Objectives: This study was performed to evaluate the effect of Dokhwalgisaengtang-gami water extract(DGG) on osteoporosis. Methods: The osteoclastogenesis and gene expression were determined in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. And osteoblastogenesis was also determined in rat calvarial cell. Results: The results were summarized as followes. 1. DGG decreased the number of TRAP positive cell in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. 2. DGG inhibited TRAP activity in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. 3. DGG decreased the expression of NAFTc1, MITF in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. 4. DGG increased the expression of iNOS, COX-2, IL-6 in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. 5. DGG decreased the expression of cathepsin K, MMP-9, TRAP in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. 6. DGG increased cell proliferation of rat calvarial cell. 7. DGG increased ALP activity in rat calvarial cell 8. DGG increased bone matrix protein, collagen synthesis and nodule formation in rat calvarial cell. Conclusions: It is concluded that DGG might decrease the bone resorption resulted from decrease of osteoclast differentiation and it's related gene expression. And DGG might increase the bone formation resulted from increase of osteoblast function.
The ultimate aim of periodontal treatment is periodontal regeneration, which necessiates the regeneration of bone tissues. To evaluate the effects of Dex growth and differentiation of MC3T3-E1 cells, cells were seeded in alpha-modified eagle medium containing 10% fetal bovine serum, 10mM beta-glycerophosphate , $50{\mu}g/ml$ of ascorbic acid, with or without $10^{-7}M$ Dex and examined cell proliferation activities, alkaline phosphatase activities, and bone nodule formation until 25days. The results were as follows : 1. In Dex group, cell proliferation activities were lower until 15 days compared to control group. Bone nodules formation were showed at 10 days. 2. In the time-response effect, ALP activities were increased until the 10 days in control groups thereafter decreased and ALP activities of Dex group were lower aspect than control group until the 10 days In this study, bone nodule formation of osteoblast-like cells were accelerated by Dex and cell proliferation activities, ALP activity of Dex group showed lower than control group. Dex was considered that it did suppress initial growth, but accerelate mineralization of osteoblast-like cells.
Bone marrow derived mesenchymal stem cells (BMSCs) are largely studied for their potential clinical use. But it is hard to get enough number of those cells for clinical trials and give serious pain to the patients. Adipose tissue is derived from the embryonic mesenchyme and contains a stroma that is easily isolated with large amount. This cell population (adipose derived stem cells: ADSCs) can be isolated from human lipoaspirates and like MSCs, differentiate toward the osteogenic, adipogenic, myogenic and chondrogenic lineages. To confirm whether adipose tissue contains stem cells, the ADSCs extracted from omental or subcutaneous fat tissue were expanded during third to fifth passages. The phenotype of the ADSCs was identified by the conventional cell surface markers using flow cytometry: positive for CD29 and CD44, but negative for CD34, CD45, CD117 and HLA-DR that similar to those observed on BMSCs. The ADSCs were able to differentiate into the osteoblast or adipocytes with induction media. Finally, ADACs expressed multiple CD marker antigens similar to those observed on BMSCs and differentiated into osteoblast, adipocyte. With this, human adipotissue contains multipotent cells and may represent an alternative stem cell source to bone marrow-derived MSCs.
Emodin is one of the main active components of a traditional Korean medicine isolated from the root and rhizomes of Rheum palmatum L. In this study, of 222 natural compounds to evaluate the anabolic activities, emodin activated bone morphogenetic protein (BMP)-2 promoter in the differentiation process of mouse osteoblastic MC3T3-E1 cells. Emodin was shown to significantly stimulate the activity and expression of alkaline phosphatase, an earlyphase marker of osteoblastic differentiation, on the differentiation day 7, and induce the osteopontin mRNA expression from the differentiation day 14. In addition, low concentration (up to 5 M) of emodin dramatically promoted the induction of mineralization in MC3T3-E1 subclone 4 cells. The stimulatory effect of emodin on the osteoblast differentiation/mineralization could be associated with its potential to stimulate the BMP-2 gene expression. Although further studies are needed to determine the precise mechanism, this study suggests that the use of herbal medicine containing natural compounds with anabolic activity such as emodin could have a beneficial effect on bone health.
목적 :천축황(天竺黃)이 골대사에 미치는 영향을 검토하고자 생쥐의 골세포를 이용하여 골흡수 억제 효과를 관찰하였다. 방법 :$Interleukin-1{\beta}\;(IL-1{\beta})$는 시험관내에서 osteoblast를 조절하는 것으로 알려져 있는데, 천축황(天竺黃)이 $IL-1{\beta}$ 유발된 $PGE_2$, 생성에 관한 영향을 관찰하였다. 결과 :천축황(天竺黃)는 osteoblast체 독성을 나타내지 않았으며, $PGE_2$ 생성을 억제하였다. 특히, 천축황(天竺黃)을 1시간동안 전처리한 경우 $PGE_2$의 합성을 억제하여 골세포 보호효과가 인정되었으며, 또한 골 흡수인자인 $IL-1{\beta}$에 의해 유발된 alkaline phosphatase의 활성도 억제하였는데, 천축황(天竺黃) 전처리후 16시간째에 훨씬 높은 억제효과를 나타내었다. 유사하게 천축황(天竺黃)을 1시간 동안 전처리한 경우 osteocalcin의 생성이 증가되었다. 또한, calcitonin이 나타내는 osteoclast및 osteoblast 함유세포에서 골 흡수를 억제하였다. 결론 :천축황(天竺黃)은 osteoclast가 매개된 골흡수를 억제하는 효과가 인정되었다.
한국응용약물학회 1998년도 Proceedings of UNESCO-internetwork Cooperative Regional Seminar and Workshop on Bioassay Guided Isolation of Bioactive Substances from Natural Products and Microbial Products
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pp.145-145
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1998
In the present study, we have demonstrated that taurine could stimulate the production of nitric oxide and the activity of ERK2 (extracellular signal regulated protein kinase or pp42 MAP kinase). Nitric oxide(NO), the product of inducible nitric oxide synthase(iNOS), is known to be implicated in the metabolism of bone. ERK cascade plays a key role in the gene expression of iNOS in osteoblastic cell. We investigated whether taurine (l-20mM) could stimulate ERK2 activity, nitric oxide production, and inducible nitric oxide synthase in osteoblast-like UMR-106 cells. Nitric oxide was measured spectophotometrically as nitrite and the activation of ERK2 and iNOS was studied using Western 145 blot analysis. Taurine increased the production of nitric oxide in a dose-dependent manner and the effect was reached to a maximum at 10 mM. The activation of iNOS were consistent with NO levels. The tyrosine phosphorylation of ERK2 was increased by taurine in a time-dependent manner. The these result suggest that taurine might stimulate the production of nitric oxide in osteoblast-like cells by the activation of ERK2 and could regulate the metabolism of bone via nitric oxide.
The nature of the implant surface can directly influence cellular response, ultimately affecting the rate and quality of new bone tissue formation. The aim of this in vitro study was to investigate if human osteoblast-like cells, Saos-2, would respond differently when plated on disks of magnesium titanate and machined titanium. Magnesium titanate disks were prepared using Micro Arc Oxidation(MAO) methods. Control samples were machined commercially pure titanium disks. The cell adhesion, proliferation and differentiation were evaluated by measuring cell number, and alkaline phosphatase(ALPase) activity at 1 day and 6 day after plating on the titanium disks. Measurement of cell number and ALPase activity in Saos-2 cells at 1 day did not demonstrate any difference between machined titanium and magnesium titanate. When compared to machined titanium disks, the number of cells was reduced on the magnesium titanate disks at 6 day, while ALPase activity was more pronounced on the magnesium titanate. Enhanced differentiation of cells grown on magnesium titanate samples was indicated by decreased cell proliferation and increased ALPase activity.
Osteoporosis is a progressive bone disease characterized by low bone mass which is caused by disturbance in the balance between the activities of osteoblasts and osteoclasts. Postmenopausal osteoporosis is one of the most common disorders in women after menopause, which is linked to an estrogen deficiency and characterized by an excessive loss of trabecular bone. Rubus coreanus has been used for their various pharmacological properties in Asia as a traditional medicine. To investigate the effect of unripe fruits of R. coreanus 30% ethanol extract (RCE) on osteoblast-like cells (MG63) differentiation, we examined the effects of RCE on in vitro osteoblastic differentiation markers, alkaline phosphatase (ALP) activity and receptor activator of nuclear factor ${\kappa}$-B ligand (RANKL) and osteoprotegerin (OPG) expression. The high concentration (50 and $100{\mu}g/mL$) of RCE markedly increased ALP activity, whereas decreased the RANKL/OPG. We also investigated the effect of RCE on M-CSF plus RANKL-induced differentiation of pre-osteoclast cells (RAW 264.7). RCE treatment remarkably inhibited M-CSF/RANKL-induced formation of osteoclast-like multinuclear cells from RAW 264.7 cells. Moreover, the inhibitory effect of RCE was reduced by selective estrogen receptor-${\alpha}$ antagonist. Our research suggests that suggested that unripe fruits of R. coreanus may act beneficial effects on bone mass by regulating both osteoblast and osteoclast.
Rumex crispus (Curled Dock, Polygonaceae) is a perennial wild plant used in traditional medicine as a laxative, astringent, and to treat blood and skin disease. The ethanol extract of R. crispus was obtained and its carbohydrate contents were analyzed using high-performance anion-exchange chromatography with pulsed amperometric detection. The anabolic effects of R. crispus in human osteoblastic MG-63 cells were investigated using the WST-8 assay, alkalinephosphatase (ALP) assay, and mineralization assay. The ethanol extract increased the proliferation of MG-63 cells and stimulated ALP activity in a dose-dependent manner over a 72-hrs period. Additionally, the ethanol extract dose-dependently stimulated the formation of bone nodules in MG-63 cells treated for 12 days. The ethyl acetate fraction from the ethanol extract did not affect osteoblast viability but induced an increase in ALP activity. In conclusion, the ethanol extract of R. crispus increases the proliferation and bone-forming activity of osteoblasts, and hence it could be used in the development of bone-forming stimulatory nutraceuticals and osteoporosis-related medicines.
Park, Seoyoung;Kim, Joo-Hyun;Son, Younglim;Goh, Sung-Ho;Oh, Sangtaek
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권6호
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pp.1063-1066
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2016
Longan (Dimocarpus longan Lour.) has been used as a traditional oriental medicine and possesses a number of physiological activities. In this study, we used cell-based herbal extract screening to identify longan fruit extract (LFE) as an activator of osteoblast differentiation. LFE up-regulated alkaline phosphatase (ALP) activity, induced mineralization, and activated Runx2 gene expression in MC3T3-E1 cells. Furthermore, treatment of MC3T3-E1 cells with LFE promoted the phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase1/2 (Erk1/2); however, abrogation of Erk1/2 activation with PD98059 resulted in down-regulation of the phospho-SMAD1/5/8 and Runx2 levels, which in turn reduced the ALP activity. Our findings suggest that LFE exerts its osteogenic activity through activation of the ERK signaling pathway and may have potential as an herbal therapeutic or a preventive agent for the treatment of osteoporosis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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