• 제목/요약/키워드: Oligomeric state

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Functional Expression of Amylosucrase, a Glucan-Synthesizing Enzyme, from Arthrobacter chlorophenolicus A6

  • Seo, Dong-Ho;Jung, Jong-Hyun;Choi, Hyun-Chang;Cho, Hyun-Kuk;Kim, Hee-Hang;Ha, Suk-Jin;Yoo, Sang-Ho;Cha, Jaeho;Park, Cheon-Seok
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제22권9호
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    • pp.1253-1257
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    • 2012
  • A gene (acas) designated as ${\alpha}$-amylase was cloned from Arthrobacter chlorophenolicus A6. The multiple amino acid sequence analysis and functional expression of acas revealed that this gene really encoded an amylosucrase (ASase) instead of ${\alpha}$-amylase. In fact, the recombinant enzyme exhibited typical ASase activity by showing both sucrose hydrolysis and glucosyltransferase activities. The purified enzyme has a molecular mass of 72 kDa and exhibits optimal hydrolysis activity at $45^{\circ}C$ and a pH of 8.0. The analysis of the oligomeric state of ACAS with gel permeation chromatography revealed that the ACAS existed as a monomer.

Biodistribution of 99mTc Tricarbonyl Glycine Oligomers

  • Jang, Beom-Su;Lee, Joo-Sang;Rho, Jong Kook;Park, Sang Hyun
    • Toxicological Research
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    • 제28권4호
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    • pp.235-240
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    • 2012
  • $^{99m}Tc$ tricarbonyl glycine monomers, trimers, and pentamers were synthesized and evaluated for their radiolabeling and in vivo distribution characteristics. We synthesized a $^{99m}Tc$-tricarbonyl precursor with a low oxidation state (I). $^{99m}Tc(CO)_3(H_2O)_3^+$ was then made to react with monomeric and oligomeric glycine for the development of bifunctional chelating sequences for biomolecules. Labeling yields of $^{99m}Tc$-tricarbonyl glycine monomers and oligomers were checked by high-performance liquid chromatography. The labeling yields of $^{99m}Tc$-tricarbonyl glycine and glycine oligomers were more than 95%. We evaluated the characteristics of $^{99m}Tc$-tricarbonyl glycine oligomers by carrying out a lipophilicity test and an imaging study. The octanol-water partition coefficient of $^{99m}Tc$ tricarbonyl glycine oligomers indicated hydrophilic properties. Single-photon emission computed tomography imaging of $^{99m}Tc$-tricarbonyl glycine oligomers showed rapid renal excretion through the kidneys with a low uptake in the liver, especially of $^{99m}Tc$ tricarbonyl triglycine. Furthermore, we verified that the addition of triglycine to prototype biomolecules (AGRGDS and RRPYIL) results in the improvement of radiolabeling yield. From these results, we conclude that triglycine has good characteristics for use as a bifunctional chelating sequence for a $^{99m}Tc$-tricarbonyl-based biomolecular imaging probe.

실란 커플링제에 의해 표면이 개질된 실리카 나노입자의 분광학적 분석 (Spectroscopic Analysis of Silica Nanoparticles Modified with Silane Coupling Agent)

  • 송성규;김정혜;황기섭;하기룡
    • Korean Chemical Engineering Research
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    • 제49권2호
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    • pp.181-186
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    • 2011
  • 본 연구에서는 실리카 나노 입자의 표면 개질을 위해 실란 커플링제인 3-(trimethoxysilyl)propylmethacrylate(MPS) 를 사용하여 표면 개질 반응을 수행하였다. 용매의 pH, MPS의 가수 분해 반응시간, 표면 개질 반응시간 및 실리카 표면의 실라놀기(Si-OH)에 대한 MPS의 몰 비를 변화하여 각각의 반응조건이 실리카 표면개질 반응에 미치는 영향을 연구하였다. 개질반응 후 Fourier Transform Infrared Spectroscopy(FTIR), 원소분석(EA) 및 고체 상태 cross-polarization magic angle spinning(CP/MAS) Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy(NMR)법을 사용하여 표면이 개질된 실리카 입자들의 분석을 수행하였다. 연구 결과 용매의 pH가 4.5일 때 MPS가 단량체 형태로 실리카 표면의 실라놀기와 반응하고 이외의 pH에서는 MPS가 이량체, 삼량체 혹은 사량체의 올리고머 형태로 실리카의 실라놀기와 반응함이 우세함을 나타내었다. 가수분해반응 시간을 30분에서 90분으로 증가시키면 MPS가 올리고머 형태로 실리카 표면의 실라놀기와 반응하는 것이 우세하고, 투입한 MPS 몰 비의 증가도 MPS가 올리고머 형태로 실리카 표면의 실라놀기와 반응하는 것이 우세함을 나타내었다.

dicA promoter DNA에 붙는 H-NS 단백질에 의한 dicA 유전자의 발현 조절 (H-NS binding on dicA promoter DNA inhibits dicA gene expression)

  • 윤상훈;이연호;임헌만
    • 미생물학회지
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    • 제55권3호
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    • pp.191-198
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    • 2019
  • H-NS는 대장균에서 DNA 결합 단백질로 수많은 유전자의 발현에 영향을 주는 것으로 잘 알려져 있다. DicA 단백질은 dicF, dicB의 발현을 억제하여 대장균의 분열을 조절한다. dicA의 발현에 Cnu, H-NS의 관여 여부는 CnuK9E 돌연변이가 $37^{\circ}C$에서 dicA의 발현을 억제하여 대장균이 길게 자라는 현상을 일으키며 처음 알려졌다. 하지만 Cnu와 H-NS 두 단백질이 어떻게 dicA의 발현을 조절하는지에 대한 분자적인 기작 연구는 잘 되어있지 않다. 본 연구에서 H-NS가 dicA와 dicC 유전자의 프로모터 부근에 염기서열 특이적으로 결합하며, $37^{\circ}C$ 보다 $25^{\circ}C$에서 DNA 더 잘 결합하는 것을 확인하였다. 그리고 EMSA를 통해 Cnu는 H-NS의 DNA 결합의 oligomeric state를 변화시키는 방식으로 작용하는 것을 보여주었다. In vivo transcription assay와 real time PCR을 통해 H-NS가 제거된 대장균에서 dicA 프로모터 활성이 높아지고, 분열 초기 dicA의 발현이 조절 받지 못하고 증가하는 것으로 보아, H-NS는 dicA의 발현에 억제자로서 기능한다.