also investigated. pH-uncontrolled experiments at 35$^{\circ}C$ and an initial pH of 8 resulted in the best cell growth (3.6 g/L) and biosurfactant production (0.073 g biosurfactant/g cell). Biosurfactant separation was most efficient using solvent extraction with chloroform/methanol (2:1 vol%) followed by acidification using 1N HCl.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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