It is essential to clone the preptide transporter in order to obtain better understanding of its molecular structure, regulation, and substrate specificity. Characteristics of an endogenous peptide transporter in oocytes were studied along with expression of an exogenous protor/peptide cotransporter from rabbit intestine. And further efforts toward cloning the transporter were performed. The presence of an endogenous peptide transporter was detected in Xenopus laevis oocytes by measuring the uptake of $0.25/{mu}M(10{\;}{\mu}Ci/ml)[^3H]$-glycylsarcosine (Gly-Sar) at pH 5.5 with or without inhibitors. Yptake of Gly-Sae in oocytes was significantly inhibited by $25{\mu}M$ glycine nd sarcosine. This result suggests that a selective transporter is involved in the endogneous uptake of dipeptides. Collagenase treatment of oocytes used to strip oocytes from ovarian follicles did not affect the Gly-Sar uptake. Changing pH from 5.5 to 7.5 did not affect the Gly-Sae uptake significantly, suggesting no depedence of the endogenous transporter on a transmembrane proton gradient. An exogenous $H^+/pep-tide$ contransported was expressed after microinjection of polyadenylated messenger ribonucleic acid $[poly(A)^+ -mRNA]$ obtained from rabbit small intestine. The Gly-Sar uptake in mRNA-injected oocytes was 9 times thigher than that in water-injected oocyltes. Thus, frog occytes can be utilized fro expression cloning of the genes encoding intestinal $H^+$peptide contransporters. Size fractionation of mRNA was successfully obtained using this technique.
To evaluate the effectiveness of intrauterine insemination (IUI) in the treatment of infertility, timed-intercourse and intrauterine insemination by husband in stimulated cycles with clomiphene citrate and gonadotropins were compared in a total of 105 cycles. Patients received 100mg of clomiphene citrate daily for 5 days starting on day 3 of the menstrual cycle followed by hMG or FSH. Doses of exogenous gonadotropins were adjusted by the follicular development and concentrations of serum estradiol $(E_2)$. More than 3 follicles reaching >16 mm were present in the ovary, 5,000 IU of hCG was administered intramusculary. Patients received a maximum of three intercourse or IUI cycles for the treatment. Severe male (<$10{\times}10^6$ motile sperm) or age factor (>39 y) patients were excluded in this study. Pregnancy was classified as clinical if a gestational sac or fetal cardiac activity was seen on ultrasound. The overall clinical pregnancy rates were 17.1% per cycle (18/105) and 21.2% per patient (18/85). The pregnancy rates (per cycle) were 17.5% (11/63) in intercourse and 16.7% (7/42) in IUI groups, respectively. IUI had no significant improvement in pregnancy rate compared with timed-intercourse. The multiple pregnancy rates were 11.1% (1 twin and 1 triplet). No patient developed ovarian hyperstimulation. Abortion rate was 28.6% (2/7) in IUI group only. The delivery and ongoing pregnancy rates were 15.2% per cycle (16/105) and 18.8% per patient (16/85). There were no differences in age, duration of infertility, follicle size and level of estradiol $(E_2)$ on the day of hCG injection in pregnant and non-pregnant groups. However, total doses of gonadotropins were higher in pregnant group than in non-pregnant group (p<0.01). Pregnancy rate was not affected by ovulatory status at the time of insemination. These results indicate that well timed-intercourse in stimulated cycles is as effective as IUI for infertile couples.
It is now common practice to attempt ovarian hyperstimulation in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) to promote the development of multiple preovulatory follicles and to maximize the number of mature egg available. There are several drugs for hyperstimulation such as clomiphene citrate only, clomiphene citrate and human menopausal gonadotropin (HMG) and HMG only. Accumlated experience has shown that the hyperstimulation of the ovary in IVF-ET results in high pregnancy rate. But the hyperstimulation of the ovary in IVF-ET may cause the hyperandrogenism, so we must consider the adverse effect on pregnancy rate of the hyperandrogenism. Little is known about the functional significance of androgen for the follicular growth, however, the hyperandrogenism might interfere with oocyte maturation. The aim of the present investigation was to determine the serum profiles of estradiol, androstenedione and testosterone during the hyperstimulated menstrual cycles in IVF. The results were summarized as follows: 1. There was a gradual increase in the mean levels of serum estradiol, androstenedione, and testosterone approaching follicular maturation. 2. The mean serum estradiol levels in the hyperstimulated groups were significantly higher than that in the control group in late follicular phase and ovum retrieval (ovulation) day (p<0.01). 3. The mean serum androstenedione levels in the clomiphene citrate groups were significantly higher than that in the control group in late follicular phase (p<0.01). There was no statistically significant different in the mean serum androstenedione levels between the control group and the HMG group (p>0.05). 4. There was no statistically significant difference in the mean levels of testosterone among each group (p>0.05). 5. There was no statistically significant different in the mean levels of estradiol, androstenedione and testosterone between the fertilized patients and non-fertilized patients in clomiphene citrate and HMG group (p>0.05).
This study was aimed to determine the biometry of genital organs, incidence of gynecological disorders and pregnancy loss in Black Bengal goat (Capra hircus). Genitalia of 118 does were collected from local abattoirs. Biometric parameters of genital organs were measured and gross and histopathological examinations were carried out for detection of abnormalities. For gravid uterus, age of the fetus was determined by measuring crown-rump length. There was no significant difference in the length, width and weight of right and left ovaries (P>0.05). However, the number of follicles between left ($5.3{\pm}2.3$) and right ovaries ($7.4{\pm}2.7$) varied significantly (P<0.05). The mean length of right fallopian tube and uterine horn were not varied with those of left fallopian tube and uterine horn. The length of uterine body, cervix and vagina were $1.3{\pm}0.1cm$, $3.3{\pm}0.5cm$ and $6.8{\pm}1.3cm$, respectively. Overall, 29 (24.6%) genitalia had abnormalities. Fifteen genitalia (12.7%) had ovarian abnormalities including ovaro-bursal adhesions (6.8%), parovarian cyst (5.1%) and follicular cyst (0.9%). Uterine abnormalities were found in 12 genitalia (10.2%) and predominant uterine lesion was endometritis (6.8%) followed by adenomyosis (1.7%), hemorrhagic lesion on endometrial surface (0.9%) and cyst in broad ligament (0.9%). In addition, cyst in fallopian tube (0.9%) and vagina (0.9%) were recorded. The proportion of slaughtered pregnant goats was 15.3% (18/118). The pregnancy wastage was highest in the first month (50.0%) followed by second (33.3%) and third (16.7%) month. It can be concluded that ovaro-bursal adhesions, parovarian cyst and endometritis are the gynecological disorders of major concern in Black Bengal goat.
Im, Ji Woo;Lee, Chae Young;Kim, Dong-Hwan;Bae, Hae-Rahn
한국발생생물학회지:발생과생식
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제24권3호
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pp.177-185
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2020
Although many aquaporin (AQP) transcripts have been demonstrated to express in the female reproductive tract, the defined localizations and functions of AQP subtype proteins remain unclear. In this study, we investigated the expression of AQP1, AQP3, AQP5, AQP6, and AQP9 proteins in female reproductive tract of mouse and characterized their precise localizations at the cellular and subcellular levels. Immunofluorescence analyses for AQP1, AQP3, AQP6, and AQP9 showed that these proteins were abundantly expressed in female reproductive tract and that intense immunoreactivities were observed in mucosa epithelial cells with a subtype-specific pattern. The most abundant aquaporin in both vagina and uterine cervix was AQP3. Each of AQP1, AQP3, AQP6, and AQP9 exhibited its distinct distribution in stratified squamous or columnar epithelial cells. AQP9 expression was predominant in oviduct and ovary. AQP1, AQP3, AQP6, and AQP9 proteins were mostly seen in apical membrane of ciliated epithelial cells of the oviduct as well as in both granulosa and theca cells of ovarian follicles. Most of AQP subtypes were also expressed in surface epithelial cells and glandular cells of endometrium in the uterus, but their expression levels were relatively lower than those observed in the vagina, uterine cervix, oviduct and ovary. This is the first study to investigate the expression and localization of 5 AQP subtype proteins simultaneously in female reproductive tract of mouse. Our results suggest that AQP subtypes work together to transport water and glycerol efficiently across the mucosa epithelia for lubrication, proliferation, energy metabolism and pH regulation in female reproductive tract.
Background: Research on the reproductive physiology of Water and Sika deer, an endemic in Korea, still needs to be completed. This study analyzed the ovarian development and morphological characteristics of wild Water deer and Sika deer. Methods: Water deer and Sika deer ovaries were collected from the Korean Peninsula and Russia-Korean Peninsula border during the estrus and pregnancy seasons, respectively. And, morphological and physiological analysis and immunohistochemistry were conducted to confirm the detection of Ca2+ and assess the morphological changes in the ovaries. Results: The results of morphological analysis of ovaries during pregnancy and estrus, the development of the corpus luteum and follicles of Water deer showed similar patterns to other mammals. In contrast, the corpus luteum of Sika deer differed in tissue morphology and composition from Water deer. Ca2+ related to tissue metabolism was detected in the theca cells zone of Water deer on the estrus and was highly detected in the luteum cells zone during pregnancy. The hormone receptor protein expression patterns were generally higher in the ovaries of Water deer on the estrus and the pregnancy than in Sika deer. The expression of LH receptor was relatively low in the lutein cell zone, unlikely that of Water deer. The expression of VEGF was also different from Water deer, and the response in Sika deer was relatively very low compared to Water deer in expressing all proteins-related development. Conclusions: Therefore, the results of the study were shown that the composition of the corpus luteum of Sika deer is not clear compared to Water deer, and there are many differences in the functional and morphological formation of the corpus luteum.
체외수정 시술을 위해 중앙대학교부속병원 산부인과학 교실 불임크리닉을 방문한 환자중 1993년 3월부터 1994년 8월까지 난관폐쇄로 인하여 불임이 된 환자 113명(119주기)을 대상으로 GnRH-a 병합요법 중 Short protocol 방법으로 과배란시 임신된 45명(47주기)과 임신이 되지 않은 68명(72주기)에서 hCG 투여 당일 혈청내 E2 및 P4 수치를 측정하여 임신의 결과를 비교하였다. 1. 환자의 평균 연령 및 불임기간은 임신군에서 $33.2{\pm}14.8$세 및 $4.2{\pm}3.4$년이었으며 비 임신군에서는 $34.5{\pm}21.7$세 및 $3.9{\pm}2.8$년으로 연령 및 불임기간의 차이는 없었다. 2. hGC 투여 당일 측정한 혈중 E2치는 임신군에서는 $1643{\pm}987.9$ pg/ml, 비임신군에서는 $1367{\pm}875.8$ pg/ml로 임신군에서 유의하게 높았다(P<0.01). 또한 혈중 LH치는 인신군 에서는 $16.7{\pm}10.4$ ng/ml, 비임신군에서는 $18.3{\pm}8.3$ ng/ml로 임신군에서 유의하게 낮았다 (P<0.01). 혈중 P4치는 임신군에서는 $1.0{\pm}0.7$ ng/ml이었고 비임신군에 서는 $2.1{\pm}1.4$ ng/ml로서 임신군에서 유의하게 낮았다(P<0.001). 3. hCG 투여당일 E2/P4 비는 임신군에서 $1865.6{\pm}318.1$, 비임신군에서는 $1324{\pm}377.7$ 로서 유의한 차이가 있었다(P<0.01)(Table 3). 4. 주기당 수정율은 임신군에서 $61.3{\pm}21.3%$, 비임신군에서는 $41.1{\pm}20.3%$로 임신군에서 의미있게 높았고(P<0.01) 이식된 배아의 수는 임신군 47주기에서 $4.2{\pm}2.2$개, 비임신군 72주기에서는 $2.3{\pm}1.2$개로 두 군간의 차이는 없었다(Table 4). 이상에서 임신이 된 군은 임신이 안된 군보다 혈중 progesterone 치가 의미있게 낮았고 혈중 estradiol 치는 의미있게 높았음을 알 수 있었다. 혈중 progesterone 및 estradiol치는 과배란 유도 후 체외수정시술에 있어서 수정율 및 임신율에 영향을 줄 수 있다고 생각되며 이는 체외수정시술시 과배란후 임신의 예후판정에 효용성이 있을것으로 사료된다.
붕어의 년 생식주기를 밝히기 위해 1993년 2월부터 1994년 10월까지 gonadosomatic index (GSI)를 조사하였다. GSI는 4월부터 7월까지는 높은 수준을 나타내며 개체간에 편차가 큰 것으로 보아 이 기간이 산란기임을 보여준다. 8월부터 9월까지는 년중에서 가장 낮은 수준이며 이때 난소내 여포는 퇴화가 진행 중이었다 10월부터 GSI 값은 증가하여 이듬해 3월에 최대치를 보였다. Human chorionic gonadotropin (HCG 10 lU), $17\alpha$, 20\beta-dihydroxyprogesterone\;(1-100{\mu}g/ml)$ 및 phorbol 12-myristate 13-acetate (TPA, protein kinase C activator, 0.1-10${\mu}M$)는 인공배양 시 난모세포의 성숙을 유도하였으나 $4\alpha-phorbol$ 12, 13-didicanoate ($4\alpha-PDD$, phorbol ester analogue, $(25{\mu}M$)는 성숙을 일으키지 않았다. 또한, HCG (10 IU), prostaglandin $F_{2\alpha}$ (0.1-10${\mu}g/ml$) 및 TPA (0.1-10${\mu}M$)는 난모세포의 배란을 유도하였으나 $4\alpha-PDD$$(25\;{\mu}M)$에 의해서는 배란이 일어나지 않았다. 여포세포의 $17\alpha-hydroxyprogesterone$은 HCG (1 IU, 10 IU) 및 forskolin (adenylate cyclase activator, 0.1-10 ${\mu}M$)에 의해 생성이 촉진되었으며 HCG (10 IU) 및 forskolin $(10 {\mu}M)$에 의한 time course 는 3시간 내에 생성량이 증가하여 시간경과에 따른 유의한 차이는 보이지 않았다. 이러한 결과를 종합하면 cyclic AMP와 protein kinase C 는 어류의 난모세포의 성숙과 배란과정에 매우 중요한 역할을 담당하는 것으로 생각된다.
목 적: 성선자극호르몬과 GnRH agonist (GnRH)를 동시에 중단하는 1$\sim$2 일간의 단기 coasting이 임신율을 포함한 난소과자극증후군 예방에 미치는 효과를 조사하고자 한다. 연구방법: 체외수정시술을 위한 과배란유도 시 15 mm 이상의 난포가 20 개 이상이고 혈중 E$_2$ 농도가 4,000 pg/ml 이상일 때 coasting을 시도한 37 명의 여성들을 대상으로 하였다. Coasting은 성선자극호르몬과 GnRH agonist를 동시에 중단하였으며, 초음파상 난포의 상태와 혈중 E$_2$ 농도 에 따라 1일 또는 2일 동안 시행하였다. 혈중 E$_2$ 농도, 채취된 난자 수, 수정율, 임신율 등을 후향적으로 비교 분석하였다. 결 과: 평균 혈중 E$_2$ 농도는 coasting 시작 당일 6,993 pg/ml 에서 hCG 투여일에 3,396 pg/ml로 감소하였다. 평균 채취 난자 수와 수정율은 15.7개와 70%였다. 15명 (40.6%)이 임신을 하였고 착상율은 15.2%였다. 26명 (70.3%)이 1일, 11명 (29.7%)이 2일 동안 coasting 하였다. 평균 혈중 농도의 감소율은 1일 coasting한 군에서 43%, 2일 costing한 군은 15% (첫날)와 81% (둘째날)이었다. 임신율은 두 군간 유사하였고, 중증도 이상의 OHSS는 발생하지 않았으며 3명 (8.1%)에서 경미한 OHSS가 나타났다. 결 론: 성선자극호르몬과 GnRH agonist의 통시 중단에 의한 1$\sim$2 일의 단기 coasting은 체외수정의 결과에 영향을 주지않고 OHSS 를 예방하는데 성공적으로 적용될 수 있을 것으로 사료된다.
목 적: 클로미펜을 사용한 배란유도시 얇은 자궁내막을 보였던 환자들에서 성선자극호르몬에 클로미펜 또는 레트로졸을 병합 투여하는 과배란유도 방법의 임상적 효용성을 비교 분석하고자 하였다. 연구방법: 이전의 클로미펜을 사용한 배란유도 주기에서 8 mm 미만의 얇은 자궁내막을 보였던 불임 환자들에서 시행된 성선자극호르몬 병합 과배란유도/인공수정 51주기가 연구에 포함되었다. 월경주기 제3일째부터 5일 동안 클로미펜+성선자극호르몬 군은 일일 클로미펜 100 mg을 투여하였고 (n=26) 레트로졸+성선자극호르몬 군은 일일 레트로졸 2.5 mg 또는 5 mg을 투여하였다 (n=25). 양 군에서 월경주기 제5~7일째부터 우성난포의 크기가 18 mm 이상에 도달할 때까지 이틀에 한 번씩 성선자극호르몬은 75~150 IU를 투여하였다. 양 군에서 성선자극호르몬 총 사용량, 자궁내막의 두께, 자궁내막의 형태, hCG 투여일의 14 mm 이상 난포의 수, hCG 투여일, 임신율, 다태 임신율을 비교하였으며 통계 분석은 Mann-Whitney U test or Fisher's exact test 등을 이용하였다. 결 과: 연령, 불임기간, 이전 인공수정 횟수, 기저 혈중 LH, FSH, $E_2$ 농도, 불임의 원인 등의 임상적 특성은 양 군간 차이가 없었다. 성선자극호르몬 병합 과배란유도시 배란전 자궁내막의 두께는 이전의 클로미펜을 사용한 주기와 비교하여 유의하게 증가되었다. 성선자극호르몬 총 사용량, hCG 투여일, 자궁내막의 삼중선 비율, 임신율 및 다태 임신율은 유의한 차이가 없었다. 클로미펜+성선자극호르몬 군에 비하여 레트로졸+성선자극호르몬 군에서 14 mm 이상 난포의 개수는 유의하게 적었고 ($3.7{\pm}1.7$ vs. $2.8{\pm}1.7$, p=0.03). 배란 전 자궁내막 두께는 유의하게 두꺼웠다 ($7.7{\pm}1.5\;mm$ vs. $9.1{\pm}1.7\;mm$, p<0.05). 결 론: 배란유도를 위하여 클로미펜 사용시 얇은 자궁내막을 보였던 환자들에서 인공수정을 위한 과배란유도시클로미펜 또는 레트로졸을 성선자극호르몬과 병합하여 사용하는 방법은 클로미펜의 자궁내막에 대한 부정적인 효과를 피할 수 있는 것으로 사료된다. 적절한 자궁내막의 발달 및 적절한 난포의 성장 측면에서 성선자극호르몬에 레트로졸을 병합하는 과배란유도 방법이 클로미펜을 병합하는 방법에 비하여 더 유용할 수 있으나 추가적인 대규모 전향적 연구가 필요할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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