Taurine is present in a variety of tissue and exhibits many important physiological functions in the cell. Although it is known that many tissues mediate taurine transport, its functions of taurine transport in bone have not been identified yet. In the present study, we investigated the expression of taurine transporter (TauT) and taurine uptake using mouse stromal ST2 cells and osteoblast-like MC3T3-E1 cells, which is bone related cells. Detection of TauT MRNA expression in these cells were performed by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). (omitted)
Background: The aim of this study is to verify the feasibility of using silk fibroin (SF) as a potential membrane for guided bone regeneration (GBR). Methods: Various cellular responses (i.e., cell attachment, viability, and proliferation) of osteoblast-like MG63 cells cultured on an SF membrane were quantified. After culturing on an SF membrane for 1, 5, and 7 days, the attachment and surface morphology of MG63 cells were examined by optical and scanning electron microscopy (SEM), cell viability was determined using a 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, and cell proliferation was quantified using 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) fluorescence staining. Results: Optical microscopy revealed that MG63 cells cultured on the SF membrane proliferated over the 7-day observation period. The viability of cells cultured on SF membranes (SF group) and on control surfaces (control group) increased over time (P < 0.05); however, at respective time points, cell viability was not significantly different between the two groups (P > 0.05). In contrast, cell proliferation was significantly higher in the SF membrane group than in the control group at 7 days (P < 0.05). Conclusions: These results suggest that silk fibroin is a biocompatible material that could be used as a suitable alternative barrier membrane for GBR.
Journal of Dental Rehabilitation and Applied Science
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v.19
no.3
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pp.195-206
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2003
Several factors can affect the formation of bone tissues surrounding implants. One of the factors is electrical stimulation. It is known to change the movement of cells, form and destroy cells, and alter concentration and chemical component of soft tissues and bones. The effect of electrical stimulation on bone formation can vary according to the intensity of electric currents, stimulating time, the method of sending electric currents, and tissues and cells currents are applied to. This study examines how various enviroments affect osteoblasts. (1) effect on osteoblast with varying intensity of currents Osteoblast-like cells were raised on four plates where implants can be placed. A constant current sink (MC3T3-E1) that can adjust the intensity and stimulating time of electric currents was used. The four plates were stimulated with $0{\mu}A$, $10{\mu}A$, $20{\mu}A$, and $40{\mu}A$, respectively. After 24 hours of stimulation, the number and distribution of cells surrounding implants were examined. (2) effect on osteoblast with varying conditions The 3 study was performed with same method. (1) The change of attached cell number 72-hour after application of various currents (2) The change of attached cell number 72-hour after application of various interval (3) The comparison of attached cell number by implant surface texture The following are the results: 1. The distribution and density of cells surrounding implant is highest under the intensity of electric currents of $20{\mu}A$. 2. The number of cells attached implants is highest under the intensity of electric currents of $20{\mu}A$. 3. The number of cells attached implants is highest under continous electric currents 4. The number of cells attached implants is not different by implant surface texture.
A variety of titanium (Ti) and its alloys are used in the clinical procedures of bone regeneration for periodontal and dental implant therapies. This study was performed to determine the effect of different surface dental implant materials on biologic responses of a MG-63 human osteoblast-like cell line. MG-63 cells were cultured on Ti coated with hydroxyapatite (HA), calcium metaphosphate (CMP), anodized (A), which compared with non-coated Ti (control). The appearances of surface of dental implant materials and the morphology of these cells were assessed by scanning electron microscopy (SEM). The gene expression profiles of MG-63 cells cultured on Ti were examined by human cDNA microarray (1,152 elements). The expression of several genes was up- and down-regulated by different surfaces of dental implant materials. Interesting, the genes correlated with cellular adhesion and extra cellular matrix (ECM) formation were enhanced, in accordance surface morphology of the dental implant materials used.
Park, Chan-Jin;Cho, Lee-Ra;Yi, Yang-Jin;Ko, Sung-Hee
Journal of Dental Rehabilitation and Applied Science
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v.22
no.3
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pp.261-270
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2006
The success of an implant is determined by its integration into the tissue surrounding the biomaterial. Surface roughness is considered to influence the behavior of adherent cells. The aim of this in vitro study was to determine the effect of surface roughness on Saos-2 osteoblast-like cells. Titanium disks, blasted with $75{\mu}m$ aluminum oxide particles and anodic oxidized and machined titanium disks were prepared. Saos-2 were plated on the disks at a density of 50,000 cells per well in 48-well dishes. After 1 hour, 1 day, 6 days cell numbers were counted. One day, 6 days after plating, alkaline phosphatase(ALPase) activity was determined. Compared to experimental groups, the number of cells was significantly higher on control group. The stimulatory effect of surface roughness on ALPase was more pronounced on the experimental groups than on control group. These results demonstrate that surface roughness alters proliferation and differentiation of osteoblasts. The results also suggest that implant surface roughness may play a role in determining phenotypic expression of cells.
Park, Sung-Jae;Bae, Sang-Bum;Kim, Su-Kyoung;Eom, Tae-Gwan;Song, Seung-Il
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.37
no.3
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pp.214-224
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2011
Objective: This study examined the potential of the in vitro osteogenesis of microtopographically modified surfaces, RBM (resorbable blasting media) surfaces, which generate hydroxyapatite grit-blasting. Methods: RBM surfaces were modified hydroxyapatite grit-blasting to produce microtopographically modified surfaces and the surface morphology, roughness or elements were examined. To investigate the potential of the in vitro osteogenesis, the osteoblastic cell adhesion, proliferation, and differentiation were examined using the human osteoblast-like cell line, MG-63 cells. Osteoblastic cell proliferation was examined as a function of time. In addition, osteoblastic cell differentiation was verified using four different methods of an ALP activity assay, a mineralization assay using alizarin red-s staining, and gene expression of osteoblastic differentiation marker using RT-PCR or ELISA. Results: Osteoblastic cell adhesion, proliferation and ALP activity was elevated on the RBM surfaces compared to the machined group. The cells exhibited a high level of gene expression of the osteoblastic differentiation makers (osteonectin, type I collagen, Runx-2, osterix). imilar data was represented in the ELISA produced similar results in that the RBM surface increased the level of osteocalcin, osteopontin, TGF-beta1 and PGE2 secretion, which was known to stimulate the osteogenesis. Moreover, alizarin red-s staining revealed significantly more mineralized nodules on the RBM surfaces than the machined discs. Conclusion: RBM surfaces modified with hydroxyapatite grit-blasting stimulate the in vitro osteogenesis of MG-63 cells and may accelerate bone formation and increase bone-implant contact.
Ha, Hyek-Yung;Ho, Jinn-Yung;Shin, Sun-Mi;Kim, Hye-Jin;Koo, Sung-Ja;Kim, In-Ho;Kim, Chung-Sook
Archives of Pharmacal Research
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v.26
no.11
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pp.929-936
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2003
Methanol extract (MeOH), n-hexane (Hx), chloroform ($CHCl_3$), ethyl acetate (EA), butanol (BuOH) and aqueous ($H_2O$) fractions of Eucommiae Cortex including geniposidic acid (GA), geniposide (GP) and aucubin (AU) were tested for their therapeutic efficacy on osteoporosis. The contents of GA, GP and AU in the cortex and leaf of Eucommia ulmoides Oliver were quantified by HPLC. The effect of Eucommiae Cortex on the induction of growth hormone (GH) release was studied by using rat pituitary cells. The proliferation of osteoblast-like cells increased by herbal extracts was assayed using a tetrazolium (MTT), alkaline phosphatase (ALP) activity, and [$^3H$]-proline incorporation assays. The inhibition of osteoclast was studied by using the coculture of mouse bone marrow cells and ST-2 cells. As a result, the GA, GP and AU were present in the cortex more than in the leaf of E. ulmoides Oliver. The MeOH (1mg/mL), Hx, $CHCl_3$ and EA fractions (each 20 $\mu$ g/mL) had potent induction of GH release. The $CHCl_3$ exhibited the potent proliferation of osteoblasts. The AU, GP and GA were increased proliferation of osteoblasts. In addition, GA ($IC_{50}: 4.43{\times}10^{-7}$M), AU and GP were significantly inhibited proliferation of osteoclast. In summary, it is thought that the components in a part of the fractions of Eucommiae Cortex participate in each step of mechanism for activating osteoblast to facilitate osteogenesis, and suppress osteoclast activity to inhibit osteolysis.
Seo, Bo-Yong;Kim, Young-Min;Choi, Jae-Won;Yun, Mi-Jung;Jeon, Young-Chan;Jeong, Chang-Mo;Kim, Gyu-Cheon;Huh, Jung-Bo
The Journal of Korean Academy of Prosthodontics
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v.53
no.1
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pp.9-18
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2015
Purpose: The purpose of this study is to examine characteristics of implant surface with RBM and anodizing treatments, and to evaluate the responses of osteoblast-like cell (MG-63 cell). Materials and methods: Grade IV titanium disks were fabricated (Diameter 10 mm, thickness 3 mm). Anodizing treatment (ASD) group, RBM and anodizing treatment (RBM/ASD) group, control (machined surface) group were divided. In this study, osteoblast-like cell was used for experiments. The experiments consist of surface characteristics evaluation by FE-SEM images, energy dispersive spectroscopy and stereo-SEM. In order to evaluate cell adhesion evaluation by crystal violet assay and observe cells form by confocal laser microscopy. To assess cell proliferation by XTT assay, cell differentiation by RT-PCR and mineralization by Alizarin red S stain assay. ELISA analyzer was used for Quantitative evaluation. Comparative analysis was run by one-way ANOVA (SPSS version 18.0). Differences were considered statistically significant at P<.05. Results: In ASD group and RBM/ASD group, the surface shape of the crater was observed and components of oxygen and phosphate ions in comparison with the control group were detected. The surface average roughness was obtained $0.08{\pm}0.04{\mu}m$ in the control group, $0.52{\pm}0.14{\mu}m$ in ASD group and $1.45{\pm}0.25{\mu}m$ in RBM/ASD group. In cell response experiments, ASD group and RBM/ASD group were significantly higher values than control group in cell adhesion and mineralization phase, control group was the highest values in the proliferative phase. In RT-PCR experiments, RBM/ASD group was showed higher ALP activity than other groups. RBM/ASD group in comparison with ASD group was significantly higher value for cell adhesion and proliferation phase. Conclusion: In the limitation of this study, we are concluded that the surface treatment with RBM/ASD seems more effective than ASD alone or machined surface on cellular response.
[$K^+$]-selective ion channels were studied in excised inside-out membrane patches from human osteoblast-like cells (G292). Three classes of $K^+$channels were present and could be distinguished on the basis of conductance. Conductances were $270\pm27\;pS,\;113\pm12\;pS,\;48\pm8\;pS$ according to their approximate conductances in symmetrical 140 mM KCl saline at holding potential of -80 mV It was found that the small conductance (48 pS) $K^+$channel activation was dependent on membrane voltage. In current-voltage relationship, small conductance $K^+$channel showed outward rectification, and it was activated by the positive potential inside the membrane. In recordings, single channel currents were activayed by a negative pressure outside the membrane. The membrane pressure increased $P_{open}$ of the $K^+$ channel in a pressure-dependent manner. In the excised-patch clamp recordings, G292 osteoblast-like cells have been shown to contain three types of $K^+$ channels. Only the small conductance (48 pS) $K^+$channel is sensitive to the membrane stretch. These findings suggest that a hyperpolarizing current, mediated in part by this channel, may be associated with early events during the mechanical loading of the osteoblast. In G292 osteoblast-like cells, $K^+$channel is sensitive to membrane tension, and may represent a unique adaptation of the bone cell membrane to mechanical stress.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.36
no.4
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pp.243-249
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2010
Tissue engineered bone (TEB) can replace an autogenous bone graft requiring an secondary operation site as well as avoid complications like inflammation or infection from xenogenic or synthetic bone graft. Adult mesenchymal stem cells (MSC) for TEB are considered to have various ranges of differentiation capacity or multipotency by the donor site and age. This study examined the effect of age on proliferation capacity, differentiation capacity and bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) responsiveness of human bone marrow stromal cells (hBMSC) according to the age. In addition, to evaluate the effect on enhancement for osteoblast differentiation, the hBMSC were treated with Trichostatin A (TSA) and 5-Azacitidine (5-AZC) which was HDAC inhibitors and methyltransferase inhibitors respectively affecting chromatin remodeling temporarily and reversibly. The young and old group of hBMSC obtained from the iliac crest from total 9 healthy patients, showed similar proliferation capacity. Cell surface markers such as CD34, CD45, CD90 and CD105 showed uniform expression regardless of age. However, the young group showed more prominent transdifferentiation capacity with adipogenic differentiation. The osteoblast differentiation capacity or BMP responsiveness was low and similar between young and old group. TSA and 5-AZC showed potential for enhancing the BMP effect on osteoblast differentiation by increasing the expression level of osteogenic master gene, such as DLX5, ALP. More study will be needed to determine the positive effect of the reversible function of HDAC inhibitors or methyltransferase inhibitors on enhancing the low osteoblast differentiation capacity of hBMSC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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